Среда для индукции каллусогенеза из незрелых зародышей ячменяПатент на изобретение №: 2101933 Автор: Тырышкин Л.Г., Афанасенко О.С., Шевченко Д.Н. Патентообладатель: Всесоюзный научно-исследовательский институт защиты растений Дата публикации: 20 Января, 1998 Адрес для переписки: подача заявки06.05.1992 публикация патента20.01.1998 Изображения  Использование: сельское хозяйство и биотехнология. Сущность изобретения: среда для индукции каллусогенеза из незрелых зародышей ячменя содержит KNO3, MgSO4  7H2O, CaCl22H2O, KH2PO4, /NH4/2SO4, H3BO3, MnSO4 4H2O, ZnSO47H2O, Na2MoO4 2H2O, CuSO45H2O, CoCl2 6H2O, KJ, Na2ЭДТА, FeSO47H2O, глицин, тиамин хлорид, пиридоксин HCL, никотиновую кислоту, аспарагин, глутамин, мезоинозит, дрожжевой экстракт, AgNO3, источник углерода, 2,4,5Т, агар и воду и дополнительно содержит мальтозу и культуральную жидкость Bipolaris sorokiniana при указанных соотношениях компонентов. 3 табл.
, ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУИзобретение относится к биотехнологии и физиологии растений и может быть использовано для получения растений-регенерантов ячменя. Известно культивирование незрелых зародышей ячменя на среде СС /1/. Однако выход регенерантов зависит от сорта ячменя. Наиболее близкой из известных, принятой за прототип является среда MT, содержащая KNO3, MgSO4 7H2O, CaCl2 2H2O, KH2PO4, (NH4)2SO4, H3ВО3, MnSO4 4Н2O, ZNSO4 7Н2O, Na2MoO4 2H2O, CuSO4 5H2O, CoCl 6H2O, KJ, Na2ЭДТА, FeSO4 7H2O, глицин, тиамин хлорид, пиридокоин HCl, никотиновую кислоту, аспарагин, глутамин, мезоинозит, дрожжевой экстракт, AgNO3, сахарозу, 2,4,5Т, агар /2/. Однако использование этой среды не позволяет получать растения-регенеранты с высокой частотой у любых сортов ячменя. Предлагаемое изобретение направлено на увеличение частоты образования эмбриогенных каллусов и растений-регенерантов у любых сортов ячменя. Для этой цели незрелые зародыши ячменя длиной 1 1,5 мм с прозрачным щитком культивируют на среде следующего состава: H3ВО3, MnSO4 4Н2O, ZNSO4 7Н2O, Na2MoO4 2H2O, CuSO4 5H2O, CoCl 6H2O, KJ, Na2ЭДТА, FeSO4 7H2O, глицин, тиамин хлорид, пиридоксин HCl, никотиновая кислота, аспарагин, глутамин, мезоинозит, дрожжевой экстракт, AgNO3, 2,4,5Т, мальтоза, культуральная жидкость Bipolaris sorokiniana, агар. Технология приготовления среды. Готовят концентрат макросолей, при этом каждую из макросолей растворяют отдельно в небольшом количестве воды, а затем объем доводят до 1 л. Аналогично готовят концентрат микросолей и витаминов. Для приготовления 1 л питательной среды берут следующие соли, мг/л (табл. 1). Пример 1. Макро- и микросоли, а также витамины в виде концентратов вносят в 0,5 л дистиллированной воды и добавляют аспарагин, глутамин, мезоинозит, дрожжевой экстракт, культуральную жидкость, мальтозу, агар тщательно перемешивают и раствор доводят до 1 л дистиллированной водой. Среду разливают в литровые колбы по 0,5 л в каждую, закрывают ватно-марлевой пробкой под пергамент и стерилизуют в автоклаве 20 мин при 0,8 атм. После автоклавирования добавляют 2,4,5Т в виде концентрированного раствора в этаноле и водный раствор AgNO3. Для получения культуральной жидкости токсигенный штамм В. sorokiniana культивируют в темноте при 26oC в среде, содержащей: тартрат аммония 5 г/л, NH4NO3 1 г/л, KH2PO4 1 г/л, MnSO4 0,5 г/л, NaCl 0,1 г/л, CaCl2 0,13 г/л, MnSO4 1 мг/л, дрожжевой экстракт 1 г/л, микроэлементы 1 мл, глюкоза 30 г/л в колбах по 200 мл среды. Через 28 дней мицелий гриба удаляли фильтрованием. Культуральную жидкость подвергали лиофильной сушке и субстрат растворяли в 1/10 объема дистиллированной воды от исходной культуральной жидкости; полученный раствор обозначают КЖх10. Среду для культивирования незрелых зародышей хранят при комнатной температуре в темноте. Пример 2. Из выращенных в теплице растений ячменя семена стерилизуют в диоциде 20 мин и трижды промывают стерильной водой. В ламинаре извлекают зародыши длиной 1 1,5 мм и помещают на поверхность среды щитком вверх по 10 зародышей на чашку Петри. Чашки помещают в термостат при t 25oC. Через 30 дней учитывают мягких, прозрачных, липких неэмбриогенных каллусов и плотных структурированных, желтых эмбриогенных каллусов. Результаты оценки заносят в таблицу. Частота образования эмбриогенных каллусов на среде NMT составляет 0 68,7% на среде ЛТ 59 100% в зависимости от генотипа сорта /табл. 2/. Таким образом, использование предлагаемой среды увеличивает частоту образования эмбриогенных каллусов до 60 100% и соответственно выход растений-регенерантов до 90 100% от числа эмбриогенных каллусов /табл. 3/.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯСреда для индукции каллусогенеза из незрелых зародышей ячменя, содержащая KNO3, MgSO4 7H2O, CaCl2 2H2O, KH2PO4, (NH4)2SO4, H3BO3, MnSO4 4H2O, ZnSO4 7H2O, Na2MoO4 2H2O, CuSO4 5H2O, CoCl2 6H2O, KJ, Na2 ЭДТА, FeSO4 7H2O, глицин, тиамин хлорид, пиридоксин HCl, никотиновую кислоту, аспарагин, глутамин, мезоинозит, дрожжевой экстракт, AgNO3, источник углерода, 2,4,5Т, агар и воду, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит мальтозу и культуральную жидкость Bipolaris sorokiniana при следующих соотношениях компонентов, мг/л воды: KNO3 2490 3040 MgSO4 7H2O 130 201 CaCl2 2H2O 102 185 KH2PO4 380 430 (NH4)2SO4 402 500 H3BO3 4,3 7,4 MnSO4 4H2O 1,56 2,67 ZnSO4 4H2O 6,0 10,3 Na2MoO4 2H2O 0,17 0,3 CuSO4 5H2O 0,02 0,03 CoCl2 6H2O 0,02 0,03 KJ 0,57 0,99 FeSO4 7H2O 19,4 33,3 Na2ЭДТА 26,1 44,7 Глицин 1,9 2,1 Тиамин хлорид 0,9 1,1 Пиридоксин HCl 0,4 0,55 Никотиновая кислота 0,40 0,55 Аспарагин 230 260 Глутамин 230 260 Мезоинозит 100 500 Дрожжевой экстракт 100 500 AgNO3 8,0 15,0 Мальтоза 23000 30000 2,4,5Т 1,5 3,0 Культуральная жидкость Bipolaris sorokiniana, мл/л 3,5 6,0 Агар-агар 7000 9000 Дистиллированная вода До 1 лоПопулярные патенты: 2181542 Способ хранения эритроцитов в условиях охлаждения при отсутствии кислорода (варианты) ... этого суспензии эритроцитов, снижения уровня кислорода эритроцитов в суспензии эритроцитов и охлаждения суспензии эритроцитов до 4oС. Целесообразно в дальнейшем исключить доступ кислорода к охлажденным эритроцитам. Выгоды и преимущества настоящего изобретения включают сохранение уровней АТФ и снижение гемолиза и накопление мембранных везикул в охлажденных эритроцитах, как следствие создания среды (снижение уровня О2), которая предотвращает разрушение гемоглобина, в результате чего могут быть продлены периоды полезного хранения в условиях охлаждения. Краткое описание чертежей Сопровождающие чертежи, которые приводятся здесь и образуют часть описания, иллюстрируют воплощение ... 2151493 Установка для гидропонного выращивания растений ... изобретению, в одних отверстиях конвейерной ленты размещены вегетационные сосуды для выращиваемого материала, а в других - светонепроницаемые элементы плавучести, причем подача питательного раствора и его периодический отвод осуществляются с нижней стороны конвейерной ленты в зоне корней растений. Кроме того, каждый вегетационный сосуд выполнен в виде сетчатой ячейки, в нижней части которой размещен пористый материал для высева семян. При такой конструкции установки лента замкнутого конвейера выполняет три функции: две своих основных - используется в качестве несущей поверхности для выращиваемых растений и сообщает им движения от посадочного устройства до уборочного, и третью ... 2076603 Способ повышения урожайности сельскохозяйственных культур ... 12 л 0,003%-ного рабочего раствора препарата. Емкость резервуара ПС-10 200 л. Следовательно, чтобы заполнить этот резервуар, необходимо 6,0 г препарата. Таким образом, для получения нужного количества рабочей жидкости необходимо заготовить маточный раствор, взяв 6,0 г препарата и растворив его в 10 л воды. Резервуар протравителя заполняют наполовину водой, добавляют маточный раствор препарата и доливают водой. После этого приступают непосредственно к обработке семян. Предлагаемый препарат получают следующим образом. Семена озимой ржи проращивают в течение 3 4 суток при температуре 20 - 25oС. По истечении этого времени проростки заливают 2 2,5 объемами дистиллированной воды или ... 2384048 Способ испытания травяного покрова на пойме малой реки ... покрова на пойме малой реки по п.1, отличающийся тем, что по течению малой реки или ее притока за естественные характерные места принимают излучины и другие формы руслообразования малой реки или ее притока. 4. Способ испытания травяного покрова на пойме малой реки по п.1, отличающийся тем, что размечают не менее трех гидрометрических створов в поперечном направлении в пределах водозащитной полосы с расстояниями между ними по течению малой реки или ее притока не более чем 100-кратной ширины зеркала воды в летнюю межень, а пробные площадки располагают на промежутках не менее чем 10 м между собой и от кромки зеркала воды прибрежных пробных площадок. 5. Способ испытания ... 2420060 Способ генетической трансформации растений селекционно-ценных образцов клевера лугового ... ... |
Еще из этого раздела: 2175477 Способ борьбы с тлями 2235464 Гербицидно-действующее средство 2400960 Ориентирующее устройство для корнеплодов конической формы 2193304 Захват лесозаготовительной машины 2027346 Лесозаготовительная машина 2158069 Способ повышения урожайности сельскохозяйственных культур 2495561 Машина лесозаготовительная 2007901 Устройство для хранения овощей и фруктов 2403703 Способ интенсификации роста растений 2114107 Производные триазола, способ их получения и инсектоакарицидная композиция |
Изобретения в сельском хозяйстве
Обработка почвы в сельском и лесном хозяйствах
Посадка, посев, удобрение
Уборка урожая, жатва
Обработка и хранение продуктов полеводства и садоводства
Садоводство, разведение овощей, цветов, риса, фруктов, винограда, лесное хозяйство
Новые виды растений или способы их выращивания
Производство молочных продуктов
Животноводство, разведение и содержание птицы, рыбы, насекомых, рыбоводство, рыболовство
Поимка, отлов или отпугивание животных
Консервирование туш животных, или растений или их частей
Биоцидная, репеллентная, аттрактантная или регулирующая рост растений активность химических соединений или препаратов
Хлебопекарные печи, машины и прочее оборудование для хлебопечения
Машины или оборудование для приготовления или обработки теста
Обработка муки или теста для выпечки, способы выпечки, мучные изделия
|
|
||