Изобретения в сфере сельского хозяйства, животноводства, рыболовства

 
Изобретения в сельском хозяйстве Обработка почвы в сельском и лесном хозяйствах Посадка, посев, удобрение Уборка урожая, жатва Обработка и хранение продуктов полеводства и садоводства Садоводство, разведение овощей, цветов, риса, фруктов, винограда, лесное хозяйство Новые виды растений или способы их выращивания Производство молочных продуктов Животноводство, разведение и содержание птицы, рыбы, насекомых, рыбоводство, рыболовство Поимка, отлов или отпугивание животных Консервирование туш животных, или растений или их частей Биоцидная, репеллентная, аттрактантная или регулирующая рост растений активность химических соединений или препаратов Хлебопекарные печи, машины и прочее оборудование для хлебопечения Машины или оборудование для приготовления или обработки теста Обработка муки или теста для выпечки, способы выпечки, мучные изделия

Штамм бактерий bacillus thuringiensis ssp. kurstaki, обладающий инсектоакарицидной активностью против представителей отрядов lepidoptera, coleoptera, homoptera, thysanoptera и acariformes

 
Международная патентная классификация:       A01N C12N C12R

Патент на изобретение №:      2278159

Автор:      Тюрин Сергей Ананьевич (RU), Залунин Игорь Арсеньевич (RU), Мешков Юрий Иванович (RU), Яковлева Инна Николаевна (RU), Жужиков Дмитрий Павлович (RU), Хашимов Фарход Хакимович (UZ), Дебабов Владимир Георгиевич (RU)

Патентообладатель:      Тюрин Сергей Ананьевич (RU)

Дата публикации:      20 Июня, 2006

Начало действия патента:      7 Декабря, 2004

Адрес для переписки:      117405, Москва, Варшавское ш., 152, корп.8, кв.79, С.А. Тюрину

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к производству бактериальных препаратов. Штамм бактерий Bacillus thuringiensis ssp. kurstaki ВКПМ В-8715 характеризуется значительной инсектоакарицидной активностью против представителей отрядов Lepidoptera, Coleoptera, Homoptera, Thysanoptera и Acariformes, приносящих вред сельскохозяйственным культурам. Заявляемый штамм по токсичности против членистоногих, представителей отрядов Homoptera и Thysanoptera может успешно конкурировать с химическим препаратом карбофос на таких экономически значимых культурах, как хлопок, табак и розы. 6 табл.

Изобретение относится к микробиологической промышленности, микробиологии и биотехнологиии, а именно к производству бактериальных биопрепаратов, предназначенных для борьбы с вредителями сельскохозяйственных культур, являющихся представителями отрядов Lepidoptera, Coleoptera, Homoptera, Thysanoptera и Acariformes.

Эффективная борьба с вредителями играет важную роль в сохранении и увеличении урожая, поскольку потери сельскохозяйственной продукции, связанные с жизнедеятельностью насекомых-вредителей, составляют до 30% от ожидаемого урожая.

В настоящее время для борьбы с вредителями сельскохозяйственных культур широко применяют химические препараты. Длительное использование последних привело к формированию устойчивых к этим препаратам популяций вредителей [1]. Кроме того, химические препараты токсичны для теплокровных животных и полезных насекомых, а также способны проникать в растения, что ухудшает санитарно-гигиенические показатели сельскохозяйственной продукции. Наиболее широко применяемым из химических препаратов является карбофос.

Все возрастающую роль в защите растений от сельскохозяйственных вредителей играют биологические методы борьбы с использованием препаратов, полученных на основе вирусных, бактериальных и грибных патогенов или синтезируемых ими продуктов. Преимущество большинства известных микробиологических средств защиты растений по сравнению с химическими - их экологическая безопасность.

Наиболее широко в качестве микробиологических средств защиты растений используют продукты на основе различных штаммов энтомопатогенной бактерии Bacillus thuringiensis. Эти бактерии при споруляции синтезируют кристаллические белки, или, как их еще называют, дельта-эндотоксины, отличающиеся между собой по спектру энтомопатогенного действия [2]. Дельта-эндотоксины обладают избирательным токсичным действием только по отношению к насекомым.

Некоторые штаммы Bacillus thuringiensis продуцируют еще и термостабильный экзотоксин, который, в отличие от эндотоксина, не обладает избирательностью и проявляет токсичность в отношении очень широкого круга беспозвоночных и позвоночных животных, вызывая также аллергические реакции у лиц, работающих с этими препаратами [3].

Альтернативным направлением является использование продуцентов Bacillus thuringiensis, не синтезирующих термостабильный экзотоксин. На их основе созданы такие биопрепараты как DIPEL (США), лепидоцид (РФ), Novodor (США), Колорадо (РФ). Препараты DIPEL (США) и лепидоцид (РФ) эффективны против большого числа представителей отряда чешуекрылых (Lepidoptera), однако не обладают инсектицидной активностью против представителей отряда жесткокрылых (Coleoptera). В отличие от них препараты Novodor (США), Колорадо (РФ) эффективны только против представителей отряда жесткокрылых (Coleoptera).

Известны штаммы Bacillus thuringiensis, которые обладают инсектицидной активностью против представителей как отряда Coleoptera, так и отряда Lepidoptera [4, 5]. Однако они не токсичны для представителей отрядов Homoptera, Thysanoptera(инсектицидная активность) и Acariformes (акарицидная активность).

Представители этих отрядов (тли, трипсы, растительноядные клещи) имеют трансконтинентальное распространение и являются опасными вредителями многих экономически значимых культур: зерновых, зернобобовых, овощных, плодово-ягодных, а также наносят вред хлопчатнику, лесным, декоративным и лекарственным насаждениям.

Задача заявляемого изобретения - получить штамм бактерий Bacillus thuringiensis, обладающий как инсектицидной, так и акарицидной активностью.

Задача решена путем получения штамма бактерий Bacillus thuringiensis, обладающего инсектоакарицидной активностью против представителей отрядов Lepidoptera, Coleoptera, Homoptera, Thysanoptera и Acariformes.

Заявляемый штамм депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) как Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715.

Он получен в результате скрещивания методом Гонзалеса [6] двух родительских штаммов Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-1226 и Bac.thuringiensis ssp.tenebrionis ВКПМВ-5081.

Штамм ВКПМ В-8715 имеет следующие характеристики.

Культурально-морфологические признаки.

Грамположительные подвижные палочки размером 4,1-1,6 мкм. В стационарной фазе роста образуют кристаллы эндотоксинов и овальные споры.

Хорошо растет на гидролизатах казеина (панкреатический гидролизат казеина - 1, дрожжевой экстракт - 0,2, MnSO4,- 0,5, MgSO4 - 3, KH2 PO 4-0,1, глюкоза - 0,6, вода - остальное, рН среды - 7,4-7,5, состав среды в мас.%) при 27-29°С и рН 6,8-7,5. На агаризованной среде казеина (панкреатический гидролизат казеина - 1, дрожжевой экстракт - 0,5, хлористый натрий - 0,05, агар - 1,5, вода - остальное, рН среды - 7,4-7,5, состав среды в мас.%) на 10 сутки при 27-29°С образует однородные колонии 3-5 мм в диаметре, светло-серого цвета со слабо изрезанным краем. Структура мелкозернистая.

По Н-антигену относится к сероварианту III (3а3в).

При культивировании штамма как в жидких, так и на твердых питательных средах выхода фага не наблюдается.

Физиолого-биохимические признаки.

Отношение к источникам углерода: усваивает с образованием кислоты глюкозу, мальтозу, кукурузный и картофельный крахмал, соевую и кукурузную муку. Не усваивает лактозу, ксилозу, арабинозу, лецитин. Пептонизирует молоко, гидролизует крахмал, желатину не разжижает.

Отношение к источникам азота: восстанавливает нитраты, усваивает аммонийные формы азота.

Отношение к температуре: хорошо растет при 27-29°С, оптимальная температура 28°С.

Отношение к рН среды: хорошо растет при 6,8-7,5, оптимум рН-7,2.

Отношение к кислороду: аэроб.

Отношение к фагам: устойчив к основным производственным фагам П, 22, С/П, И-77, 25-16.

Бета-экзотоксин не синтезирует.

Не патогенен для человека, домашних и диких животных, полезных насекомых, птиц и рыб.

Не является генетически модифицированным штаммом.

Заявляемые свойства: синтезирует компоненты, обладающие инсектоакарицидной активностью против представителей отрядов Lepidoptera, Coleoptera, Homoptera, Thysanoptera и Acariformes.

Маркерные признаки: активность против представителей отрядов Lepidoptera, Coleoptera, Homoptera, Thysanoptera и Acariformes, отсутствие способности синтезировать бета-экзотоксин.

Хранение штамма: штамм хранят в ампулах после лиофилизации спорокристаллической смеси обычным способом.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

ПРИМЕР 1. Технологические характеристики заявляемого штамма.

Оценку заявляемого штамма на лабораторных питательных средах проводили по двум основным параметрам, а именно титру спор и концентрации основного инсектицидного белка (дельта-эндотоксина) в сравнении с родительскими штаммами.

Для этого штамм Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715, а также родительские штаммы (ВКПМ В-1226 и ВКПМ В-5081) выращивали в колбах емкостью 750 мл в объеме среды выращивания 200 мл до стадии полной споруляции на круговой качалке при 28°С и встряхивании 250 об/мин. Для выращивания использовали среды следующего состава (мас.%):

1. Среда №1:   панкреатический гидролизат казеина -1,  дрожжевой экстракт - 0,2,  MnSO4, - 0,5  MgSO 4 - 3,  KH2PO4 - 0,1  глюкоза - 0,6,  вода - остальное  рН среды - 7,4-7,5

2. Среда №2:   триптический гидролизат казеина -1,  дрожжевой экстракт - 0,2,  MnSO4, - 0,5  MgSO 4 - 3,  KH2PO4 - 0,1  глюкоза - 0,6,  вода - остальное3. Среда №3: рН среды - 7,4-7,5  пептон - 1,  дрожжевой экстракт - 0,2,  MnSO 4, - 0,5  MgSO4 - 3,  КН2РО 4 - 0,1  глюкоза - 0,6,  вода - остальное  рН среды - 7,4-7,5

Выращенную культуру отделяли центрифугированием и отмывали 1М NaCl в присутствии 0.001М ЭДТА. Кристаллические белки из спорокристаллической смеси растворяли в карбонатном буфере рН 11,0 в течение часа, не растворившийся осадок отделялся центрифугированием, рН надосадочной жидкости доводили до 10,0. Концентрацию белка определяли по методу Бредфорда [7], используя бычий сывороточный альбумин в качестве стандарта. Полноту растворения контролировали повторной экстракцией в том же буфере. При повторной экстракции растворялось не более 7% белка. Определение титра жизнеспособных спор проводили на чашках Петри с агаризованной средой следующего состава (мас.%)

панкреатический гидролизат казеина -1,дрожжевой экстракт - 0,5,хлористый натрий - 0,05агар- 1,5 вода - остальное рН среды - 7,4 - 7,5

Результаты исследований приведены в таблице 1:

Таблица 1. Питательные средыСреда №1: Среда №2: Среда №3:Штаммы ВКПМВКПМВКПМ ВКПМВКПМ ВКПМВКПМВКПМ ВКПМBacillus В-8715В-1226 В-5081В-8715В-1226 В-5081В-8715 В-1226В-5081 thuringiensis             Титр спор, ×108 на мл56 421 1,631 1Концентрация белка (мг/мл) 0,30,1 0,030,40,1 0,030,30,1 0,05

Как следует из таблицы 1, заявляемый штамм Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 на трех исследованных лабораторных питательных средах превосходит исходные родительские штаммы как по титру спор, так и по концентрации основного инсектицидного белка, дельта-эндотоксина.

Оценку заявляемого штамма на промышленной питательной среде проводили по параметру - микробиологическая продуктивность (титр спор).

Для подготовки посевного материала заявляемый и родительские штаммы выращивали в 2 мл среды №1 в течение 12 часов при 28°С, как было описано выше. Затем 1 мл микробной культуры засевают в колбы емкостью 750 мл с объемом среды выращивания 50 мл дрожже-полисахаридной среды (ДПС) следующего состава (мас.%): дрожжи кормовые - 36, кукурузная мука - 26,8, соевая мука - 5,0, мел - 3,0, вода - остальное, рН среды - 7,2-7,5 и культивировали на круговой качалке до стадии полной споруляции. Определение титра жизнеспособных спор проводили на чашках Петри с агаризованной средой как описано выше.

Таблица 2. Штаммы Вас. thuringiensisВКПМ ВКПМВКПМ  В-1226В-5081 В-8715Микробиологическая 4,34,04,6 продуктивность     (млрд. сп./мл)    

Из результатов, приведенных в таблице 2, следует, что продуктивность заявляемого штамма Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 на промышленной среде выше продуктивности исходных родительских штаммов и превосходит продуктивность штаммов-продуцентов промышленного препарата В«ЛепидоцидВ», составляющую 3,5-4 млрд спор /мл [8] и промышленного препарата В«КолорадоВ», составляющую 2-3 млрд спор /мл [9].

ПРИМЕР 2. Оценка инсектоакарицидной активности заявляемого штамма.

Определение токсичности заявляемого штамма Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 для представителей отрядов Lepidoptera, Coleoptera, Homoptera, Thysanoptera и Acariformes проводили в лабораторных условиях.

Заявляемый штамм ВКПМ В-8715 и контроль (родительские штаммы) выращивали до стадии полной споруляции как в примере 1 на среде 1.

Оценку инсектицидной активности для представителей отряда Lepidoptera проводили на двух объектах: гусеницах непарного шелкопряда Lymantria dispar 2 возраста и гусеницах мельничной огневки Galleria mellonella 7 возраста.

Гусениц непарного шелкопряда выращивали из хранящихся в холодильной камере при температуре +4°С яйцекладок на среде следующего состава (мас.%):

Семена фасоли набухшие 72Дрожжи пивные сухие 5,4Агар 5,4 Бумага фильтровальная мелко нарезанная 2Сахароза 4Калий фосфорно-кислый двузамещенный 1,4Аскорбиновая кислота 1,4 Масло льняное 0,7 Бензойная кислота + спирт 3,5 Формалин (40%) 1,8 КОН 1,4 Лист дуба сухой (измельченный) 1

При биотестировании 3 г среды смешивали с 1 мл испытуемой суспензии споро-кристаллической смеси (дважды отмыты физраствором), и хорошо растирали смесь в фарфоровой ступке с помощью пестика. Полученную смесь шпателем переносили на крышку чашки Петри и размещали в виде кольца диаметром около 3 см. Внутрь этого кольца сажали по десять гусениц. На дно чашки Петри помещали диск фильтровальной бумаги. Каждый образец суспензии испытывали в 3-х параллельных повторностях. Эксперимент проводили при комнатной температуре и естественном освещении. Число погибших насекомых подсчитывали на 6-й день.

Смертность в опыте с Bacillus thuringiensis ssp. tenebrionis ВКПМ В-5081 составила 10%, для заявляемого штамма Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 - 58%, а для Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-1226 - 100%. Из этого следует, что для непарного шелкопряда инсектицидная активность заявляемого штамма значительно превосходит активность одного из родительских штаммов Bacillus thuringiensis ssp. tenebrionis ВКПМ В-5081, но уступает активности другого родительского штамма Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-1226.

Оценку инсектицидной активности против мельничной огневки (Galleria mellonella) проводили методом подсадки личинок мельничной огневки в чашки Петри с кормом (мерва + пшеничные отруби).

Корм расфасовывали в чашки Петри (по 9 г в каждую), в которые вносили по 3 мл препарата.

В каждую чашку Петри (после подсыхания корма) подсаживали по 10 гусениц огневки 7 возраста (массой 75±5 мг) в трех повторностях. Чашки Петри с гусеницами содержали на лабораторных столах при температуре воздуха 25±20°С и относительной влажности воздуха 60-80%. Гибель гусениц подсчитывали на 6 сутки.

Смертность в опыте с родительским штаммом Bacillus thuringiensis ssp. tenebrionis ВКПМ В-5081 составила 3,3%, для заявляемого штамма Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 - 26,7%, а для другого родительского штамма Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-1226 - 63,3%. Инсектицидная активность для гусениц мельничной огневки у заявляемого штамма значительно превосходит активность штамма ВКПМ В-5081 и уступает ВКПМ В-1226.

Заявляемый штамм Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 обладает инсектицидной активностью для представителей отряда Lepidoptera, сопоставимой с таковой у известных штаммов Bacillus thuringiensis [8].

Оценку инсектицидной активности заявляемого штамма ВКПМ В-8 715 для представителей отряда Coleoptera проводили на личинках колорадского жука Leptinotarsa decemlineata и мучного хрущака Tenebrio molitor L.

Личинок колорадского жука младшего возраста (2 и начало 3 возраста) подсаживали в чашки Петри с листьями картофеля, обработанными путем погружения в растворы препаратов. В таблице 3 приведены результаты учета гибели личинок колорадского жука на 5-е сутки.

Таблица 3. ШтаммыСмертность Bacillus thuringiensis(%)  2-3 возраст ВКПМВ-508125,1 ВКПМ В-871592,5 ВКПМ В-122610

Заявляемый штамм Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 значительно превосходит по своей инсектицидной активности против личинок колорадского жука исходные родительские штаммы. Статистическая обработка результатов, проведенная с помощью компьютерной программы пробит-анализа, позволила нам вычислить ЛК50 заявляемого штамма ВКПМ В-8715 на 4 сутки эксперимента. Величина ЛК50 составила 0,04% КЖ, что значительно превосходит этот показатель у других штаммов Bacillus thuringiensis [5,9].

С целью оценки инсектицидной активности заявляемого штамма ВКПМ В-8715 для личинок мучного хрущака проверяли инсектицидную активность спорокристаллических комплексов заявляемого штамма и родительских штаммов путем применения их в качестве добавок к питательной среде для личинок 1-11 возраста. Личинки предварительно голодали 24 ч. Каждую водную суспензию смешивали с молотым геркулесом из расчета 3 мл исходной суспензии на 3 г геркулесовой муки. Полученную однородную смесь разделяли на 3 приблизительно равные части, каждую из которых разминали до состояния тонкой лепешки в пластмассовой чашке Петри. В каждую чашку Петри на влажную лепешку сразу же помещали по 16 экспериментальных личинок (в целом 48 личинок). Чашки накрывали крышками с вентиляционными отверстиями и инкубировали в термостате при температуре 27°С. Через сутки и далее на протяжении 15 суток с разными интервалами проверяли состояние личинок и пищевого субстрата. Последний по мере его высыхания измельчали. Регистрировали суммарную смертность личинок на протяжении опыта. В таблице 4 приведены результаты учета гибели личинок мучного хрущака на 19-е сутки.

Таблица 4. ШтаммыСмертность Bacillus thuringiensis(%)  1-2 возраст ВКПМВ-508110 ВКПМ В-8715100 ВКПМВ-122616,7

Заявляемый штамм Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 по своей активности против личинок мучного хрущака значительно превосходит родительские штаммы. Другие штаммы Bacillus thuringiensis [4, 5, 8, 9] не активны для личинок мучного хрущака.

Сравнительную оценку инсектоакарицидной активности заявляемого штамма против представителей отрядов Homoptera, Thysanoptera и Acariformes проводили на трех объектах: бахчевая тля, западный цветочный трипе и паутинный клещ.

Для тест-объектов в лабораторных условиях использовали метод погружения растений-хозяев в растворы культуральной жидкости со спорами и кристаллами исследуемых штаммов, полученные после окончания споруляции как в примере 1 на среде выращивания 1.

Для бахчевой тли (Aphis gossypii Glov., Homoptera) срезанные листья огурца погружали в растворы испытуемых образцов на 6 секунд, после чего их помещали на влажную фильтровальную бумагу в чашку Петри и заселяли самками тли.

Для западного цветочного трипса (Frankliniella occidentalis Pergande, Thysanoptera) использовали двухлистковые растения фасоли. За 7 дней до опыта на растения самки трипса откладывали яйца. После отрождения личинок растения срезали и листьями погружали в растворы испытуемых образцов на 6 секунд, после чего устанавливали в стаканы с водой, подставляя под черешки пластмассовые кружки, обмазанные по краям вазелином.

В случае обыкновенного паутинного клеща (Tetranychus urticae Koch, Acariformes) срезанные двухлистковые растения фасоли за сутки до опыта заселяли самками клеща. Растения погружали в растворы препаратов на 6 секунд и устанавливали в сосуды с водой.

Результаты гибели тест-объектов на 5-е сутки приведены в таблице 5.

Таблица 5. Штаммы    Bacillus thuringiensisВКПМВ-5081 ВКПМ В-8715ВКПМ В-1226 Бахчевая тляСмертность (%)12,8 59,217,4 Паутинный клещСмертность (%) 21,791,4523,6 Западный цветочный трипе 12,453,39,4 Смертность (%)    

Как следует из результатов, представленных в таблице 5, заявляемый штамм Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 по инсектоакарицидной активности против представителей отрядов Homoptera, Thysanoptera и Acariformes более чем в четыре раза превосходит исходные родительские штаммы. Другие штаммы Bacillus thuringiensis [4, 5, 8, 9] не активны против этого вида вредителей.

ПРИМЕР 3. Оценка токсичности заявляемого штамма в полевых условиях.

Оценку токсичности заявляемого штамма Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 в полевых условиях проводили для представителей отрядов Homoptera и Thysanoptera.

Заявляемый штамм ВКПМ В-8715 выращивали до стадии полной споруляции как в примере 1 на среде 1.

В каждом варианте опыта было по 100 растений. Доза биопрепарата во всех опытах составляла 4,1×10 8 спор/мл. Обработку проводили ранцевым опрыскивателем. Перед обработкой определяли численность тлей и трипсов на каждом растении. Чтобы избежать естественных миграции тлей и трипсов учетные растения в естественных условиях покрывали плотномарлевыми мешочками. Через 3, 5, 7 и 10 дней учитывали количество погибших и живых особей. Повторность каждого варианта 4-кратная. Количество тлей и трипсов подсчитывали лупой при 10-кратном увеличении. В таблице 6 приведены результаты испытаний заявляемого штамма Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 в сравнении с наиболее широко применяемым химическим препаратом карбофосом (50% концентрат эмульсии).

Таблица 6. №Название вариантов Численность вредителя на 10 растений (в абсолютных числах) до обработкиСредняя численность живых насекомых в (%) к предварительному учету, по дням учета 35 710 Опыт с хопчатником. Хлопковая тля (Aphis gossypii, Homoptera) 1.Контроль вода 173146 262360510 2.Карбофос - 50% к. эм. 0,7 л/га1650,4 0,96,5 9,23.ВКПМ В-871519424,0 17,111,2 10,3Опыт с хопчатником. Табачный трипс (Thrips tabaci Lind, Thysanoptera) 1.Контроль вода 82116124 1611862. Карбофос - 50% к.эм. 0,7 л/га 911,12,6 8,414,65. ВКПМ В-871568 48,743,132,1 26,0 Опыт с лимоном. Бахчевая тля (Aphis gossypii Glov, Homoptera). 1Контроль - вода 248161 174216345 2.Карбофос, 50% к.эм. 0,7 л/га2651,9 2,68,9 13,43.ВКПМ В-871520233,4 26,820,3 14,6Опыт с розой. Персиковая тля (Myzodes persicae, Homoptera). 1.Контроль-вода86 147192 2403162. Карбофос - 50% к.эм. 0,7 л/га 1062,63,1 7,911,63. ВКПМ В-8715116 29,817,611,4 6,8

Как следует из таблицы 6 токсичность заявляемого штамма Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715 для трипсов (отряд Thysanoptera ) незначительно уступает, а для тлей (отряд Homoptera) на 10 сутки практически соответствует токсичности химического препарата карбофоса.

Таким образом впервые получен штамм бактерий Bacillus thuringiensis ssp.kurstaki ВКПМ В-8715, обладающий инсектоакарицидной активностью против представителей отрядов Lepidoptera, Coleoptera, Homoptera, Thysanoptera и Acariformes.

Результаты опытов с использованием штамма в полевых условиях показывают, что заявляемый штамм по токсичности против вредителей сельскохозяйственных культур из отрядов Homoptera и Thysanoptera может успешно конкурировать с химическим препаратом карбофос на таких экономически значимых культурах, как хлопок, табак и розы.

Источники информации:

1. National Research Council. 1986. Pesticide reistance: strategies and tactics for management. National Academy of Sciences, Washington, D.C.

2. Crickmore, N., Zeigler, D.R., Feitelson J., Schenepf, E., van Rie, J., Lereclus, D., Baum, J. and Dean, D.H. 1998. Revision of the nomenclature for Bacillus thuringienis pesticidal crystal proteins. Microbiol. Molec. Biol. Rev. 62:807-813.

3. McConnell, E. and Richards, A.G. 1959. The production by Bacilllus thuringiensis Berliner of a heat-stable exotoxin toxic to insects. Can. J. Microbiol. 5: 161-168.

4. USA patent 6156308.

5. Патент РФ №2125091.

6. Gonzalez, J.M., Brown, B.J. and Carlton, B.C. 1982. Transfer of Bacillus thuringiensis plasmids coding for delta endotoxin among strains of B. thuringiensis and B. cereus. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 79:6951-6955.

7. Bradford, M.M. 1976. A rapid and sensitive method for the quantitation ofmicrogram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Analyt. Biochem. 72:248-254.

8. Патент РФ №2080065

9. Патент РФ №2204598

Формула изобретения

Штамм бактерий Bacillus thuringiensis ssp. kurstaki ВКПМ B-8715, обладающий инсектоакарицидной активностью против представителей отрядов Lepidoptera, Coleoptera, Homoptera, Thysanoptera и Acariformes.

QB4A Регистрация лицензионного договора на использование изобретения

Лицензиар(ы): Тюрин Сергей Ананьевич

Вид лицензии*: ИЛ

Лицензиат(ы): Общество с ограниченной ответственностью Производственное объединение "СИББИОФАРМ"

Договор № РД0012040 зарегистрирован 18.09.2006

Извещение опубликовано: 27.10.2006        БИ: 30/2006

* ИЛ - исключительная лицензия        НИЛ - неисключительная лицензия

MM4A - Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 08.12.2006

Извещение опубликовано: 27.01.2008        БИ: 03/2008

NF4A Восстановление действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение

Дата, с которой действие патента восстановлено: 10.02.2008

Извещение опубликовано: 10.02.2008        БИ: 04/2008

MM4A Досрочное прекращение действия патента из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 08.12.2012

Дата публикации: 10.10.2013





Популярные патенты:

2429594 Палец штампосварной для режущего аппарата (варианты) и способ его изготовления

... конца и два отверстия в перемычке; - переход от концов кронштейна к его перемычке выполнен в виде трапеции;- к верхней противорежущей пластине в районе носков приварена нижняя противорежущая пластина с образованием прямоугольного паза, а к нижней противорежущей пластине приварен кронштейн;- на кронштейне в районе трапециевидного перехода выполнены штампованные ребра жесткости. Отличительными от прототипов существенными признаками заявляемого устройства являются следующие признаки:1 вариант: - на нижней противорежущей пластине в месте сварки с помощью штамповки выполнены четыре рельефных выступа в виде удлиненного овала;- сварочное ядро в сечение представляет собой ...


2114528 Устройство для клеточного содержания мелких животных

... секциями 11. На вернем ярусе 3 выполнено не менее двух клеток 4, аналогичных клеткам 4 нижнего яруса. Течка 8 верхнего яруса 3 аналогична течке 9 нижнего яруса, причем сливной патрубок выходит практически до уровня пола нижнего яруса 2, при этом нижние (верхние) поверхности верхней течки 8 образуют потолок в клетках 4 нижнего яруса 2. Над верхним ярусом 3 оборудована крыша, преимущественно, с наклоном в сторону передней части устройства. Устройство используют следующим образом. Клетка состоит из модулей, легко собирается и разбирается. Отдельное подвесное гнездовье дает возможность моделировать клетку в различных вариантах: отдельная установка маточных 2-ярусных секций и ...


2076594 Установка для промышленного разведения дождевых червей

... и дождевым червям зависит от длины тоннеля и его сечения. Установка позволяет в широких пределах изменять величину перемещения за один цикл и количество циклов за один месяц и год, что обеспечивает любую необходимую технологию. Если субстрат перерабатывать только на биакугумус, необходимо чтобы скорость перемещения поддонов обеспечивала прохождение тоннеля за 1,0-1,5 месяца, при этом почти все дождевые черви снова возвращаются для воспроизводства. Если субстрат перерабатывать с получением максимальной массы дождевых червей, необходимо чтобы скорость перемещения поддонов обеспечивала прохождение тоннеля за 3-4 месяца (с соблюдением режима благоприятного жизнеобеспечения ...


2391804 Почвообрабатывающий каток

... сорняков и пожнивных остатков из поверхностного слоя с формированием ими мульчирующего слоя и выравнивание поверхности поля. 5 ил. Заявляемое изобретение относится к области сельскохозяйственного машиностроения, а именно к почвообрабатывающим рабочим органам, предназначенным для послеуборочной обработки почвы, паров, подготовки почвы под посев и подповерхностного прикатывания почвы после посева, борьбы с сорняками и выравнивания поверхности поля. Известен почвообрабатывающий каток для уплотнения почвы (SU 1496650 к A01B 49/04, 30.07.89), который состоит из оси, на которой посредством спиц размещены диски в виде колец, образованных двумя коническими поверхностями, ...


2260943 Способ подращивания личинок осетровых рыб

... (контроль) 100100 2*Т4,2,60,1 2-е38-я (предличинка) 54,0192,8 3*Т3, 2,60,1 2-е38-я (предличинка) 57,2123,7 4*Т3, 2,6 0,19-е44-я (предличинка) 160,850 5**Т4,1,5 0,19-е44-я (предличинка) 158,761,9 6**Т4,1,5 0,114-е4-дн. личинка 107,1105,2 * - личинки осетра с низким уровнем смертности (7%)** - личинки осетра с относительно высоким уровнем смертности (30,7%) Формула изобретения Способ подращивания личинок осетровых рыб, включающий гормональную их обработку после выклева путем погружения на 1 ч в раствор с тиреоидным гормоном и кортизолом (последний в концентрации 0,1 мг/л), отличающийся тем, что в качестве тиреоидного гормона используют тироксин в ...


Еще из этого раздела:

2413409 Способ и устройство для уплотнения убранной массы для получения силоса

2403705 Способ автоматического управления температурно-световым режимом в теплице

2119738 Орудие для уборки грубых кормов

2260930 Способ внесения органических удобрений

2153256 Инсектицидное средство и способ борьбы с вредителями сельскохозяйственных культур

2076583 Способ выращивания растений в теплице и устройство для его осуществления

2482660 Способ выращивания рапса ярового на семена

2154940 Способ получения, содержания и хранения живого корма для биологических объектов птиц и рыб

2164741 Устройство для заготовки древесины

2230467 Добавка к пищевым продуктам, биоцидный препарат, 2-(1-окси- 4-гидроксифенилен)-бензохинон (варианты) и способ его получения