Изобретения в сфере сельского хозяйства, животноводства, рыболовства

 
Изобретения в сельском хозяйстве Обработка почвы в сельском и лесном хозяйствах Посадка, посев, удобрение Уборка урожая, жатва Обработка и хранение продуктов полеводства и садоводства Садоводство, разведение овощей, цветов, риса, фруктов, винограда, лесное хозяйство Новые виды растений или способы их выращивания Производство молочных продуктов Животноводство, разведение и содержание птицы, рыбы, насекомых, рыбоводство, рыболовство Поимка, отлов или отпугивание животных Консервирование туш животных, или растений или их частей Биоцидная, репеллентная, аттрактантная или регулирующая рост растений активность химических соединений или препаратов Хлебопекарные печи, машины и прочее оборудование для хлебопечения Машины или оборудование для приготовления или обработки теста Обработка муки или теста для выпечки, способы выпечки, мучные изделия

Способ повышения выживаемости половых клеток осетровых рыб при криоконсервации

 
Международная патентная классификация:       A01K A01N

Патент на изобретение №:      2399201

Автор:      Пономарева Елена Николаевна (RU), Тихомиров Андрей Михайлович (RU), Богатырева Мария Михайловна (RU), Болонина Наталья Владимировна (RU), Джаригазов Ерболат Сисенгалиевич (RU)

Патентообладатель:      Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Астраханский государственный технический университет (ФГОУ ВПО АГТУ) (RU), Южный научный центр Российской академии наук (ЮНЦ РАН) (RU)

Дата публикации:      20 Сентября, 2010

Начало действия патента:      20 Апреля, 2009

Адрес для переписки:      414025, г.Астрахань, ул. Татищева, 16, ФГОУ ВПО АГТУ, патентный отдел

Изобретение относится к рыбной промышленности и может использоваться при искусственном воспроизводстве ценных видов рыб, в частности осетровых, а также для создания криобанков с образцами генетического материала. Способ повышения выживаемости половых клеток осетровых рыб при криоконсервации включает разбавление спермы протектором, эквилибрацию, замораживание ступенчатым режимом, оттаивание. Новым является то, что непосредственно перед эквилибрацией проводят стимулирование прямоугольным электрическим сигналом частотой 20 герц при амплитуде раздражителя 150 Мв в течение 1 минуты, а выведение протектора из клеток после дефростации с помощью раствора NaCl (6,5 г/л) в соотношении 1:1 проводят в течение 7 минут. Технический результат, достигаемый заявленным изобретением, состоит в повышении качества дефростированной спермы осетровых рыб. 1 табл.

Изобретение относится к рыбной промышленности и может использоваться при искусственном воспроизводстве ценных видов рыб, в частности осетровых, а также для создания криобанков с образцами генетического материала.

Известен способ замораживания спермы осетровых рыб на фторопластиковой пластине (см. ст. Савушкина С.И., Ерохина А.С. Опыт совершенствования способов криоконсервации спермы русского осетра и стерляди // Рыбное хозяйство. Серия «Аквакультура»: информ. пакет ВНИЭРХ. Проблемы сохранения геномов рыб. - М., 1999. Вып.I. - С.43-45).

Однако этот способ не обеспечивает высокой выживаемости половых клеток после дефростации, а также приемлем только для небольшого объема генетического материала, так как достаточно трудоемок.

Наиболее близким по технической сущности является способ криоконсервации половых клеток осетровых рыб, включающий: разбавление спермы протектором, эквилибрацию, замораживание ступенчатым режимом, оттаивание (см. Цветкова Л.И., Савушкина С.И., Титарева Л.Н. Методическое пособие по криоконсервации спермы карпа, лососевых и осетровых рыб. - М., 1997. - 10 с.)

Однако этот способ криоконсервации не учитывает негативного воздействия протекторов на клетки, что является основной причиной их гибели. Выживаемость сперматозоидов составляет всего 30-40%. Оплодотворяющая способность такой спермы недостаточно велика.

Техническая задача - создание способа повышения выживаемости половых клеток осетровых рыб при криоконсервации, позволяющего получать дефростированную сперму, обладающую лучшими рыбоводными качествами.

Технический результат - повышение качества дефростированной спермы осетровых рыб.

Он достигается тем, что в известном способе криоконсервации половых клеток осетровых рыб, включающем: разбавление спермы криопротектором, эквилибрацию, замораживание, оттаивание, перед эквилибрацией проводят стимулирование проникновения протектора внутрь клетки, а после оттаивания - выведение протектора из половых клеток.

Стимулирование спермы прямоугольным электрическим сигналом частотой 20 герц при амплитуде раздражителя 150 Мв в течение 1 минуты обеспечивает лучшее проникновение криопротектора внутрь клеток, при этом наблюдается высокий процент выживаемости дефростированной спермы.

После оттаивания при активации водой спермии начинают проявлять признаки жизни через 30-40 секунд. Это может быть связано с отрицательным действием протекторов. В качестве изотонического раствора, способного вывести протекторы из клеток, был избран физиологический раствор для осетровых рыб.

После дефростации сперму соединяли с раствором NaCl (6,5 г/л) в соотношении 1:1 и оставляли на 7 минут. За это время протектор вымывался из половых клеток, что способствовало их метаболизму.

Способ повышения выживаемости половых клеток осетровых рыб при криоконсервации осуществлялся следующим образом.

Пример 1. Работы по криоконсервации половых клеток осетровых рыб проводили в лаборатории «Аквакультура и биологические ресурсы» Южного научного центра РАН совместно сотрудниками кафедры «Аквакультура и водные биоресурсы» Астраханского Государственного Технического Университета. Биологический материал заготавливали на осетровых рыбоводных заводах Астраханской области (Сергиевский, Житнинский, Кизанский). Объектом исследований служила сперма севрюги.

Перед началом работы всю необходимую посуду, сперму, криозащитные среды охлаждали до температуры 10-15°С. К охлажденной сперме добавляли криозащитную среду. Соотношение спермы и криозащитной среды составляло 1:1. Затем проводили облучение прямоугольным электрическим сигналом частотой 20 герц при амплитуде раздражителя 150 Мв в течение 1 минуты.

После этого сперму разливали в предварительно пронумерованные полиэтиленовые контейнеры объемом 1,5 мл и осуществляли эквилибрацию при температуре 10-15°С в течение 40 минут.

Затем проводили глубокое замораживание образцов спермы в жидком азоте в автоматическом криозамораживателе в ступенчатом режиме (3°/мин в течение 4 минут, затем 10°) в течение 10 минут, после чего погружали сперму в жидкий азот.

Размораживание образцов биологического материала проводили на водяной бане при температуре 38-40°С в течение 40 секунд.

После появления жидкой фракции сперму соединяли с раствором NaCl (6,5 г/л) в соотношении 1:1 и оставляли на 7 минут. За это время протектор вымывался из половых клеток, это способствовало их метаболизму.

После этого проводили оценку качества спермы, криоконсервированной известным способом и предлагаемым, по двум основным рыбоводным показателям - времени жизни и проценту подвижных сперматозоидов. По времени жизни сперматозоидов в предлагаемом варианте получено преимущество в 2,2 раза по сравнению с известным способом (345 с и 159 с, соответственно); выживаемость сперматозоидов составила 80% и 60%, соответственно (табл.1).

Таблица 1 Сравнительные показатели качества дефростированной спермы прототипа и полученной новым способом ПоказателиПрототип Новый способ Выживаемость сперматозоидов, %60 80Время жизни спермиев, с 159345

В результате использования новых операций в процессе криоконсервации спермы осетровых рыб: стимулирование электрическим сигналом и выведение протектора из клеток после разморозки, удалось получить более высокие рыбоводные качества дефростированных образцов, выживаемость сперматозоидов повышается на 20%, а время жизни на 186 с.

Формула изобретения

Способ повышения выживаемости половых клеток осетровых рыб при криоконсервации, включающий разбавление спермы протектором, эквилибрацию, замораживание ступенчатым режимом, оттаивание, отличающийся тем, что стимулирование прямоугольным электрическим сигналом частотой 20 Гц при амплитуде раздражителя 150 мВ в течение 1 мин проводят непосредственно перед эквилибрацией, а выведение протектора из клеток после дефростации с помощью раствора NaCl (6,5 г/л) в соотношении 1:1 проводят в течение 7 мин.





Популярные патенты:

2495556 Секционный отсекатель дозатора и сельскохозяйственный агрегат, содержащий его

... дозирования материала, приспособленное для регулирования и дозирования материала в средства выдачи материала на каждом из монтажных рычагов;средства для закрытия каждой из заслонок дозаторов так, чтобы перекрывать поток материала в выбранное средство выдачи материала в процессе работы данного агрегата, причем средство для закрытия полагается на входной сигнал спутниковой навигационной системы GPS или ГЛОНАСС, которая обеспечивает входной сигнал после обнаружения участков почвы, по которым ранее прошел данный сельскохозяйственный агрегат и внес материалы в почву; исредства для автоматического перевода в поднятое положение выбранного монтажного рычага, для которого поток ...


2456799 Ловушка для поимки животных, обитающих в земле

... 20 выполнены две первых прорези 21, четвертое отверстие 15 и два третьих отверстия 19. Первые прорези 21 выполнены перпендикулярно оси трубы 20. Первые прорези 21 расположены одинаково по отношению к оси трубы 20, т.е. первые прорези 21 расположены в одном секторе трубы 20, образованном двумя воображаемыми плоскостями, проходящими через соответствующие края первых прорезей и ось трубы 20. Первые прорези 21 расположены на одинаковых расстояниях от концов трубы 20. Ширина первых прорезей 21 выполнена больше, чем толщина задвижек 22, описанных далее. Четвертое отверстие 15 расположено между первыми прорезями 21 на воображаемой линии трубы 20, проходящей через центры первых прорезей ...


2059368 Способ борьбы с насекомыми-листогрызущими вредителями растений

... Энтомопатогенные вирусы безопасны для человека, сельскохозяйственных животных, других позвоночных. Однако для более широкого внедрения бакуловирусов в практику сельскохозяйственного производства существует ряд препятствий. Одной из главных причин является более высокая стоимость вирусных препаратов, а также наличие длительного латентного периода развития вирусной инфекции. Латентный период между началом инфекции и гибелью вредителя определяется продолжительностью процесса проникновения вируса в организм хозяина и последующего накопления вирусных частиц до прекращения жизнедеятельности насекомого. Обычно латентный период развития бакуловирусной инфекции 7-10 сут, за это время ...


2108013 Рабочий орган культиватора

... стойки снабжен нишей для установки упругого элемента. 4. Рабочий орган по пп.1 и 3, отличающийся тем, что ниша носка стойки выполнена в виде Л-образного выступа, выполненного парой параллельных прорезей и деформацией основного материала в направлении от нижней грани стойки. 5. Рабочий орган по пп.1 и 3, отличающийся тем, что фронтальная часть носка S-образной стойки снабжена режущей кромкой на лезвии. 6. Рабочий орган по пп. 1, 3 и 5, отличающийся тем, что лезвие носка образовано прокаткой нагретой торцевой части S-образной стойки. 7. Рабочий орган по п.1, отличающийся тем, что упругий элемент выполнен плоским, а его фронтальная часть снабжена режущей кромкой на одностороннем ...


2477599 Жатка зерноуборочного комбайна

... идеальных условиях жатка зерноуборочною комбайна по авторскому свидетельству СССР 1565385 А1 устраняет недостатки вышеупомянутой жатвенной части комбайнов «Дон-1500» и «Дон-1200», однако в зависимости от состояния хлебной массы, ее влажности, полеглости и засоренности, когда мотовило меняет свое положение, например выдвигается вперед, расстояние его от гребенок транспортера увеличивается и хлебная масса, поданная планками мотовила, не достигает гребенок транспортера и падает мимо или в лучшем случае на брус корпуса жатки, скапливаясь на днище жатки. При положении мотовила вблизи транспортера имеет место проникновения отдельных стеблей хлебной массы внутрь ...


Еще из этого раздела:

2413409 Способ и устройство для уплотнения убранной массы для получения силоса

2262844 Способ повышения эффективности воспроизводства икры и численности осетрообразных рыб

2440712 Автоматизированная система для хранения в поле, возможности оперативного контроля и выгрузки убранных продуктов урожая из уборочной машины

2126616 Устройство управления навесной системой трактора

2488422 Сеть фильтров

2067832 Способ борьбы с грибковыми инфекциями растений

2028763 Измельчитель древесной поросли

2400042 Высевающий аппарат

2115638 Способ переработки органических отходов животного происхождения в кормовой белок и биогумус

2054235 Лесопосадочная машина