Способ оценки морозостойкости озимой пшеницыПатент на изобретение №: 2198504 Автор: Стаценко А.П., Беляк В.Б., Голоюс Е.В. Патентообладатель: Пензенская государственная сельскохозяйственная академия, Стаценко Александр Петрович, Беляк Виктор Борисович, Голоюс Елена Викторовна Дата публикации: 20 Февраля, 2003 Начало действия патента: 2 Октября, 2000 Адрес для переписки: 440014, г.Пенза, ул. Ботаническая, 30, Пензенская госсельхозакадемия, кафедра растениеводства, А.П.Стаценко ИзображенияИзобретение предназначено для использования в области сельского хозяйства в селекции. Способ включает трехнедельное проращивание семян в термостате при 25oС на увлажненной фильтровальной бумаге при 12-часовом в сутки освещении 7 тыс. лк. При этом в первые сутки после проращивания осуществляют промораживание растений при 0...-2oС, во вторые сутки при -5...-7oС с последующим определением гидролитической активности фермента - фруктофуранозидазы. Вычисляют индексы стойкости растений, которые выражают отношением гидролитической активности фермента в третьем листе растений после промораживания к исходной, а также выделяют три группы стойкости: морозостойкую (индекс стойкости 3,00 и выше), среднеморозостойкости (1,51-3,00) и слабоморозостойкую (1,5 и ниже). Для сравнительной оценки морозостойкости используют стандартные сорта-классификаторы. Изобретение позволяет ускорить процесс получения результатов оценки, экономно использовать селекционный материал, повысить объективность оценки. 1 табл. Изобретение относится к области сельского хозяйства /селекция растений/ и может быть использовано для оценки морозостойкости селекционного материала и новых сортов озимой пшеницы. Известны способы определения морозостойкости, в основе которых лежит изменчивость электропроводности растительных тканей [1] , интенсивности сверхслабого свечения [2] и накопление в листьях связанной воды [3]. Для реализации названных способов требуется наличие современной лаборатории, оснащенной сложным оборудованием, а также высокая квалификация исполнителей, что существенно препятствует их широкому использованию в селекционном процессе. Известен также широко распространенный в селекционной практике лабораторный метод оценки морозостойкости озимых, предусматривающий ступенчатое промораживание проросших семян растений с последующим вычислением процента их выживаемости при промораживании [4] - прототип. Между тем, указанный метод отличается существенными недостатками, главными из которых являются долгосрочность получения результатов и непроизводительный расход ценного селекционного материала, что существенно снижает эффективность селекционного процесса. Имеются также сведения о том, что морозостойкость форм и сортов культурных растений связана с гидролитической активностью фермента -фруктофуранозидазы. Причем наиболее морозостойкие растения обладают в период криостресса повышенной ферментативной активностью [5, 6]. Целью предлагаемого изобретения является ускорение процесса получения результатов оценки и экономный расход селекционного материала, а также повышение объективности оценки, так как использование сортов-классификаторов с известной степенью морозостойкости дает возможность детально дифференцировать селекционный материал по степени морозостойкости с выделением при этом трех групп слабо-, средне- и морозостойких форм. Поставленная цель достигается путем трехнедельного проращивания семян сортов-классификаторов и испытуемых образцов в растильнях на увлажненной многослойной фильтровальной бумаге в термостате при температуре 25oС и 12-часовом /в сутки/ освещении интенсивностью 7 тыс. лк с последующим определением гидролитической активности фруктофуранозидазы в третьем листе в процессе их ступенчатого промораживания в холодильной камере в режиме: первые сутки при температуре 0...-2oС, вторые сутки при температуре -5....-7oС. При этом растения сохраняются для получения из них потомства, что обеспечивает экономию селекционного материала. Для этого у проростков испытуемых образцов и сортов-классификаторов с помощью лезвия или скальпеля отделяют третий лист. Растительный материал после гомогенизации с 20-30 мл дистиллированной воды и доведения кислотности раствора с помощью ацетатного буфера до 5,0 и добавления 3-5 г сахарозы настаивают в термостате в течение 10 ч при температуре 40oС. При этом происходит peaкция гидролиза сахарозы с образованием инвертного сахара. Количество образовавшихся редуцированных сахаров определяют стандартным колориметрическим методом по Швецову. Оптическую плотность хромофора измеряют на ФЭК-56М с красным светофильтром. Вычисление содержания сахаров производят по калиброчной кривой, составленной по растворам глюкозы. Для определения гидролитической активности -фруктофуранозидазы двухграммовые навески листьев гомогенизируют в 10 мл дистилированной воды до однородной массы с использованием гомогенизатора или растирают в ступке с кварцевым песком. Гомогенат переносят в мерные колбы на 50 мл, доводят дистилированной водой до метки и тщательно перемешивают. После взбалтывания из суспензии отбирают две пробы по 10 мл и переносят в мерные колбы по 100 мл. Одну колбу /контрольную/ нагревают до 100oС и с целью инактивации фермента кипятят в течение 2 - 3 мин, а затем суспензию охлаждают в ледяной бане. После этого в контрольные и опытные колбы добавляют по 5 мл ацетатного буферного раствора с кислотностью 5,0, по 10 мл 5%-ного свежеприготовленного раствора сахарозы и по 4 капли толуола. Колбы помещают на 2 ч в термостат при температуре 40oС, после чего добавляют по 2,5 мл 1н. раствора NaOH, по одной капле фенолфталеина и по каплям 10%-ный раствор сернокислого цинка до обесцвечивания индикатора. Объем раствора доводят дистилированной водой до метки, интенсивно перемешивают и фильтруют. В полученном фильтрате определяют содержание редуцированных сахаров. Для этого в пробирку диаметром 30 мм приливают 5 мл фильтрата; доводят объем водой до 10 мл, затем приливают 10 мл медно-щелочного раствора, интенсивно взбалтывают и помещают на 15 мин в кипящую водяную баню. Реакцию ограничивают погружением пробирок в холодную /2-5oС/ воду. К охлажденным растворам постепенно добавляют по 5 мл смеси равных объемов щавелевой и серной кислот. Когда закись меди растворится, остаток йода титруют 0,001 н. раствором тиосульфата натрия в присутствии 0,5 мл 0,5%-ного раствора крахмала. Активность -фруктофуранозидазы определяют в мг инвертного сахара, образовавшегося в течение 1 ч в 1 г исследуемого образца. На основании полученных данных производят расчет индексов стойкости, которые вычисляют отношением гидролитической активности фермента в третьем листе после ступенчатого промораживания в названном выше режиме к исходной. В результате сопоставления индексов стойкости, которые выражают степенью повышения активности фермента в третьем листе сортов-классификаторов и испытуемых образцов, дают заключение о принадлежности селекционного образца озимой пшеницы к той или иной группе морозостойкости. В качестве примера приводится сравнительная оценка морозостойкости селекционного материала озимой пшеницы с помощью традиционного и нового методов /табл./. Селекционные образцы 2446 и 2093 по результатам оценки отнесены к морозостойким. В то же время образцы 2134 и 2560 проявили себя как среднеморозостойкие, а образцы 2361 и 2209 - слабоморозостойкие, что согласуется с результатами выживаемости проросших семян при промораживании в холодильной камере. Источники информации 1. Авт. св-во 353684 /СССР/. Способ определения морозостойкости растений /Е.П. Алешин, К.М. Цой, В.А. Куницкий. Опубл. в 1972 г., бюлл. 12. 2. Авт. св-во 488548 /СССР/ Способ определения морозостойкости растений /Б. Н.- М. Китлаев, Г.И. Третьяков, Т.С. Дубоносов и др./. Опубл. в 1975 г., бюл. 29. 3. Патент на изобретение 2145194 /Россия/ Способ оценки морозостойкости растений /А.П. Стаценко., А.А. Галлиулин. Опубл. в 1999 г., бюл. 36. 4. Физиология растений в помощь селекции. М.: Наука, 1974, с. 54-57. 5. Колоша О.И. Криофитофизиологические механизмы адаптации и устойчивости//Физиология и биохимия культ. растений. - 1986. - Т.18. - 6. - с. 555-567. 6. Колоша А.И., Костенко И.И. Водный режим, активность ферментов и морозостойкость озимой пшеницы // Доклады BACXНИЛ. - 1973. - 3. Формула изобретенияСпособ оценки морозостойкости озимой пшеницы, включающий трехнедельное проращивание семян в термостате при 25oС на увлажненной фильтровальной бумаге при 12-часовом в сутки освещении 7 тыс. лк, отличающийся тем, что в первые сутки после проращивания осуществляют промораживание растений при 0... -2oС, во вторые сутки при -5...-7oС с последующим определением гидролитической активности фермента-фруктофуранозидазы, вычисляют индексы стойкости растений, которые выражаются отношением гидролитической активности фермента в третьем листе растений после промораживания к исходной, а также выделяют три группы стойкости: морозостойкую (индекс стойкости 3,00 и выше), среднеморозостойкости (1,51-3,00) и слабоморозостойкую (1,5 и ниже) и используют для сравнительной оценки морозостойкости стандартные сорта классификаторы.MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе Дата прекращения действия патента: 03.10.2002 Номер и год публикации бюллетеня: 16-2004 Извещение опубликовано: 10.06.2004 Популярные патенты: 2167648 Средство для защиты от укусов кровососущих насекомых (варианты) и способ его получения ... водосодержащего состава и равномерно нанести на участки кожи. Однако такая пленка непроницаема для молекул ДЭТА, и выделение репеллента, находящегося в ядре микрокапсулы, происходит лишь после ее раздавливания при нанесении состава на кожу и других механических воздействиях на обработанные участки тела. С этим связан основной недостаток известного средства - нерегулируемый поток испарения ДЭТА в окружающую среду и, как следствие, невоспроизводимость результатов оценки продолжительности защитного действия. Наиболее близким по технической сущности является эмульсионный состав репеллента [4], содержащий репеллент ДЭТА, воду, пленкообразующие полимеры, стабилизаторы эмульсии, ... 2426299 Способ повышения урожая картофеля в несколько раз ... устанавливают контейнеры в хранилище с проверкой требуемых биохимических, технологических и органолептических характеристик и определяют потери путем сравнения весовых характеристик: начальной и в ходе хранения; в качестве хранилища выбрана герметичная камера, оборудованная азотоснабжением в виде воздухоразделительной установки для подачи сжиженного азота N2 и кислорода O2, причем селекционные семена закладывают в камеру с заполнением проходов и в первые сутки хранения устанавливают в камере оптимальную регулируемую газовую среду (N2 +O2opt), данные о которой фиксируют в блоке памяти автоматической системы управления, благодаря чему в процессе осенне-зимне-весеннего-до посадки ... 2127511 Композиция пленочного полимерного материала для покрытия теплиц и оптический активатор для полимерного материала (варианты) ... стронция, 4,56 г оксида кальция, 40 г серы смешивают с раствором европия азотнокислого в количестве 0,05 мас.% в пересчете на металл. Далее поступают аналогично примеру 4. Полученный оптический активатор содержит 99,95 мас.% твердого раствора сульфида стронция и сульфида кальция и 0,05 мас.% европия. При этом в твердом растворе содержится 94,1 мас. % сульфида стронция и 5,85 мас.% сульфида кальция. Оптический активатор излучает в красной области спектра с max = 625 нм и обладает длительностью послесвечения в течение 45 мин. Пример 8. 81,8 г оксида стронция, 4,25 г оксида кальция и 40 г серы смешивают с раствором европия азотнокислого в количестве 0,45 мас.% в пересчете на металл. ... 2473366 Вещество, обладающее антимикробным действием ... в физиологическом растворе определяли для содержащих серебро материалов, например, W 02 и W 03. В данном случае величина для W 02 составила 28,6, а для W 03 составила 68,2 мг/л см2. Как известно из литературы, серебро действует как антимикробный агент путем образования ионов Аg+. Эффективность повышается с повышением концентрации Аg+. Однако не представилось возможным установить зависимость антимикробной эффективности от содержания молибдена и/или вольфрама в физиологическом растворе молибдена и вольфрама. Следовательно, ее необходимо вывести исходя из факта, что молибден и вольфрам сами по себе не являются активными. Следовательно, значение pH физиологического раствора определяли ... 2265300 Способ борьбы с нежелательной порослью топинамбура ... Без проведения соответствующих приемов топинамбур легко становится трудно искоренимым сорняком. Возобновление вегетации растений проводится из оставшихся в почве клубней, остатков столонов, стеблей с подземными почками (А.Ф.Мейснер. Новое в биологии подземных органов земляной груши /Труды Тульской государственной с/х опытной станции: т.1. Тула: Приокское книжное изд-во, 1967, - с.183-189). Поэтому в последующие годы после прекращения возделывания топинамбура образуется глубоко и прочно укореняющаяся поросль, которая засоряет поля. От оставшихся единичных растений (1-2 шт./м2) в последующий год засоренность увеличивается в 5-10 раз (5-20 шт./м2).Способность топинамбура после ... |
Еще из этого раздела: 2464780 Способ, устройство и компьютерный программный продукт для управления группой молочного скота 2492633 Устройство для автоматического полива 2108700 Способ оценки горных сенокосов и пастбищ 2140137 Универсальный способ получения проросших семян сельскохозяйственных культур 2154939 Способ выращивания кроликов и устройство для его осуществления 2495561 Машина лесозаготовительная 2479996 Экологический комплекс для аквакультуры и рекультивации морских вод 2028763 Измельчитель древесной поросли 2161400 Способ определения активности агентов 2175833 Охладитель молока с аккумулятором холода |