Штамм микромицета trichoderma harzianum rifai для получения препарата против возбудителя серой гнили виноградаПатент на изобретение №: 2010527 Автор: Хитрон Я.И., Люблинская Н.А., Биланенко Е.Н., Завьялова Л.А. Патентообладатель: Государственный аграрный университет Молдовы Дата публикации: 15 Апреля, 1994 Изображения  Использование: сельское хозяйство, производство средств защиты растений от возбудителей заболеваний, касается нового штамма микромицета для производства препарата против возбудителя серой гнили винограда. Сущность изобретения: штамм микромицета Frihoderma harzianum Rifai 62 выделен из гниющей древесины, поврежденной жуками-точильщиками. Штамм депонирован в ВКМ под N F-3270 Д. Для получения препарата штамм выращивают на сусло - агаре при комнатной температуре в течение 12-14 сут, затем смывают споры водой. Готовят суспензию с титром 108 спор/мл и используют для обработки винограда. Штамм проявляет антагонистические свойства по отношению к Botrytiscinerea, Penicillium expansum, Anreobasidium pullulans, Penicillium verrucosum var. cyclopium. 3 табл. Изобретение относится к сельскому хозяйству и представляет собой новый штамм, который может быть использован при хранении винограда в качестве источника биологической защиты. Для биологической защиты успешнее всего применяются представители рода Trichoderma. Эффективность использования грибов данного рода подтверждена многолетней практикой в борьбе с почвенными грибами (см. С. Dennis and J. Webster, 1971, Trans. Br. mycol. Soc. 57(3), 363-369; Elad et al. , 1982, Can. J. Microbiol. , 28, 719-725; M. N. Schroth and J. G. Hancock, 1981, Ann, Rev. Microbiology, 35, 459-463; Elad J. , Barek R. , Chet I. , 1984, Soil Biol. and Biochem. , 16, 4, 381-386. В качестве грибов-антагонистов чаще других используются виды Trichoderma harzianum и виды T. viride. Естественное местообитание этих грибов - почва, где они чаще всего встречаются в подстилке. Это активные целлюлозоразрушители, участвующие в процессах деструкции растительного спада. Известна антагонистическая активность видов Trichoderma против несовершенных грибов рода Aspergillus - A. candidus, A. luchuensis, A. niger, A. fumigatus, A. terreus, (Rai B. , Singh V. N. , Singh D. - Plant and Soil, 1980, 57, No1, p, 131-135); рода Fuzarium: F. oxysporum, F. solani, F. graminearum, F. culmorum; Alternaria spp. , Botrytis cinerea, Collectotrichum Lindemuthianum, аскомицетов (Chaetomium spp. , Coniochaeta); базидиальных (Lentinus edodes) (Бадяй С. Б. , Защита растений, Вып. 9, - С. 75. . . 78); Beratlief Z. , Morched S. - Bull. Acad. Sci. agr. et forest. , 1983, N 12; Champion L. , J. E. Mitchel Sci. , Soc. , 1978, 94, N 2, р. 70; Knetmal M. B. , Hasabnis S. N. , Sardesphpande T. S. , Diwakar M. P. - Curr. Sci. (India), 1984, 53, N 16, p. 862-868; Lacicova B. , Pieya D. - Ochr. rosl. , 1985, 29, N 5, p. 3-5; Tokimoto K. , Repts Tottori Mycol. Inst. , 1984, N 22, p. 63-64; Venkatasubbaian P. , Safuula K. M. - Pros. Indian Nat. Sci. Acad. , 1984, B 50, N 5, p. 525-529). Известно практическое использование гиперпаразитов и антагонистов против широкого круга грибов - возбудителей вегетирующих растений, а также послеуборочных гнилей плодов, овощей и винограда при хранении. В частности, к снижению количества серой гнили на ягодах земляники после уборки урожая привело применение Trichoderma viride в поле (Tronsmo A. , Dennis C. - Neth. J. Plant Pathol. , 1977, v. 83, Suppl. 1, p. 449-455). Использование суспензий конидий Trichoderma harzianum для обработки яблоневых деревьев в период цветения привело к уменьшению количества гнили, вызванной B. cinerea на яблоках (Tronsmo A. , Ystaas J. - Plant Dis. , 1980, v. 64, p. 1009). Оценены антагонистические свойства 9 видов рода Trichoderma в отношении B. cinerea. Обнаружена высокая антагонистическая активность у группы штаммов Trichoderma, в которую входили виды T. viride, T. harzianum, T. koningii, T. longibracgiatum (Sailloux, Froidefond - Bull. OEPP, 1987, v. 17, N 4, p. 541-547). Известна защита винограда от серой гнили с помощью Trichoderma viride и T. harzianem с целью улучшения качества урожая (Dubos B. , Ulit J. , Bugaret Y. , Verdu D. - L'academie D'agriculture de France, 1978, 64, N 14, p. 1159-1167; Dubos B. - Proc. Int. Cont. Integr. Plant Prot. , Budapest, 1983, p. 41-47; Dubos B. in: Current perspectives in microbial еcology. Washington, 1984, p. 370-373; Dubos B. , Bulit J. , - Microbial ecology of the phylloplane. London est, 1981, p. 353-367; Davet P. - Bull. OEPP, 1987, 17, N 4, p. 535-540; Nair N. G. , Parker F. E. - Plant Pathol. , 1985, 34, N 2, p. 302-305). Разработка биологического метода борьбы с патогенами винограда в условиях хранения имеет ряд трудностей. Антагонисты должны быть способны развиваться при низких температурах в хранилищах, сохраняться определенное время на поверхности ягод (Сook R. J. - "Phytopathology", 1985, 75, N 1, р. 25-29; Wilson C. L. , Pusey P. L. - Plant Diseases, 1985, 69, N 5, p. 375-378). Из известных штаммов грибов рода Trichoderma используемых как средство биологической борьбы против патогенных грибов, являются штаммы Trichoderma harzianum Rifai Т-315 (АТСС N 20671) Trichoderma harzianum Rifai T-35 (АТСС N 20681), описанные в европатенте N 01333878. Данные штаммы используются против грибов из родов Pythium, Rhozoctonia, Sclerotium, Fusarium для борьбы с такими заболеваниями, как черная ножка, корневая гниль, пелликуляриоз и шейковая гниль рассадных культур. Однако виды или штаммы Trichoderma могут быть по-разному антагонистичны к разным видам грибов (H. D. Wells et al. , 1972, Phytopathology, 62, p. 442-447). В дополнение к таким различиям в антагонизме было обнаружено, что внешние условия, в которых происходит взаимодействие, также влияют на степень биологической борьбы. Заявляемый штамм Trichoderma harzianum Rifai 62 BKM F-3270 D предлагается как средство биологической борьбы с патогенами винограда в условиях хранения, в частности к Botrytis cinerea. В качестве прототипа взят стандартный препарат Триходермин. Его эффективность проявляется при использовании на ягодных культурах в период цветения при борьбе с серой гнилью. Недостатком известного препарата является то, что он недостаточно эффективно воздействует на серую гниль винограда. Целью изобретения является выделение штамма триходермы, обладающего повышенной антагонистической активностью по отношению к возбудителю серой гнили винограда Botrytis cimerea и способностью сдерживать развитие патогена в период вегетации и хранения винограда, позволяющий уменьшить потери винограда от гниения путем уничтожения спор грибов на поверхности ягод перед их закладкой на хранение и подавления спороношения в процессе хранения. Штамм Trihoderma harzianum Rifai 62 BKM F-3270 D выделен из гниющей древесины, поврежденной жуками-точильщиками. Номер штамма 62. Зрелая культура на агаровых косяках хранится в холодильнике при -2. . . +3оС с периодическими пересевами 2-3 раза в течение года. Штамм хорошо растет и спороносит на средах Чапека и сусло-агаре при 22-25оС. Полученный штамм обладает следующими свойствами: Макроморфология: колонии на среде Чапека на 14-е сутки роста при 22оС достигают диаметра 4-4,5 см. Вегетативный мицелий практически незаметен. Темно-зеленое клочковатое спороношение. Обратная сторона колоний бесцветная. На среде сусло-агар наблюдается обильное спороношение, спороносящие зоны располагаются концентрическими кругами. Микроморфология: конидии полушаровидные, гладкие, 4,8-5,0х4,3 мкм. Активность штамма. Штамм N 62 является активным антагонистом по отношению к возбудителю серой гнили винограда Botrytis cinerea. Обладает способностью сдерживать развитие патогена в период вегетации и хранения винограда. Проявляет активность при 2оС и в интервале температур 22-25оС. Способ определения активности штамма. Лабораторные испытания проведены с использованием метода агаровых блоков (СЭГИ, 1983) при 2оС и 22-25оС. Метод основан на способности растворимых метаболитов диффундировать в агаровую пластинку и в зависимости от интенсивности воздействия образовывать более или менее широкие зоны угнетения или стимулирования роста патогена (табл. 1). В лабораторных условиях культуру Trichoderma harzianum Rifai 62 BKM F-3270 D выращивают на косяках сусло-агара и среде Чапека в течение 12. . . 14 сут при 22-25оС, которую в дальнейшем используют в качестве посевного материала. Пример получения препарата с помощью штамма гриба Trichoderma harzianum Rifai ВКМ F-3270 D. Для приготовления водной суспензии препарата в пробирку с маточной культурой штамма N 62 наливают 10 мл стерильной дистиллированной воды, затем микробиологической иглой осуществляют смыв спороносящего слоя с поверхности питательной среды; пробирку тщательно встряхивают. Предварительно подготавливают пластиковые кюветы размером 0,31 х 0,25 м, залитые стерильной питательной средой - сусло-агар (из расчета 0,5 л среды на одну кювету), и накрывают их плотно прилегающим простерилизованным стеклом. Водную суспензию маточной культуры вносят в кюветы (из расчета 20 мл суспензии на кювету) и стерильным стеклянным шпателем растирают по всей поверхности питательной среды. Культуру штамма N 62 выращивают при комнатной температуре в течение 12-14 сут. По истечении этого срока проводят смыв; кюветы освобождают от стекол и заливают небольшим количеством стерильной дистиллированной воды; затем стерильным шпателем тщательно смывают выросшую культуру с поверхности питательной среды. Водную суспензию гриба фильтруют через двойной слой стерильной марли. В полученном маточном растворе препарата определяют титр спор. Подсчет проводят в камере Горяева. Готовый продукт представляет собой жидкость темно-зеленого цвета. Полевые испытания проводили в Молдове на винограде сортов Молдова, Мускат гамбургский и Италия. Пример конкретного выполнения. Столовые сорта винограда (Молдова, Мускат гамбургский, Италия) в период цветения и за 3-10 сут до уборки опрыскивают водной суспензией штамма гриба Trichoderma harzianum Rifai 62 BKM F-3270 D в концентрации 108 спор/мл, при расходе раствора 1000 л/га. Результаты испытания приведены в табл. 2 и 3. Данные табл. 2 и 3 свидетельствует о том, что обработка винограда водной суспензией штамма Trichоderma harzianum Rifai BKM F-3270 D позволяет снизить потери от гниения во время хранения на 10-15% и повысить выход пригодного для хранения винограда на 12-17% , в зависимости от сорта. Использование штамма микромицета (N62) Trichoderma harzianum Rifai BKM F-3270 D в качестве биологического препарата для борьбы с Botrytia cinerea понижает количество химических обработок винограда, а также уменьшает их вредное побочное действие. Достоинство применения данного штамма в том, что он оказывает также ингибирующее воздействие на следующие виды патогенов: Penicillium expamsum, P. verrucosum var. cyclopium, Aureobasidium pullulans и не образуется устойчивых штаммов Botrytis, как это происходит при применении фунгицидов. (56) Сельское хозяйство Молдавии. 1985, N 7, 57. Формула изобретенияШтамм микромицета Trichoderma harzianum Rifai БКМ F - 3270 Д для получения препарата против возбудителя серой гнили винограда.MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе Номер и год публикации бюллетеня: 28-2000 Извещение опубликовано: 10.10.2000 Популярные патенты: 2475025 Средство для обработки семян зерновых и зернобобовых культур, пораженных фузариозом ... превышает показатели всхожести на контроле и более эффективно улучшает посевные качества семян и превышает варианты как с индивидуальными препаратами, так и с ТМТД. Пример 3. Изучение влияния препаратов фуролан и метионин и их композиции на посевные качества семян кукурузы, пораженным фузариозомИсследования проводили в лабораторном опыте. Определяли посевные качества семян (всхожесть, высота проростков и длина корней). Препараты ТМТД, метионин и фуролан как отдельно, так и совместно применяли в виде водных растворов путем замачивания семян с последующим проращиванием их в чашках Петри в течение 5 дней в термостате при температуре 24°С. Оценка показателей проводилась на 5 ... 2432394 Ингибирование образования биогенного сульфида посредством комбинации биоцида и метаболического ингибитора ... продуцировать АТФ (материал обращения клеточной энергии), следовательно, клетки неспособны расти или делиться и могут, в конечном счете, погибнуть, однако гибель клетки необязательно происходит в результате контакта с этими соединениями, в частности, в низких концентрациях, где продукция энергии может быть снижена, но не полностью ингибирована. Для каждого испытанного биоцида и метаболического ингибитора определяли минимальную ингибирующую концентрацию (MIC, минимальное количество биоцида, требуемое для ингибирования восстановления сульфата и продукции сульфида в культуре SRB в течение 1 мес). Комбинации пар биоцидов испытывали при различных концентрациях для определения ... 2154939 Способ выращивания кроликов и устройство для его осуществления ... N 782773, МПК A 01 K 1/02, 1980; патенты РФ N 2097967, МПК A 01 K 1/02, 1997; N 2114528, МПК A 01 K 1/02, 10.07.1998; N 2142224, МПК A 01 K 1/02, 10.12.1999; Живчиков Н.И. и др. Малая механизация на приусадебном участке. - М.: Агропромиздат. - 1986. -С. 109-113). Наиболее близким аналогом к заявляемому устройству для осуществления способа является устройство по патенту РФ N 2027355, МПК A 01 K 1/02, 1995. В известном устройстве использована конструкция многоярусной клетки, в которой для упрощения условий для персонала по обслуживанию кроликов путем создания различных емкостных кормушек для травы, сена, комбикормов, и наливных поилок, кроме этого предлагается организовать сбор мочи ... 2492633 Устройство для автоматического полива ... превращается в водо-воздушный затвор, не позволяющий атмосферному воздуху войти в накопитель 2. Когда охлаждение воздуха в камере 1 прекратится, накопитель 2 будет заполнен водой до уровня, превышающего уровень установки выпускного отверстия 7 трубопровода 4. При изменении температуры воздуха в камере 1 в сторону повышения произойдет увеличение объема воздуха в камере 1, сопровождающееся поступлением воздуха в накопитель 2 и сливом воды из накопителя 2 в источник водоснабжения по трубопроводу 4. После снижения в накопителе 2 уровня воды до уровня установки выпускного отверстия 7 трубопровода 4 в отверстие 7 трубопровода 4 поступит воздух, отвесный участок 8 трубопровода 4 превратится ... 2201663 Устройство для ориентированной посадки лука ... из двух подпружиненных частей, а ориентирующее устройство выполнено в виде щеточного полотняного транспортера с эластичным ворсом, свободные концы которого в рабочей зоне расположены не далее центра тяжести находящихся в ложечках луковиц, при этом ориентирующее устройство установлено в бункере-питателе напротив высаживающего аппарата с параллельным расположением его продольной оси относительно продольной оси последнего в одной и той же продольно-вертикальной плоскости. 2. Устройство по п.1, отличающееся тем, что семяпровод имеет на выходе подпружиненное дно, а ворс расположен радиально к его поверхности. 3. Устройство по п.1, отличающееся тем, что имеет битер с лопастями для ... |
Еще из этого раздела: 2091380 Производные пиколиновой кислоты или их кислотно-аддитивные соли, способ их получения, нербицидная композиция и способ борьбы с сорняками 2421109 Способ роспуска закристаллизовавшегося меда и устройство для его осуществления 2121258 Устройство для вентилирования зерна или другого сыпучего материала (варианты) 2282965 Разбрасыватель минеральных удобрений 2055465 Система приготовления и подачи питательного раствора в теплице 2444769 Жидкостный резервуар, устройство наблюдения для наблюдения под поверхностью жидкости и оптическая пленка 2059362 Установка для выращивания мидий 2469534 Перезаряжаемая электронная ловушка для животных с перегородкой, механическим переключателем в конфигурации с множеством поражающих пластин 2149547 Пневматический опрыскиватель 2248687 Способ весеннего боронования озимых культур и зубовая борона для его осуществления |
Изобретения в сельском хозяйстве
Обработка почвы в сельском и лесном хозяйствах
Посадка, посев, удобрение
Уборка урожая, жатва
Обработка и хранение продуктов полеводства и садоводства
Садоводство, разведение овощей, цветов, риса, фруктов, винограда, лесное хозяйство
Новые виды растений или способы их выращивания
Производство молочных продуктов
Животноводство, разведение и содержание птицы, рыбы, насекомых, рыбоводство, рыболовство
Поимка, отлов или отпугивание животных
Консервирование туш животных, или растений или их частей
Биоцидная, репеллентная, аттрактантная или регулирующая рост растений активность химических соединений или препаратов
Хлебопекарные печи, машины и прочее оборудование для хлебопечения
Машины или оборудование для приготовления или обработки теста
Обработка муки или теста для выпечки, способы выпечки, мучные изделия
|
|
||