Штамм бактерий bacillus thuringiensis, предназначенный для получения препарата против личинок кровососущих двукрылыхПатент на изобретение №: 2064264 Автор: Соколова Э.И., Чекалина Л.И., Кулиева Н.М. Патентообладатель: Соколова Эльвира Ивановна Дата публикации: 27 Июля, 1996 Адрес для переписки: подача заявки25.11.1993 публикация патента27.07.1996 Изображения  Использование: биотехнология, в частности средства борьбы с комарами. Сущность: предложен штамм культуры Bacillus thuringiensis, обладающий энтомоцидной активностью. Штамм предназначен для получения препарата против личинок кровососущих двукрылых. 2 табл. , ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУИзобретение относится к области биотехнологии и касается биологических средств борьбы с кровососущими двукрылыми, в частности с комарами. Кровососущие двукрылые, такие как комары, могут являться переносчиками возбудителей заболеваний человека и животных, и, например, распространением малярии, арбовирусов и других инфекционных заболеваний человек обязан комарам. В этой связи борьба с кровососущими переносчиками заболеваний является важной социально-медицинской проблемой. Учитывая особенности цикла развития кровососущих комаров, основные усилия по контролю за их численностью направлены на уничтожение личинок комаров, обитающих в водной среде. Известные химические средства борьбы с личинками кровососущих комаров загрязняют окружающую среду и могут обладать токсичностью по отношению к полезным растениям и животным. Биологические ларвицидные средства не вызывают таких острых экологических проблем и предпочтительны в использовании. Наиболее распространенные биологические препараты, токсичные в отношении кровососущих комаров, готовят на основе энтомопатогенных бактерий вида Bacillus thuringiensis серотипа Н-14. Известен, например, штамм Bacillus thuringiensis Н-14 N 71, на основе которого создан отечественный ларвицидный препарат бактокулицид [1] Штамм обладает выраженной энтомоцидной активностью в отношении личинок комаров, но проявляет довольно высокие требования к источникам питания, что затрудняет широкомасштабное производство препарата. Наиболее близким к предлагаемому (прототипом) можно считать штамм Bacillus thuringiensis Н/14 BTS-393 N В-2547, предназначенный для производства энтомопатогенного препарата бактоларвицит против кровососущих комаров [2] Штамм обладает высокой токсигенностью в отношении личинок комаров, пригоден для крупномасштабного культивирования, не токсичен для теплокровных животных и человека. Как и типичные представители вида Васillus thuringiensis, упоминаемый штамм Н/14 BTS-393 N В-2547 спорогенный, и это является его относительным недостатком с точки зрения экологии. Цель изобретения изыскать штамм Bacillus thuringiensis, coxpaняющий энтомоцидную активность штамма-прототипа, но не являющийся спорогенным. Поставленная задача была решена в результате поисковой и селекционной работы, завершившейся выделением штамма Bacillus thuringiensis ИПМ-1501, отвечающего поставленным требованиям. Селекционированный штамм Васillus thuringiensis ИПМ-1501 обладает типичными признаками микроорганизмов этого вида. Морфологические признаки Клетки палочковидные, прямые с закругленными концами, подвижные, расположенные одиночно, парами или цепочками, размером 2,0-5,0 х 1,0-1,3 мкм. Кристаллы округлые, неправильной формы, различающиеся по размерам от 0,3 до 1,1 мкм. Граммположительные. Перитрихии. Особенностью является отсутствие спор. Культуральные и физиолого-биохимические признаки На мясо-пептонном агаре колонии среднего размера, диаметр колоний достигает 4-12 мм у 5-суточной культуры, пигмента не образует. Край колоний ровный или слегка волнистый, структура мелкоэернистая, внутри вязкой консистенции. На мясо-пептонном бульоне образует пленку. На коагулированном желтке и на ломтиках картофеля дает рост. Колонии гладкие. Пигмент на ломтиках картофеля не образует. Молоко коагулирует и пептонизирует без образования пигмента. Слабо образует уреазу на среде с мочевиной. На яично-желтковых средах образует розовый пигмент. Желатину разжижает. Крахмал гидролизует. На средах с казеином образует зоны просветления. Хорошо усваивает глюкозу, мальтозу, маннозу, крахмал. Не использует сахарозу, лактозу, маннит, ксилозу, арабинозу, целлобиозу. Слабо активен в отношении эскулина и не разлагает салицин. Использует пептон, ферментативные и кислотные гидролизаты дрожжей, дрожжевой автолиэат, мясные отвары и бульоны, кукурузные, пшеничные и соевые экстракты. Штамм выращивают на соево-крахмальной среде, содержащей, мас. соевую муку 3,5; кукурузный крахмал 1,2; зеленую патоку 0,9 по редуцирующим веществам; двузамещенный фосфат калия 0,13; сернокислый магний 0,02; хлористый кальций 0,008; сернокислый марганец 0,008 и водопроводную воду до 100. Значение ph среды до стерилизации составляет 7,7+0.1. Интенсивный рост культуры наблюдается к 12-15 часам культивирования при температуре 29+1oC. Кристаллообразование отмечается к 19-22 часам и заканчивается к 36-38 часам культивирования. Свободные кристаллы составляют 60-70% от общего количества кристаллов. Споры не образуются. Штамм хранится на косяках с мясо-пептонным агаром. Лиофилизированную культуру хранят при температуре 3-4oC. В глицерине культуру хранят при -50oC. После 12 мес хранения культура сохраняет основные морфолого-культуральные, физиологические и патогенные свойства. Серологические свойства Проявляет антигенное родство с сывороткой 14 сероварианта Васillus thuringiensis. Антагонистические свойства На личинках комаров Aedes aegypty 11 возраста ЛК-50 составляет не более 0,0008 мг/л. Продуцирует дельта-эндотоксин и обладает инсектицидной активностью против личинок комаров родов Aedes, Anopheles, Culex. Штамм депонирован в Коллекции промышленных микроорганизмов Научно-исследовательского института генетики и селекции промышленных микроорганизмов под регистрационным номером ВКМП В-6562. На основе этого штамма могут быть приготовлены энтомогенные препараты в виде порошков, суспензий, паст или в других препаративных формах. Сравнительные лабораторные испытания препарата на основе предложенного штамма Bacillus thuringiensis ИПМ-1501 и препарата на основе известного штамма Bacillus thuringiensis Н/14 BTS-393 N В-2547 показали их практически одинаковую эффективность, что следует из следующих данных табл. 1. Аналогичные результаты были получены и при полевых испытаниях тех же препаратов на рисовых полях в Краснодарском крае, что видно из представленных в табл. 2 данных. Полученные результаты показывают, что по эффективности предложенный штамм не уступает известному, а некоторые различия в эффективности по срокам лежат в пределах ошибки. Следующие примеры дополнительно поясняют сущность изобретения. Пример 1. В качестве посевного материала используют вегетативную культуру Bacillus thuringiensis ИПМ-1501, выращенную в течение 14 ч на мясо-пептонном агаре. Посевным материалом засевают колбы объемом 750 мл воду (до 100). Культивирование проводят в течение 41 ч при температуре 29+1oC на качалке при 240 об/мин. LK 50 культуральной жидкости для личинок комаров Aedes aegypti II возраста составляла 0,0004 мл/л. Пример 2. Культуру Bacillus thuringiensis ИПМ-1501 выращивают в периодическом режиме в ферментере АПК-20. В качестве инокулята используют суспензию вегетативных клеток 12-часовой культуры, выращенных на мясо-пептонном агаре. Культивирование проводят в течение 42 ч на соево-крахмальной среде, описанной в Примере 1, при температуре 29+1oC при числе оборотов мешалки 300-340 об/мин и при подаче 1 объема воздуха на 1 объем среды в час. Культуральную жидкость подвергают сепарации и получают пасту кремового цвета. LK 50 полученной пасты для личинок комаров Anopheles messeae II возраста составляла 0,0003 мл/л. По данным заявителя аспорогенные культуры Bacillus thuringiensis для приготовления биологических средств борьбы с кровососущими комарами ранее не использовались.ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯШтамм бактерий Bacillus thuringiensis ВКПМ В-6562, предназначенный для получения препарата против личинок кровососущих двукрылых.Популярные патенты: 2495556 Секционный отсекатель дозатора и сельскохозяйственный агрегат, содержащий его ... относящиеся и функционально присоединенные к каждой из заслонок дозаторов, приспособленные для обеспечения перемещения соответствующих заслонок дозаторов из открытого положения в закрытое положение, и обратно. 5. Сельскохозяйственный агрегат по п.4, в котором исполнительные средства являются исполнительными устройствами, выбираемыми из группы, содержащей исполнительные устройства с электрическим управлением, исполнительные устройства с гидравлическим управлением и исполнительные устройства с электрогидравлическим управлением. 6. Сельскохозяйственный агрегат по п.4, в котором навигационная система GPS или ГЛОНАСС вызывает перемещение одного или нескольких исполнительных ... 2065260 Гидравлическая система самоходной сельскохозяйственной машины ... сообщена с одной линией соответствующей секции многосекционного гидрораспределителя и с штоковой полостью соответствующего управляемого обратного клапана второго дополнительного блока, бесштоковая полость каждого из которых сообщена с другой линией данной секции многосекционного гидрораспределителя и посредством дополнительного обратного клапана с соответствующей штоковой полостью соответствующего, кроме последнего, обратного управляемого клапана первого дополнительного блока, кроме того, штоковая полость последнего управляемого обратного клапана данного дополнительного блока сообщена с бесштоковой полостью последнего управляемого обратного клапана второго дополнительного ... 2455825 Пестицидная аэрозольная композиция ... к баллончику присоединяют клапан и через клапан в баллончик загружают 60 частей пропеллента (сжиженный нефтяной газ), с получением аэрозольного препарата, содержащего 100 частей аэрозольной композиции (далее в описании называемой сравнительным аэрозолем (11)). Пример получения сравнительного препарата 12 0,1 части бифентрина, 5 частей дихлорметана и 34,9 частей растворителя Isopar M (Exxon Mobil Corp.) загружают в аэрозольный баллончик. Затем к баллончику присоединяют клапан и через клапан в баллончик загружают 60 частей пропеллента (сжиженный нефтяной газ), с получением аэрозольного препарата, содержащего 100 частей аэрозольной композиции (далее в описании называемой сравнительным ... 2123784 Сетное каскадное устройство для промысла поверхностных объектов лова ... дополнительно гидродинамическим устройством. В этом случае на малом ходу судна сбрасывается дрифтерный буй (см. фиг. 2), система оттяжек 19, 20 с грузом 22, парашют 24 и оттяжка 18, дрифтерный буй 17. Завершается постановка выброской концевого буя 14. Выборка сетного каскадного устройства при однозаходных ловушках осуществляется со стороны орудия лова, обеспечивающей удержание рыбы в ловушках при ее подсушке, т.е. в начале при выборке должны выходить входные устройства. При 2-х заходной конструкции переборка производится с подветренного буя сетного каскадного устройства. В прибрежном варианте работы выборка сетного каскадного устройства начинается с подветренной стороны с подъема буя ... 2051971 Способ определения биологической активности -эндотоксинов различных патотипов bacileus thuringiensis ... мл и определяют антибактериальную активность так, как описано в примере 1, в агаризованном разведенном в 3 раза бульоне Хоттингера с добавлением 0,3% твина. Тест-микроорганизм подращивают перед определением антибактериальной активности -эндотоксинов различных патотипов bacileus thuringiensis, патент № 2051971" SRC="/images/patents/421/2051145/948.gif" >-эндотоксинов в присутствии 0,5% ПЭГ-600 и 10-3 М ЭДТА ( что повышает его чувствительность к действию -эндотоксинов различных патотипов bacileus thuringiensis, патент № 2051971" SRC="/images/patents/421/2051145/948.gif" >-эндотоксинов на 30-70%). Значения, приведенные в таблице, показывают, что в данном опыте удельная антибактериальная ... |
Еще из этого раздела: 2160520 Способ создания лакричных плантаций, предпочтительно солодки голой, на бросовых землях 2171570 Устройство для группового учета надоев молока при доении 2261597 Способ борьбы с нематодами - возбудителями болезней сельскохозяйственных растений 2307495 Пневматический высевающий аппарат 2415529 Нижняя тяга для навески трактора 2464780 Способ, устройство и компьютерный программный продукт для управления группой молочного скота 2502793 Масло, семена и растения подсолнечника с модифицированным распределением жирных кислот в молекуле триацилглицерина 2121258 Устройство для вентилирования зерна или другого сыпучего материала (варианты) 2438304 Улей 2437864 Способ микробиологической переработки птичьего помета |
Изобретения в сельском хозяйстве
Обработка почвы в сельском и лесном хозяйствах
Посадка, посев, удобрение
Уборка урожая, жатва
Обработка и хранение продуктов полеводства и садоводства
Садоводство, разведение овощей, цветов, риса, фруктов, винограда, лесное хозяйство
Новые виды растений или способы их выращивания
Производство молочных продуктов
Животноводство, разведение и содержание птицы, рыбы, насекомых, рыбоводство, рыболовство
Поимка, отлов или отпугивание животных
Консервирование туш животных, или растений или их частей
Биоцидная, репеллентная, аттрактантная или регулирующая рост растений активность химических соединений или препаратов
Хлебопекарные печи, машины и прочее оборудование для хлебопечения
Машины или оборудование для приготовления или обработки теста
Обработка муки или теста для выпечки, способы выпечки, мучные изделия
|
|
||