Способ получения соматических эмбриоидов в культуре in vitro левзеи сафлоровиднойПатент на изобретение №: 2130709 Автор: Репях С.М., Величко Н.А., Юшкова Е.В., Никонорова Е.В. Патентообладатель: Сибирский государственный технологический университет Дата публикации: 27 Мая, 1999 Адрес для переписки: 660049 Красноярск, ул.Мира, 82, СибГТУ сектор интеллектуальной собственности Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к получению эмбриоидов в культуре растительной ткани. Культуру ткани левзеи сафлоровидной помещают на питательную среду с добавлением микроэлементов по Мурасиге и Скугу, макроэлементов по Sierlis, гормонов, 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты 0,1 - 1 мг/л, 6-бензиламинопурина 0,3 - 1,5 мг/л, гидролизата казеина 150 - 250 мг/л и витаминов: инозит 500 - 5000 мг/л, тиамин солянокислый 2 - 3 мг/л, пиридоксин солянокислый 1 - 2 мг/л, ниацин солянокислый 1 - 2 мг/л. Среду стерилизуют. Культуру культивируют на рассеянном свету при досвечивании в течение 30 - 90 мин ультрафиолетовым светом. Данные условия культивирования ускоряют получение эмбриоидных тканей левзеи сафлоровидной. Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к получению эмбриоидов в культуре растительной ткани. Объектом исследования служила культура ткани левзеи сафлоровидной. Левзея сафлоровидная - эндем Южной Сибири, культура ткани левзеи сафлоровидной является продуцентом ценных биологически активных веществ, в частности экдистероидов. Эмбриоидной ткани левзеи сафлоровидной в культуре in vitro до настоящего времени не выращивалось. Авторами впервые изучены условия и разработан способ получения эмбриоидных тканей левзеи сафлоровидной в культуре in vitro. Известен способ получения эмбриоидов диоскореи кавказской и балканской [Соматический эмбриогенез in vitro диоскореи кавказской и балканской и криосохранение их органогенных каллусных тканей. Л. Чулафич, Д. Грубинич, Р. Вуничич, А. А. Воякова, А.С.Попов. Физиология растений, 1994, т.41, N 6, с. 92-93.]. Выход из 1 г эмбриогенной ткани - 100-300. Соматический эмбриогенез был индуцирован из суспензии клеток каллусной ткани диоскореи кавказской и балканской. Среда содержала 2,4 дихлорфеноксиуксусную кислоту, индолилуксусную кислоту, бензиламинопурин, минеральные компоненты по Мурасиге и Скугу с добавлением 3%-ной сахарозы. Эмбриоиды развивались в присутствии зеатина и абсцизовой кислоты. Культивирование проводили при температуре 25-26oC, освещенности 3 клк, фотопериоде 16/8 час (день-ночь), относительной влажности воздуха 60-70%. Из одного грамма эмбриоидной ткани получали 100-300 соматических зародышей, культивирование проводили 8 недель. Недостатком способа является низкий выход эмбриоидов. Наиболее близким является способ получения эмбриоидов зизифуса [Соматический эмбриогенез и регенерация растений Zizyphus jujula Mill. in vitro. И. В. Митрофанов, О.В. Митрофанова, Д.К. Пандей Физиология растений. 1997 г. т.44., N 1, с. 108-114. Зародыши зизифуса стерилизовали в 90% этиловом спирте, помещают на питательную среду Мурасиге и Скуга с половинной концентрацией макро- и микросолей, содержащую 2,6-нафтилуксусную кислоту, 2,4-дихлорфеноксиуксусную кислоту, глюкозу, агар. Культивирование проводят в термостате при температуре 20-30oC и освещенности 2-3 клк. Число первичных зародышей определяют на 60-е сутки культивирования и достигает 14-15. Недостатком способа является низкий выход эмбриоидов 14 - 15 при продолжительности культивирования 60 суток, который препятствует получению указанного ниже технического результата. Изобретение решает задачу получения эмбриоидной ткани левзеи сафлоровидной. Технический результат - ускоренное получение эмбриоидных тканей левзеи сафлоровидной. Указанный технический результат при осуществлении изобретения достигается тем, что в способе получения соматических эмбриоидов в культуре in vitro левзеи сафлоровидной, включающем приготовление питательной среды по Мурасиге и Скугу, получение и выращивание на ней каллусной ткани, особенность заключается в том, что в питательную среду вносят макроэлементы по Sierlis, гормоны 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты - 0,1-1 мг/л, 6-бензиламинопурина- 0,3-1,5 мг/л и гидролизата казеина 150 - 250 мг/л, витамины инозит - 500-5000 мг/л, тиамин солянокислый 2 - 3 мг/л, пиридоксин солянокислый 1-2 мг/л, ниацин солянокислый 1 -2 мг/л, культивирование проводят на рассеянном свету и досвечивают эмбриоидные ткани 30-90 минут ультрафиолетовым светом. При использовании данных условий культивирования обеспечивается высокий уровень первичного и вторичного синтеза в культуре ткани левзеи сафлоровидной, что приводит к образованию большого количества эмбриоидов. Способ осуществляется следующим образом. Культуру ткани левзеи сафлоровидной помещают на питательную среду с добавлением микроэлементов по Мурасиге и Скугу, макроэлементов по Sierlis, гормонов 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты - 0,1-1 мг/л, 6-бензиламинопурина - 0,3-1,5 мг/л, гидролизата казеина 150 - 250 мг/л и витаминов: инозит -500- 5000 мг/л, тиамин солянокислый 2-3 мг/л, пиридоксин солянокислый 1-2 мг/л, ниацин солянокислый 1 -2 мг/л. Стерилизацию Среды проводят при 1 атм в течение 20 минут. Культивирование происходит на рассеянном свету при досвечивании в течение 30- 90 минут ультрафиолетовым светом. Пример 1 Приготавливают питательную среду состава Макроэлементы: - мг/л KNO3 - 1900 NH4NO3 - 1650 CaCl2  2H2O - 330 MgSO47H2 - 370 KH2PO4 - 170 Микроэлементы: - мг/л MnSO44H2O - 22300 ZnSO47H2O - 8600 H3ВО3 - 6200 KI - 830 CuSO45H2O - 25 Na2MoO42H2O - 250 CoCl26H2O - 25 FeSO47H2O - 27850 Na2EDTA2H2O - 37250 Витамины: мг/л Инозит - 500 Тиамин HCl - 2 Пиридоксин HCl - 1 Ниацин HCl - 1 Гормоны: - мг/л 2,4-Д - 0,1 6-БАП - 0,3 Аминокислотный компонент: - мг/л Гидролизат казеина - 150 Культуру тканей левзеи сафлоровидной выращивают в культуральных сосудах на приготовленной питательной среде. Стерилизацию среды проводят при 1 атм в течение 20 минут. Культивирование проводят на свету в течение 40 суток с ультрафиолетовым досвечиванием в течение 30 минут в сутки. При досвечивании ультрафиолетовым светом в течение 30 минут количество образовавшихся эмбриоидов составило 100-200 шт. на 1 грамм сырого каллуса. Пример 2 Аналогично примеру 1 питательная среда содержит: Макроэлементы: - мг/л KNO3 - 1900 NH4NO3 - 1650 CaCl22H2O - 330 MgSO47H2O - 370 KH2PO4 - 170 Микроэлементы: - мг/л MnSO44H2O - 22300 ZnSO47H2O - 8600 H3ВО3 - 6200 Kl - 830 CuSO45H2O - 25 Na2MoO42H2O - 250 CoCl26H2O - 25 FeSO47H2O - 27850 Na2EDTA2H2O - 37250 Витамины: - мг/л Инозит - 2500 Тиамин HCl - 2,5 Пиридоксин HCl - 1,5 Ниацин HCl - 1,5 Гормоны: - мг/л 2,4-Д - 0,5 6-БАП - 0,8 Аминокислотный компонент: - мг/л Гидролизат казеина - 200 Культивирование проводят на свету в течение 40 суток с ультрафиолетовым досвечиванием в течение 60 минут в сутки. При досвечивании ультрафиолетовым светом в течение 60 минут количество образовавшихся эмбриоидов составило до 700 шт. на 1 грамм сырого каллуса. Пример 3 Аналогично примеру 1 питательная среда содержит: Макроэлементы: - мг/л KNO3 - 1900 NH4NO3 - 1650 CaCl22H2O - 330 MgSO47H2O - 370 KH2PO4 - 170 Микроэлементы: - мг/л MnSO44H2O - 22300 ZnSO47H2O - 8600 H3BO3 - 6200 KI - 830 CuSO45H2O - 25 Na2MoO42H2O - 250 CoCl26H2O - 25 FeSO47H2O - 27850 Na2EDTA2H2O - 37250 Витамины: - мг/л Инозит - 5000 Тиамин HCI - 3 Пиридоксин HCI - 2 Ниацин HCI - 2 Гормоны: - мг/л 2,4-Д - 1 6-БАП - 1,53 Аминокислотный компонент: - мг/л Гидролизат казеина - 250 Культивирование проводили на свету в течение 40 суток с ультрафиолетовым досвечиванием в течение 90 минут в сутки. На 40-е сутки количество эмбриоидов на 1 грамм сырого каллуса составляет 20-25 на рассеянном свету. При значении параметров меньше наименьших содержания гормонов и витаминов и времени экспонирования на ультрафиолетовом свету снижается выход соматических эмбриоидов. При значении параметров больше наибольших уменьшается количество эмбриоидов при ультрафиолетовом досвечивании и не отмечено образования эмбриоидов без досвечивания. Разработанный авторами новый способ позволяет круглогодично получать тысячи единиц посадочного материала в год независимо от сезона. В связи с повышенным содержанием БАВ в эмбриоидных тканях можно использовать данную технологию для производства эмбриоидов с целью последующего извлечения экдистероидов из культивируемых тканей.
Формула изобретенияСпособ получения соматических эмбриоидов в культуре in vitro левзеи сафлоровидной, включающий приготовление питательной среды по Мурасиге и Скугу и Sierlis, содержащей витамины и гормоны, 2,4-дихлорфеноксиуксусную кислоту и 6-бензиламинопурин, культирование каллусной ткани на рассеянном свету и досвечивание ультрафиолетовым светом, отличающийся тем, что питательная среда дополнительно содержит гидролизат казеина в количестве 150-250 мг/л.MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе Дата прекращения действия патента: 26.07.1999 Номер и год публикации бюллетеня: 31-2001 Извещение опубликовано: 10.11.2001 Популярные патенты: 2124290 Препаративная форма в виде раствора для местного применения для обработки животных (варианты), способ получения и способ обработки животных (варианты) ... гликолевого или глицеридного эфира с последующим добавлением 0,005-1,0 мас.%/об. антиоксиданта и добавлением в качестве конечного объема оставшегося количества носителя. 10. Способ обработки и предупреждения внутренних и наружных паразитов животных, включающий местное нанесение на кожу животного авермектинового соединения, отличающийся тем, что на кожу животного наносят раствор препаративной формы по п.1, в расчете на от 1,0 до 50 мг авермектинового соединения. 11. Препаративная форма местного действия для прямого применения на коже животного, эффективная для обработки и предупреждения заражения эктопаразитами и эндопаразитами в течение четырех недель, содержащая соединения ... 2195102 Устройство для отделения грунта и земли от корней и корневищ солодки в качестве лакричного сырья ... 33 штока 34 под действием сжатых витков пружины 38 перемещается вверх и становится между стойкой 5 рамы 1 и цилиндрической шестерней 27 механизма 23. Этим исключается повторное (случайное) зацепление диаметрально ориентированного штифта 41 с шлицевой втулкой 43. Далее оператор включает в работу механизм 22 угловых перемещений барабана 2. Механизмом 22 поворотному валу 19, барабану 2 и его приводу 3 придаются углы качания в пределах 60o от исходного положения. Только затем оператор выключает механизм, удерживающий деформатор 24 в исходном положении. Сложные движения в пространстве: 1) вращение барабана 2 на ведомом валу 14 вокруг общей оси симметрии и 2) периодические наклоны ... 2125366 Доильный аппарат ... 2 в ресивере 3 образуется избыточное давление воздуха. После открытия крана 4 давление по воздушному шлангу 5 передается в емкость 6, в которой по технологической необходимости находится содосолевой раствор или растворы лечебных препаратов, фиксируемые по количеству шкалой 7. Величина давления воздуха в емкости 6 регулируется и поддерживается по его величине при помощи реле давления 8. Кран 9 закрыт. Емкость 6 шлангом содосолевых и других растворов 10 соединена с трехходовым краном 11. Доильное ведро 19 молочным шлангом 15 также соединено с трехходовым краном 11. Разрежение через открытый кран 22, воздушный шланг 21 соединяется с доильным ведром 19, а воздушным шлангом 24 ... 2154938 Способ охлаждения молока на животноводческих фермах и устройство для его осуществления ... трубой с молочным танком, а на соединительной трубе, соединяющей воздухоразделитель и молочный танк, установлен кран (клапан), управляемый датчиком количества молока в воздухоразделителе. Кроме того, установка снабжена конденсатором, через который вакуумный насос соединен с молочным танком. Недостатком этих способа и устройства являются: - потери молока и изменение его физических характеристик при "холодном" кипении его по всем объему; - необходимость иметь вакуумируемые резервуары большой вместимости и прочности, что увеличивает материалоемкость и стоимость устройства. Известен способ охлаждения молока на животноводческих фермах, предусматривающий подачу его в вакуумированный ... 2158069 Способ повышения урожайности сельскохозяйственных культур ... кислород воздуха, аммиак и оксидазы микроорганизмов. В дальнейшее развитие представлений о сущности процесса гумусообразования крупный вклад внесли исследования С. Ваксмана, М.М. Кононовой, В. Фляйга (Тюрин, 1965), согласно которым расширилось представление о механизме гумификации процессами поликонденсации, путем окисления фенолов и взаимодействия их с аминокислотами или другими азотосодержащими органическими веществами. В связи с последним ими делается вывод о том, что процесс гумификации - это процесс карбоксилирования органических соединений, в результате чего идет постоянное как присоединение, так и потеря азота. По мнению авторов, основной критерий в биохимических ... |
Еще из этого раздела: 2452155 Лапа культиватора 2275006 Устройство для крепления стеблей малины в вертикальном и горизонтальном положениях 2098936 Осевой вентилятор 2422377 Биоцидный концентрат 2384988 Способ и устройство для управления сельскохозяйственной машиной 2051971 Способ определения биологической активности -эндотоксинов различных патотипов bacileus thuringiensis 2067832 Способ борьбы с грибковыми инфекциями растений 2391804 Почвообрабатывающий каток 2071371 Способ нагрева тканей животного и устройство для его осуществления 2450501 Способ повышения плодородия почвы на склонах |
Изобретения в сельском хозяйстве
Обработка почвы в сельском и лесном хозяйствах
Посадка, посев, удобрение
Уборка урожая, жатва
Обработка и хранение продуктов полеводства и садоводства
Садоводство, разведение овощей, цветов, риса, фруктов, винограда, лесное хозяйство
Новые виды растений или способы их выращивания
Производство молочных продуктов
Животноводство, разведение и содержание птицы, рыбы, насекомых, рыбоводство, рыболовство
Поимка, отлов или отпугивание животных
Консервирование туш животных, или растений или их частей
Биоцидная, репеллентная, аттрактантная или регулирующая рост растений активность химических соединений или препаратов
Хлебопекарные печи, машины и прочее оборудование для хлебопечения
Машины или оборудование для приготовления или обработки теста
Обработка муки или теста для выпечки, способы выпечки, мучные изделия
|
|
||