Метод обнаружения скрытых повреждений луковиц чеснокаПатент на изобретение №: 2199205 Автор: Слепко Г.И., Павлов Л.В. Патентообладатель: Всероссийский научно-исследовательский институт селекции и семеноводства овощных культур Дата публикации: 27 Февраля, 2003 Начало действия патента: 24 Марта, 2000 Адрес для переписки: 121353, Москва, Сколковское ш., 2, кв.48, Г.И.Слепко ИзображенияИзобретение относится к методам исследования овощей и контроля их качества и заключается в выявлении пораженных патогенами зубков чеснока на основании окрашивания их поверхности. Чеснок (луковицы или зубки) нагревают при 45-95oС в течение 0,5-8,0 ч в растворе хлористого натрия с концентрацией 2-5% и кислоты, преимущественно уксусной, при рН 3,8-4,3. Повреждения чеснока определяют по окрашиванию ткани в зелено-голубой цвет. Способ позволяет провести раннюю диагностику поражений луковиц фитопаразитами. 2 ил., 1 табл. , , ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУИзобретение относится к области растениеводства, методам исследования сельскохозяйственной пищевой продукции, к разделу методов оценки качества и сохраняемости овощей и касается, в частности, чеснока. Массовое распространение в культуре чеснока гельминтов, клещей и инфeкций приводит к значительным, до 30-48% потерям урожая и отходу луковиц в период хранения вследствие широкого распространения гнилей. Это отчасти обусловлено вегетативным способом размножения чеснока, поскольку патогены сохраняются и могут накапливаться в посевном материале и распространяются с ним. Визуальный метод выявления заболеваний и поражений вредителями является основным в овощеводстве, хранении и в практической селекции. У чеснока наличие клещей и нематод в луковицах устанавливают путем обнаружения их на сухих и сочных чешуях около донца с помощью лупы или бинокуляра, в то время как инфекционные заболевания определяют по характерным симптомам в соответствии с ГОСТ 27569-87 (прототип). Недостатком является то, что в первом случае метод не является прямым, поскольку устанавливает наличие фактора поражения, а не сам результат его действия; во втором случае можно констатировать лишь достаточно четкие симптомы и явное развитие заболеваний. В луковицах инфекция может оставаться латентной, не иметь четких симптомов и до определенного времени сдерживаться иммунитетом. Целью изобретения является разработка чувствительного метода обнаружения повреждений луковиц на начальной стадии инвазирования и вместе с этим разработка дополнительного критерия для оценки качества чеснока и отбора здоровых партий и луковиц на хранение или посадку. Задача состояла в выявлении неразличимых при визуальном наблюдении и незначительных по величине участков поврежденной растительной ткани на поверхности луковиц с помощью гистохимического теста. Поскольку механическое повреждение, начинающееся с внедрения патогена, провоцирует инфицирование и дальнейшее загнивание, постольку луковицы, даже незначительно травмированные, не могут считаться здоровыми. Отсутствие таких повреждений и может быть дополнительным критерием фитопатологической чистоты луковиц. Техническим результатом изобретения являются ранняя диагностика поражения луковиц чеснока фитопаразитами, не требующая идентификации самого патогена; наглядная оценка степени повреждения луковиц, находящихся на хранении. Этот результат достигается тем, что целые неочищенные луковицы или очищенные зубки, составляющие пробу, помещают в раствор уксусной или другой кислоты рН 3,8-4,0 и выдерживают на водяной бане при температуре 80-85oС в течение 30-40 минут. После этого луковицы и зубки охлаждают, освобождают от чешуи. Участки ткани зубков, травмированные в результате жизнедеятельности паразитов, становятся видимыми, поскольку после такой обработки они окрашиваются в зеленый или сине-зеленый цвет разной интенсивности. Если оказываются окрашенными ткани запасного листа, прилегающие к донцу с внешней (выпуклой) стороны зубка, в области корневых бугорков, то такие зубки нельзя считать фитопатологически чистыми; по глубине окрашивания можно судить о степени порчи, о способности образования корней, о качестве продукции и возможной длительности ее хранения. Достаточным основанием для таких выводов и обоснованием метода служат источники, связанные с изучением биохимии луковых растений. Известно, что непременным условием появления вышеупомянутого пигмента у чеснока является разрушение клеточной структуры ткани, ведущее к освобождению S-(I-пропенил)цистеинсульфоксида из мест его локализации в клетках, т.е. вакуолей: именно вследствие разрушения вакуолей происходит освобождение и неестественное взаимодействие этого вещества с другими компонентами клетки (невозможное при сохранении структуры) и возникает зеленое окрашивание. Развитие окрашивания ускоряется при кислых рН и нагревании (T.M. Zukes, in Journ. of food science, vol.51, 6, p.1577, 1986. "Factors governing the greening of garlic puree"). В первоисточнике эта реакция изучалась только на гомогенизированных тканях и изучение не имело отношения к фитопатологии. В данном изобретении реакция впервые применяется для проверки целостности зубков и их фитопатологической оценки. Для ускорения реакции в поврежденных тканях зубка выбран интервал температур 80-95oС - ускорение образования пигмента оказывается существенным, хотя и не максимально возможным, т. к. оно ограничено нежелательным для анализа размягчением ткани, происходящим при кипячении. Добавление соли к раствору кислоты усиливает окрашивание и введено, исходя из того, что соль должна осмотически способствовать выходу содержимого поврежденных вакуолей во внутриклеточное и межклеточное пространство. Выбор условий проведения определений иллюстрирует таблица. В вышеприведенном первоисточнике присутствие или отсутствие соли не имело значения для образования пигмента в пюре из чеснока. В нашем особом случае соль способствует контрастированию окраски, ее содержание целесообразно и достаточно в пределах 2-5%. В источниках использовались разные кислоты - соляная, лимонная. В нашем случае окрашивания мелких повреждений лучше использовать уксусную кислоту. Это может быть связано с обычным присутствием в ней примесей уксусного альдегида (уксусный альдегид, также как и сульфоксид, участвует в реакции образования пигмента). Длительное нагревание при 45oС (по аналогии с тем же источником) может применяться в данном изобретении в особых случаях (см. ниже). Чувствительность метода такова, что с его помощью можно обнаружить незначительные точечные повреждения в основании запасной чешуи сразу после сбора урожая или в процессе дальнейшего хранения у нестрелкующего озимого чеснока (фиг. 1). У озимого стрелкующего метод дает четкий результат только в конце холодного хранения в течение 2,5-3 месяцев. Различие связано, по-видимому, с уровнем содержания веществ-участников реакции у этих форм. Фиг. 2а отображает суть изобретения: показан целый зубок чеснока, который был перед обработкой специально надрезан ножом; после обработки по вышеописанному методу неповрежденная ножом поверхность осталась белой, а порезы проявились ярко. И при этом появилось такого же цвета незначительное, но вполне явное окрашивание у донца зубка, где порезы не наносились. Логично утверждать, что окрашивание у донца образовалось в месте естественного разрушения. На фиг. 2б показана картина, которая иногда наблюдается при консервировании. Окрашивание безусловно доказывает, что ткани этих зубков повреждены. В данном случае диффузное глубокое повреждение может быть вызвано не вредителями, а бактериями или вирусами. Грубого разрушения ткани при этой инфекции может не быть. Критерию изобретательского уровня отвечает то, что известная из эмпирического и научного опыта простая химическая реакция может быть применена для установления фитопатологической интактности чеснока. Оказалось, что образование пигмента протекает беспрепятственно в местах повреждения и выявляется достаточно четко, чего могло бы и не быть вследствие, например, жизнедеятельности патогена. Выявление скрытых повреждений составляет проблему при определении качества чеснока по ГОСТ 7977-87 и ГОСТ 30106-94. В этих документах выделена категория чеснока "с неясно выраженными признаками повреждения", что снижает точность анализа. В чесноке, предназначенном для посева, по ГОСТ 30106-94 вообще не допускается наличие живых клещей, при этом методом контроля остается просмотр луковиц, что не надежно. Таким образом, изобретение может быть использовано в практике как дополнительный прием, уточняющий анализ. В научных исследованиях по иммунитету метод может быть полезен при испытаниях луковиц чеснока на толерантность к фитопатогенам. В селекции можно использовать вариант с длительным нагреванием при 45oС - в этих условиях зародыш остается живым, и если зубок здоровый, его ткани можно использовать для клонирования. Метод осуществляют следующем образом. Пример 1 Из средней пробы чеснока, характеризующей партию /образец, отделяют отход. Из основной части пробы, условно считающейся чистой, отбирают несколько луковиц, очищают и погружают их в раствор хлористого натрия 2%, добавляют уксусную кислоту в количестве, достаточном для поддержания рН 4,0; помещают емкость на водяную баню и поддерживают температуру в смеси 80oС в течение 30 мин. Затем нагревание прекращают, извлекают из жидкости зубки и просматривают их на предмет появления зелено-голубого окрашивания, особенно в области корневых бугорков. Зубки с окрашиванием, даже самым незначительным, считаются поврежденными. Пример 2 Луковицы чеснока очищают, зубки погружают в раствор хлористого натрия 2%, добавляют уксусную кислоту в количестве, достаточном для поддержания рН 4,3, и прогревают в термостате при температуре 45oС в течение 8 часов. В таком режиме лучше выявляются глубокие внутренние повреждения без признаков поверхностного разрушения. Пример 3 Обработку чеснока проводят согласно примерам 1, 2, за исключением того, что перед обработкой его не очищают. В этом случае исключается вероятность травмирования чеснока при очистке. Окрашивание происходит с той же степенью и скоростью.ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯМетод обнаружения скрытых повреждений луковиц чеснока, предусматривающий взятие пробы чеснока и определение его повреждений, отличающийся тем, что пробу нагревают при 45-95oС в течение 0,5-8,0 ч в растворе хлористого натрия с концентрацией 2-5% и кислоты, преимущественно уксусной, при рН 3,8-4,3, а повреждения устанавливают по окрашиванию ткани чеснока в зелено-голубой цвет.Популярные патенты: 2177226 Способ защиты растений от болезней, регулирования их роста и защитно-стимулирующий комплекс для его осуществления ... например гидрогумата, оксигумата, оксидата торфа и т.д., позволяет изменять течение обмена веществ в растительных клетках, повышать урожайность зерна, картофеля, овощей и других сельскохозяйственных культур, повышать засухоустойчивость и морозоустойчивость растений в период вегетации последних. Применение в составе нового препарата "Полиазофоса-К" микроэлемента цинка изменяет проницаемость клеточных мембран, применение кобальта - проницаемость плазмолеммы, применение молибдена - улучшает поглощение растениями фосфора, применение марганца - влияет на передвижение фосфора из стареющих листьев к молодым, применение меди и бора улучшает поступление в растения азота и т.д. ... 2250583 Агрегат дернинный комбинированный ... сельскохозяйственный агрегат (А.с. СССР № 1568913, МКИ 5 A 01 B 69/00), содержащий трактор и соединенное с ним сзади сельскохозяйственное орудие. На продольной оси агрегата установлены направители. Спереди трактора установлен почвенный нож, выполненный в виде диска. Направляющий элемент, выполненный в виде щелереза, установлен за трактором на сельскохозяйственном орудии. При движении агрегата по предварительно нарезанным щелям диск и направляющий элемент движутся по щели, обеспечивая фиксированное положение агрегата относительно рядков растений, но при этом не учитываются колебания каждого из рабочих органов, что приводит к превышению агротехнических допусков на защитную полосу ... 2033002 Орудие для междурядной обработки почвы ... счет системы отверстий 29. Хвостовик 12 рамы 3 подвешен цепной подвеской 30 к общей раме 1 посредством подвески 31. В торец участка трубы 12 входит горизонтальный патрубок 32 стойки 33 окучника 34 и закрепляется фиксатором 35. Окучник 34 выполнен в виде половины усеченного полого полуконуса 36, причем нижние основание 37 этого полуконуса 36 расположено под острым углом "а" к горизонту его тыльной поверхности 38 и снабжено ножом 39, режущая кромка 40 которого выступает по всему периметру нижнего основания окучника, а в задней части окучника 34 установлена опорная лыжа 41. Рыхлительные стойки 18 расположены поперечными рядами 42 и 43 со смещением последующего ряда в поперечном ... 2236124 Способ создания местообитания и адаптации молоди объектов аквакультуры в водных экосистемах ... Биол. ресурсы Белого моря и внутренних водоемов европейского Севера. Петрозаводск, 1981, с.147-150.3. Авторское свидетельство СССР SU №1261598, кл. А 01 К 61/00, 07.10.86.4. Патент РФ RU №2077195, кл. А 01 К 61/00, Е 02 В 8/08, 20.04.97.5. Патент РФ RU №2174749 кл. А 01 К 61/00, 20.10.2001.6. Aquatic habitat technology innovation in Japan: /Pap./ 5-th Int. conf. Aquat. Habitat Enhanc. Long Beach, Calif., 3-7 nov., 1991/Grove Robert S., Nakamura Makoto, Kakimoto Hiroshi, Sonu Choule J.// Bull. Mar. Sci - 1994 - 55, N 2-3 - р.276-294. Формула изобретения Способ создания местообитания и адаптации молоди объектов аквакультуры в водных экосистемах, включающий конструирование среды на ... 2080765 Комбайн для уборки овощей ... 5 и 6 цилиндрической щеткой 7. Пальчиковая горка 6 имеет механизм 8 натяжения верхней образующей полотна. Ротационный плодоотделитель представлен системой барабанов 9 с эксцентрично расположенными выдвижными пальцами. Комбайн также содержит транспортеры: переборочный 10, плодов 11, выгрузной 12, вентилятор 13, гаситель плодов 14, ходовую часть 15. Привод рабочих органов гидравлический и осуществляется через раздаточную коробку 16. Рабочая жидкость находится в масляном баке 17. Все транспортеры комбайна выполнены прутковыми и покрыты мягким материалом, как и корпусы всех барабанов, которые имеют регулировки по высоте относительно друг друга, фазы максимального вылета пальцев и ... |
Еще из этого раздела: 2048767 Способ отбора самок норок для воспроизводства 2487516 Почвообрабатывающая машина 2413409 Способ и устройство для уплотнения убранной массы для получения силоса 2175177 Агромост с оснасткой для прокладки и уплотнения постоянных грунтовых колей 2119738 Орудие для уборки грубых кормов 2127038 Лесозаготовительная машина 2262844 Способ повышения эффективности воспроизводства икры и численности осетрообразных рыб 2384988 Способ и устройство для управления сельскохозяйственной машиной 2114528 Устройство для клеточного содержания мелких животных 2277321 Колосоподъемник для косилочных систем уборочных машин |