Способ получения растений - регенерантов малины in vitroПатент на изобретение №: 2080059 Автор: Высоцкий В.А., Соломонова Ф.Н. Патентообладатель: Всероссийский селекционно-технологический институт садоводства и питомниководства Дата публикации: 27 Мая, 1997 Адрес для переписки: подача заявки17.02.1994 публикация патента27.05.1997 Изображения Использование: сельское хозяйство и биотехнология. Сущность изобретения: получение растений-регенерантов малины in vitro осуществляют путем культивирования листовых эксплантов на питательной среде, причем в качестве эксплантов используют листовые пластинки пробирочных растений размером более 4 мм в возрасте 3-5 мес, на адаксиальной поверхности которых наносят надрезы перед помещением их на питательную среду, после чего осуществляют культивирование при интенсивности света 80-150 лк в течение 5-8 дн, затем освещенность повышают в 20 раз и культивируют до получения побегов необходимой для укоренения длины. 4 табл. ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУИзобретение относится к биотехнологии в частности к культуре тканей и органов, и может быть использовано в питомниководстве для микроклонального размножения новых перспективных сортов, а также в генной инженерии для генетической трансформации растений малины посредством бактериальных векторов. В культуре тканей и органов все шире используются в качестве эксплантатов листья полевых, тепличных или культуральных растений. Разработана эффективная методика культивирования кусочков листьев тепличных растений земляники [1] при котором 94% листовых эксплантатов образуют придаточные побеги. Недостатком этого метода является трудоемкость процесса стерилизации листьев. Поэтому более предпочтительным считается использование в качестве эксплантатов листьев пробирочных растений, при котором отпадает необходимость стерилизации исходного эксплантата. Наиболее близким техническим решением из известных является способ размножения малины методом культивирования изолированных листьев культуральных побегов [2] предлагающий инкубировать кусочки листьев диаметром 6 мм, т.е. листовые диски, на агаризованной питательной среде Мурасиге и Скуга /1962/ при фотопериоде 16/8 ч и постоянном освещении. В среду добавляются регуляторы роста БАП (2,0 мг/л) и ИМК (0,1 мг/л), сахароза (30 г/л). Рекомендуется брать в качестве эксплантатов листья только 4-6 недельных побегов. Однако этот способ имеет следующие недостатки. Процесс вырезания дисков из листьев пробирочных растений является трудоемкой операцией, занимает много времени и требует большого объема исходного материала, так как листьев, из которых можно вырезать диски необходимого размера, имеется достаточно ограниченное количество. Вместе с тем длительное пребывание листьев в боксе в сильном потоке воздуха вызывает ухудшение качества эксплантов вследствие потери воды тканями листа. Ограничение возраста доноров эксплантов снижает эффективность методики из-за увеличения объемов работ на предыдущем этапе (микроклональное размножение), в то же время у малины возраст культуральных побегов не оказывает влияния на количество регенерирующих побеги изолированных листьев. К тому же наблюдается сложность в использовании листьев и молодых пробирочных растений, так как часто такие листья имеют очень нежные ткани и быстро повреждаются в боксе под током воздуха. Намного удобнее манипулировать более зрелыми листьями, которые хорошо переносят пересадку и вместе с тем обладают высокой регенерационной способностью. Задачей изобретения является повышение эффективности процесса регенерации побегов из листьев малины путем уменьшения лимитирующих факторов при отборе эксплантов и исключения наиболее трудоемких этапов их подготовки. Поставленная задача достигается тем, что в известном способе получения растений-регенерантов малины, включающем культивирование листовых эксплантов на искусственной питательной среде, содержащей регуляторы роста, в качестве эксплантов используют листовые пластинки пробирочных растений размеров более 4 мм в возрасте 3-5 мес, на адаксиальной поверхности которых наносят надрезы перед помещением их на питательную среду, после чего осуществляется культивирование при интенсивности света 80-150 люкс в течение 5-8 дн, затем освещенность повышают в 20 раз и продолжают культивирование до получения побегов необходимой для укоренения длины. Вследствие меньшей чувствительности тканей зрелых листьев к сухости воздуха по сравнению с 4-6 недельными листьями, значительно облегчается проведение срезания листовой пластинки, поранение ее адаксиальной поверхности и высадка готового экспланта на питательную среду. Кроме того, отпадает необходимость в субкультивировании побегов в системах микроразмножения каждые 4-6 нед, что приводит к значительной экономии рабочего времени и ингредиентов культуральных сред. В качестве эксплантов используются целые листовые пластинки размером более 4 мм, вместо дисков диаметром 6 мм. Необходимость в наличии поврежденных тканей компенсируются легкими надрезами пластинки листа скальпелем. Так как место поранения не имеет принципиального значения, процесс подготовки эксплантов занимает меньше времени. Это приводит к уменьшению потери воды листьями и получению эксплантов высокого качества. Кроме того, увеличивается количество листьев на побеге, которые можно использовать в качестве эксплантов, соответственно, уменьшается объем исходного материала и сокращаются затраты на его производство. Предлагаемое техническое решение отличается от прототипа тем, что в качестве эксплантов используются листовые пластинки пробирочных растений в возрасте 3-5 мес, на адаксиальной поверхности которых перед высадкой на питательную среду наносят надрезы, а процесс культивирования осуществляется в течение первых 5-8 дн. при освещении 80-150 люкс, а затем освещенность увеличивают в 20 раз и продолжают культивирование до получения побегов необходимой для укоренения длины. Способ осуществляется следующим образом. Листовые пластинки малины размером более 4 мм 2-4-месячных пробирочных растений срезают с побегов. На адаксиальной поверхности делают несколько надрезов скальпелем. Подготовленные таким образом экспланты высаживают на питательную агаризованную среду. Питательную среду обогащают витаминами B5, сахарозой (30 г/л), регуляторами роста БАП (2,0 мл/г), и ИМК (2,0 мг/л), агаром (8 г/л), мионозитом (100 мг/л). рН среды перед автоклавированием доводят до 5,8-5,9. В течение первой недели экспланты инкубируют в условиях пониженного освещения (80-150 люкс), для чего свет пропускают через картон. Уменьшение интенсивности света увеличивает существенно частоту регенерации. Через неделю картон снимают и интенсивность света повышают в 20 раз. Хорошее освещение в дальнейшем способствует быстрому росту регенератов. Инкубирование осуществляют до получения побегов необходимой для укоренения длины. Использование предлагаемого способа регенерации побегов на листовых эксплантах малины обеспечивает по сравнению с существующими методами следующие преимущества: повышается до 100% количество листовых эксплантов, регенерирующих побеги; упрощается процесс подготовки эксплантов; уменьшается объем работ в системах микроклонального размножения малины для получения необходимого количества доноров эксплантов; достигается экономия питательных сред и физиологически активных веществ.ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯСпособ получения растений-регенерантов малины in vitro, включающий культивирование листовых эксплантов на искусственной питательной среде, содержащей регуляторы роста, отличающийся тем, что в качестве эксплантов используют листовые пластинки пробирочных растений размером более 4 мм в возрасте 3 5 месяцев, на адаксиальной поверхности которых наносят надрезы перед помещением их на питательную среду, после чего осуществляют культивирование при интенсивности света 80 150 лк в течение 5 8 дней, затем культивирование ведут при освещенности, в 20 раз большей первоначальной, до получения побегов необходимой для укоренения длины.Популярные патенты: 2216908 Комбайн для уборки урожая с кустарников ... облепихи производить полную или частичную раскорчевку плантации, убрать урожай и разделить его на фракции без применения ручного труда. Это дает значительную экономию трудо- и энергозатрат и приводит к снижению себестоимости готовой продукции. Формула изобретения 1. Комбайн для уборки урожая с кустарников преимущественно облепихи, содержащий раму, на которой размещены активационная камера с симметрично расположенными относительно ее продольной оси барабанными встряхивателями, выносной транспортер для улавливания плодов, вентилятор, механизм привода и плодосборники, отличающийся тем, что комбайн дополнительно снабжен механизмом для срезания кустов и механизмом для подачи их ... 2454066 Светодиодный фитооблучатель ... может обжечь растения или повысить температуру теплицы до недопустимого уровня;5) МГЛ лампа взрывоопасна и может разлететься на осколки при случайном попадании на нее брызг, возникающих в процессе полива растений; 6) для включения лампы требуется специальная пускорегулирующая аппаратура (ПРА), состоящая из зажигающего устройства и балластного сопротивления, в которых теряется часть электроэнергии; 7) срок службы лампы не превышает 5000 тыс. часов, что увеличивает эксплуатационные расходы на освещение.Известно также устройство искусственного освещения растений в зависимости от интенсивности и спектрального состава внешней освещенности в соответствии с заданным режимом облучения ... 2076603 Способ повышения урожайности сельскохозяйственных культур ... течение 3 4 суток при температуре 20 - 25oС. По истечении этого времени проростки заливают 2 2,5 объемами дистиллированной воды или 70%-ного спирта, тщательно промывают и процеживают через плотный материал. Полученный раствор биопрепарата разливают в кюветы и замораживают при температуре -20oС. Затем кюветы устанавливают в камеру лиофильной сушилки и замороженный биопрепарат высушивают в вакууме. Высушенный препарат представляет собой порошок светло-серого или темно-серого цвета. Пример 1. Оценку фунгицидной активности препарата проводили на чистых культурах фитопатогенных грибов согласно методическим рекомендациям по определению фунгицидной активности новых соединений (5). Для ... 2234219 Композиция для отпугивания паразитов ... кожу, шерсть или оперение животного, на место или материал, от которого требуется отпугнуть насекомое. Предложенная композиция обладает сильным и продолжительным репеллентным действием. 5 с. И 8 з.п. ф-лы, 1 табл. Настоящее изобретение прежде всего относится к нетерапевтическому способу отпугивания паразитов, основанному на применении в основном известных соединений формулы (I), представленных ниже. Кроме того, оно относится к отпугивающим паразитов композициям, которые содержат эти соединения в качестве действующего вещества, к соединениям формулы (I), предназначенным для приготовления отпугивающих паразитов композиций, и к применению соединений формулы (I) для защиты от ... 2423807 Культиватор (варианты) и фреза для него ... культиватора.На фиг.1 представлен культиватор на виде сбоку. Культиватор имеет раму 1, с которой соединены ручки 2. Ручки 2 служат для удержания культиватора в рабочем положении и управления им, т.е. направления его. Ручки 2 могут быть выполнены с возможностью регулирования по длине, например, за счет их телескопического выполнения. Также ручки могут быть выполнены с возможностью поворота в вертикальной плоскости и фиксации в удобном для оператора положении. Для этого могут быть предусмотрены необходимые фиксирующие средства. Кроме того, для удобства оператора может быть предусмотрена установка ручек с возможностью поворота в горизонтальной плоскости, как это можно видеть на ... |
Еще из этого раздела: 2236124 Способ создания местообитания и адаптации молоди объектов аквакультуры в водных экосистемах 2312500 Способ защиты смородины от вредителей и болезней 2048767 Способ отбора самок норок для воспроизводства 2162635 Устройство для аэрозольного распыления (варианты) 2429594 Палец штампосварной для режущего аппарата (варианты) и способ его изготовления 2167648 Средство для защиты от укусов кровососущих насекомых (варианты) и способ его получения 2015633 Способ переработки отходов животноводческих комплексов и устройство для его осуществления 2066320 Производные тиазола, способ их получения и способ борьбы с грибками 2051971 Способ определения биологической активности -эндотоксинов различных патотипов bacileus thuringiensis 2060651 Бытовой инкубатор |
Изобретения в сельском хозяйстве
Обработка почвы в сельском и лесном хозяйствах
Посадка, посев, удобрение
Уборка урожая, жатва
Обработка и хранение продуктов полеводства и садоводства
Садоводство, разведение овощей, цветов, риса, фруктов, винограда, лесное хозяйство
Новые виды растений или способы их выращивания
Производство молочных продуктов
Животноводство, разведение и содержание птицы, рыбы, насекомых, рыбоводство, рыболовство
Поимка, отлов или отпугивание животных
Консервирование туш животных, или растений или их частей
Биоцидная, репеллентная, аттрактантная или регулирующая рост растений активность химических соединений или препаратов
Хлебопекарные печи, машины и прочее оборудование для хлебопечения
Машины или оборудование для приготовления или обработки теста
Обработка муки или теста для выпечки, способы выпечки, мучные изделия
|
|
||