Способ укоренения побегов плодовых культур, полученных in vitroПатент на изобретение №: 2060646 Автор: Туровская Н.И., Пронина И.Н., Матушкина О.В. Патентообладатель: Туровская Нина Ивановна, Пронина Ирина Николаевна, Матушкина Ольга Васильевна Дата публикации: 27 Мая, 1996 Адрес для переписки: подача заявки25.05.1994 публикация патента27.05.1996 Изображения Использование: в сельском хозяйстве и биотехнологии, в частности, для микроклонального размножения плодовых культур. Сущность изобретения: укоренение осуществляют путем предварительного замачивания микрочеренков в водном растворе ИМК в течение нескольких дней и последующего укоренения в агаризованной питательной среде. При этом весь процесс осуществляют в одном культивационном сосуде, в который помещают агаризованную питательную среду, а на ее поверхность наносят раствор стимулятора ризогенеза слоем 5-7 мм, в который погружают черенок, после выдерживания раствор сливают и основание черенка погружают в питательную среду на глубину 3-5 мм. 1 з. п. ф-лы, 2 табл. ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУИзобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в процессе массклонального размножения различных культур на этапе ризогенеза. Известно, что для укоренения побегов, полученных в культуре ткани, применяют питательные среды, содержащие ауксины, или проводят обработку базального конца побегов гормонами с последующей посадкой на среду без них. Наиболее распространенным и простым является способ введения индуктора корнеобразования непосредственно в среду в концентрациях 0,5-2,0 мг/л, однако длительное его воздействие может вызвать нежелательные последствия, т.е. стимулировать образование каллуса и ингибировать рост корней. В связи с этим прибегают к кратковременной обработке оснований микрочеренков ауксинами и посадке их на среду без гормонов. При этом способе укоренение производят в два этапа: вначале микрочеренки замачивают в водном растворе стимулятора ризогенеза в специальных бюксах, затем их переносят на среду без гормонов. При замачивании часто нарушается стерильность, технологически процесс сложен, более трудоемок, укореняемость часто бывает нестабильна из-за трудности погружения черенков в раствор со стимулятором на одинаковую глубину. Цель изобретения упрощение технологического приема замачивания, ускорение процесса ризогенеза, улучшение качества корневой системы микрочеренков. Сущность изобретения состоит в том, что замачивание микрочеренков для индукции ризогенеза проводят в течение нескольких дней в водном растворе стимулятора, размещенном над агаризованной средой в сосудах для укоренения. П р и м е р 1. Для укоренения берутся побеги, полученные при микроклональном размножении клоновых подвоев яблони и груши и достигшие высоты 1,5-3,0 см. Ризогенез проводят на среде Мурасиге-Скуга (1962) следующего состава, мг/л: Аммоний азотнокислый 825 Калий азотнокислый 850 Кальций хлористый двухвод- ный 220 Магний сернокислый семивод- ный 185 Калий фосфорнокислый одно- замещенный 85 Натрий ЭДТА 37,3 Железо сернокислое закис- ное семиводное 27,8 Борная кислота 3,1 Кобальт хлористый шестивод- ный 0,0125 Медь сернокислая пятиводная 0,0125 Марганец сернокислый четырехводный 11,15 Калий йодистый 0,415 Цинк сернокислый семи- водный 4,3 Натрий молибденовокис- лый двухводный 0,125 Тиамин 0,5 Пиридоксин 0,5 Никотиновая кислота 0,5 Аскорбиновая кислота 1,5 Мезоинозит 100 Сахароза 30000 Агар 8000 Вода дистиллированная До 1 л В качестве индуктора корнеобразования используют стерильный водный раствор ИМК в концентрации 3,0 мг/л, который разливают в стерильных условиях по 1 мл (слой 5-7 мм) в пробирки диаметром 18-20 мм над застывшей после автоклавирования агаризованной средой без гормонов. Таким образом, микрочеренки замачивают непосредственно в пробирке для укоренения. Через 5 дней раствор ИМК сливают, а базальную часть побега, находившуюся в ИМК, погружают в агаризованную среду без гормонов на 3-5 мм. Контрольные побеги высаживают на агаризованную питательную среду того же минерального состава с ИМК 0,5 мг/л. Дальнейшее культивирование проводят в культуральной комнате при температуре 24 2оС, освещенности 3-5 тыс.люксов, длине светового периода 18 ч. Опыты выполняют в 3-кратной повторности. Результаты приведены в табл.1. Как видно из табл.1, замачивание микрочеренков в ИМК над средой очень сильно ускоряет и повышает укореняемость побегов у подвоя яблони ММ 106. Через 2 нед. культивирования укореняемость уже превышала на 37,5% контрольный вариант, а через 6 нед. на 40,0% У данного подвоя отмечено также увеличение количества корней в 2 раза. Существенных различий по укореняемости и качеству корневой системы у подвоя груши N 12 не наблюдалось. Преимущество замачивания микрочеренков над средой наглядно показывает индикатор укореняемости, который является совокупным показателем ризогенеза и качества корневой системы. П р и м е р 2. Тот же опыт был проведен на подвое яблони 54-118 и сорте груши Бессемянка. У обоих подвоев существенных различий по укореняемости микрочеренков нет (Fфакт < Fтабл.). Однако у подвоя 54-118 замачивание над средой привело к увеличению количества корней в 2,7 раза и их длины в 3,0 раза. У сорта груши Бессемянка, хотя корней на один побег образовалось меньше, но они были гораздо длиннее (в 3,7 раза). В результате снижения количества корней индикатор укореняемости у данного сорта ниже, чем в контроле. Результаты приведены в табл.2. В обоих примерах введение ИМК в среду (контрольный вариант) приводило к сильному каллусообразованию, который ингибировал рост корней (см. табл.2). В дальнейшем каллус отрицательно влиял на адаптацию пробирочных растений к условиям in vivo. При замачивании микрочеренков над средой каллус не образовывался. Таким образом, замачивание микрочеренков в растворе ИМК над агаризованной средой ускоряет их укореняемость, улучшает качество корневой системы, исключает образование каллуса, который препятствует ризогенесу и снижает адаптационные свойства растений-регенерантов.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Способ укоренения побегов плодовых культур, полученных in vitro, включающий замачивание микрочеренков в водном растворе ИМК в течение нескольких дней, пересадку их для укоренения на агаризованную разбавленную вдвое по минеральному составу среду Мурасиге-Скуга без гормонов, отличающийся тем, что замачивание и укоренение микропобегов проводят в одном сосуде, при этом замачивание побегов осуществляют путем погружения в водный раствор стимулятора ризогенеза, нанесенный на поверхность агаризованной питательной среды, а укоренение проводят в агаризованной питательной среде после удаления раствора стимулятора и погружения основания черенка в среду на 3 5 мм. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что водный раствор стимулятора ризогенеза наносят на поверхность агаризованной среды слоем 5 7 мм.Популярные патенты: 2474105 Плодосъемник шолина ... находятся в пределах досягаемости рук пользователя, горлышко бутылки закрывают стандартной пробкой, если же кисти ягод находятся на большем расстоянии, то плодосъемник с помощью отверстия 14 в горлышке 2 бутылки 1 укрепляют на шесте 3.Двухсторонний захват 4 плодосъемника подводят к выбранной кисти ягод и через приемное окно 7 вводят кисть в бункер 1, при этом черешок кисти одновременно через захват 4 вводится в выемку-прорезь 5 до соприкосновения черешка кисти с режущей кромкой 131 лезвия бритвы 12.Затем плодосъемник перемещают в сторону ягод кисти, при этом режущая кромка 131 лезвия бритвы 12 внедряется в черешок кисти и осуществляет его косое перерезание. После заполнения емкости ... 2426302 Всепогодная теплица ... 11а-11с. С целью улучшения различных свойств теплицы 1, таких как пожаростойкость, огнестойкость, устойчивость к атмосферному воздействию, водостойкость, прочность и звукоизоляция, на наружную поверхность каждой из секционных частей 11а-11с наносят материал 45 покрытия, такой как смолобетон, включающий бетон и смешанный с ним полимер. Следует отметить, что для улучшения схватываемости смолобетона предпочтительно, чтобы теплица имела шероховатую поверхность, и поэтому поверхности секционных частей 11а-11с придают неровную форму. На фиг.6(а) показан вид в перспективе, иллюстрирующий стадию, на которой секционные периферийные стенки 11 соединяют в переднезаднем направлении, на ... 2228024 Способ профилактики мастита у коров и устройство для его осуществления ... Вт/см2 и с частотой до 800 кГц.2. Устройство для осуществления способа по п.1, содержащее чашевидный корпус с излучателем низкочастотных ультразвуковых колебаний стержневого типа, состоящего из сопла с каналом для подачи сжатого воздуха и резонатора, установленных соосно друг другу и расположенных в центре чашеобразного корпуса с возможностью регулирования расстояния между ними, и крепежную оснастку, выполненную в виде стойки с изменяющейся высотой, на верхней части которой установлен чашевидный корпус, отличающееся тем, что резонатор в нижней части с внешней стороны снабжен кольцевой полостью с входным патрубком и кольцевой щелью на ее дне. MM4A Досрочное прекращение действия ... 2192721 Орудие для обработки засоленных почв ... орудия. Выпадение достаточного количества естественных осадков в виде дождя приводит к растворению подвижных форм солей, и под действием гравитационных сил они устремляются на уплотненное ложе, выполненное лезвием 6 горизонтального ножа 5. Рассол с уплотненного ложа стекает по стенкам левой и правой щелей в очаговые резервуары, нарезанные лапами 1 и 2. Таким образом, описанный щелеобразователь, расположенный на продольных брусьях рамы заявленного орудия, образует эквидистантно удаленные очаговые резервуары на глубине 0,5-0,6 м для дренажного стока. Обработанные полосы почвы образуют почвенный горизонт, способствующий выходу соляных отложений через вертикальные щели в дренажный ... 2389173 Способ выращивания земляники садовой ... ВСТИСП, 2005 - 172 с).С целью повышения урожайности обработку растений земляники садовой, выращиваемой в условиях открытого грунта промышленной плантации, проводили в фазы начала роста и цветения растений согласно схемы на фиг.1, при непрерывном механическом передвижении трактора 3 с навесным устройством 4 (с установленными на нем индуктором 1 заданной длины L и генератором 2 импульсов тока) вдоль ряда насаждения 6 (фиг.1) со скоростью, обеспечивающей получение заданного числа "N" бегущей последовательности импульсов магнитной индукции, следующих с частотой "F" (Гц) и амплитудой в диапазоне 0,5-3,0 мТл.При заданной длине "L" (м) плоского индуктора 1 ... |
Еще из этого раздела: 2423807 Культиватор (варианты) и фреза для него 2182420 Устройство для перерезания стволов деревьев 2106081 Животноводческая ферма с применением помещений круглой формы и способ содержания в ней, например, крупного рогатого скота 2141196 Способ получения растений с комплексной устойчивостью к фитостеринзависимым вредителям 2166252 Способ удаления костного мозга из губчатых костных трансплантатов 2102853 Питательное устройство для растений 2262826 Способ сташевского и.и. переработки навоза личинками синантропных мух и устройство для его осуществления 2217912 Способ проведения контрольного лова молоди пелагических рыб, в частности лососевых, и обкидной невод 2189736 Способ отбора гибридов кукурузы, устойчивых к засухе и стеблевым гнилям 2420060 Способ генетической трансформации растений селекционно-ценных образцов клевера лугового |
Изобретения в сельском хозяйстве
Обработка почвы в сельском и лесном хозяйствах
Посадка, посев, удобрение
Уборка урожая, жатва
Обработка и хранение продуктов полеводства и садоводства
Садоводство, разведение овощей, цветов, риса, фруктов, винограда, лесное хозяйство
Новые виды растений или способы их выращивания
Производство молочных продуктов
Животноводство, разведение и содержание птицы, рыбы, насекомых, рыбоводство, рыболовство
Поимка, отлов или отпугивание животных
Консервирование туш животных, или растений или их частей
Биоцидная, репеллентная, аттрактантная или регулирующая рост растений активность химических соединений или препаратов
Хлебопекарные печи, машины и прочее оборудование для хлебопечения
Машины или оборудование для приготовления или обработки теста
Обработка муки или теста для выпечки, способы выпечки, мучные изделия
|
|
||