Способ предпосевной обработки семян сельскохозяйственных культур для синхронизации клеточных делений в корневой меристемеПатент на изобретение №: 2180474 Автор: Нефедьева Е.Э., Хрянин В.Н., Грозенко Н.Г., Розен М.А. Патентообладатель: Городской центр технического творчества Дата публикации: 20 Марта, 2002 Начало действия патента: 9 Октября, 2000 Адрес для переписки: 442962, Пензенская обл., г. Заречный, ул. Конституции, 39а, ГЦТТ ИзображенияИзобретение относится к сельскому хозяйству и растениеводству, а именно к физическим методам воздействия на биологические объекты, в частности на семена, и может быть использовано в селекционно-генетической работе, направленной, например, на получение ценных мутантов сельскохозяйственных растений. Способ заключается в однократном воздействии на семена ударной волной в водной среде при 2oС с созданием импульсов 155...554 Нсм-2 с последующим замачиванием семян в воде при данной температуре в течение 12 ч. Использование предложенного способа позволяет увеличить эффект синхронизации клеточных делений и продления фаз митотического цикла для проведения селекционно-генетических работ. 2 табл., 1 ил. , , , , , ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУИзобретение относится к сельскому хозяйству и растениеводству, а именно к физическим методам воздействия на биологические объекты, в частности на семена, и может быть использовано в селекционно-генетической работе, направленной, например, на получение ценных мутантов сельскохозяйственных растений. Клетки на разных фазах митотического цикла проявляют неодинаковую чувствительность к мутагенам. Синхронизируя клетки меристемы к чувствительным фазам клеточного цикла и изменяя продолжительность фаз митоза, можно повысить чувствительность клеток к мутагенам, т.е. способствовать увеличению частоты и спектра индуцированных мутаций, что важно для проведения селекционно-генетических работ. Известен способ обработки семян сельскохозяйственных культур, при котором семена помещают в воду и создают ударную волну с давлением фронта 5...40 МПа за счет детонации взрывчатого вещества [1]. Величина давления и время его действия регулируются массой взрывчатого вещества и расстоянием между ним и поверхностью семян. Применение предлагаемого способа позволяет осуществить обработку семян при условии их объемного сжатия в течение короткого промежутка времени, не разрушая семена как биологические объекты. Указанный способ приводит к повышению урожайности сельскохозяйственных культур. Данное воздействие оказывает стимулирующее влияние на рост растения, однако состояние покоя в меристеме после ударно-волновой обработки является непродолжительным. Известным методом физического воздействия для синхронизации клеточных делений в зародышевой меристеме зерновых культур также является способ обработки семян электромагнитным полем частотой 59,0-62,6 ГГц при плотности потока мощности 100-300 мкВтсм-2 в непрерывном режиме в течение 10-30 мин [2] . Недостатки указанного способа заключаются в относительно невысокой эффективности синхронизации делений (не более 1,5...2,0 раз) и невозможности воздействия на отдельные фазы митотического цикла. Известны также способы синхронизации митозов в меристеме ячменя, состоящие в воздействии 5-аминоурацила (5-АУ) [3], или 5-АУ и колхицина [4] на проростки или замоченные семена с последующей экспозицией объектов в воде при 2oС в течение 12 ч. Указанные вещества могут вызывать отдаленные последствия в генетическом аппарате растений. Данные способы трудоемкие, многостадийные, длительные. Они требуют применения дорогостоящих реактивов и приводят к травмированию при высеве проростков, находящихся в состоянии активного прорастания. Вместе с тем эффект синхронизации при данном способе обработки меньше, чем в предыдущем. Целью изобретения является увеличение эффекта синхронизации клеточных делений и продления отдельных фаз митотического цикла для проведения селекционно-генетических работ. Поставленная цель достигается тем, что сухие семена обрабатывают ударной волной в водной среде при 2oС с созданием импульсов 155...554 Hcм-2 с последующим их замачиванием в воде при данной температуре в течение 12 часов. Величина импульса регулируется массой взрывчатого вещества и расстоянием между ним и поверхностью семян. Последействие обработки сохраняется в течение 30 дней. Сравнение известных решений с заявленным показало, что его отличительным признаком является выдерживание семян при 2oС в течение 12 ч после ударно-волновой обработки с целью усиления стрессовой реакции и состояния покоя для повышения эффективности синхронизации делений клеток в меристемах и продления отдельных фаз митотического цикла. Проведение ударно-волновой обработки в воде при 2oС необходимо для обеспечения стрессовой ситуации в момент прохождения ударной волны. Непродолжительное замачивание при ударно-волновой обработке допускает высушивание семян и их последующее хранение без изменения всхожести. Длительный период последействия является существенным преимуществом заявляемого способа, так как увеличивает время для выбора оптимальных сроков посева и (или) последующего воздействия мутагена на семена. Пример. Сухие семена сельскохозяйственных культур (гречиха) подвергали ударно-волновой обработке в воде при 2oС. Величину создаваемого импульса изменяли в диапазоне от 100...800 Нcм-2. Величину удельного импульса (J, Нсм-2) рассчитывали по формуле [5] J =P, где Р - давление на фронте ударной волны, МПа; характеристическое время, определяющее интенсивность падения давления в данной точке с течением времени. , где Q - масса заряда взрывчатого вещества, кг; R - расстояние от центра взрыва до поверхности семян, м. После ударно-волновой обработки семена выдерживали в воде при 2oС в течение 12 ч, что соответствует оптимальным режимам, приводимым в работах [3, 4]. В дальнейшем семена высушивали на воздухе при комнатной температуре до тех пор, пока их масса не станет постоянной. После высушивания отбирали зрелые, выполненные плоды и проращивали их при 25oС во влажной атмосфере. Корни проростков, начиная с возраста 48 ч, фиксировали в уксусной кислоте с этанолом (1:4) в течение 12 ч с интервалом 2 ч. Материал окрашивали в ацетоорсеине. Давленые препараты просматривали при 600-кратном (об. 40х, ок. 15х) увеличении и определяли митотический и фазовый индексы (МИ, ФИ) апикальных корневых меристем. Поскольку были обнаружены значительные изменения среднего МИ, для определения синхронности митозов использовали относительное увеличение максимального МИ по сравнению со средним в каждом варианте опыта и соотносили результаты, полученные на опытных растениях, с контролем. Изменение МИ проростков гречихи в динамике приведены в табл. 1, где отражены данные для импульсов, равных 155...554 Hcм-2. Импульсы от 100 до 155 Нсм-2 не повлияли на клеточные деления, и МИ не отличались от контрольных результатов. Импульсы свыше 554 Нсм-2 оказались губительными для зародышей семени. Результаты, приведенные в табл. 1, показывают, что колебания МИ контрольных проростков гречихи были незначительными. Максимальное значение достигалось в 50 ч и составляло , а среднее - . Относительное увеличение максимального МИ равнялось 1,20. При J=155 Нсм-2 среднее значение МИ составило . Максимальное значение МИ в 52 ч составляло . Его относительное увеличение по сравнению со средним в данном варианте опыта составило 1,77, то есть синхронность делений превысила контроль на 47,5%. При J=401 Нсм-2 среднее значение МИ составляло . Максимальное значение МИ возросло до через 50 ч. Относительное увеличение МИ соответствовало 3,30, что указывало на увеличение синхронности клеточных делений в 2,8 раза по сравнению с контролем. При воздействии J=554 Нсм-2 среднее значение МИ уменьшилось до , что было на 31% ниже контроля. Максимальное значение МИ соответствовало 88,1%, его относительное увеличение составило 1,57. Синхронность митозов возросла на 30,8% относительно контроля. Отмечены колебания фазовых индексов (фиг. 1,а). У 48-50-часовых контрольных проростков более клеток находились на стадии профазы, а у 52-56-часовых проростков начали преобладать клетки на стадии мета- и анафазы. Их количество превышало от общего числа клеток. Количество телофазных клеток начинало увеличиваться у 54-56-часовых проростков и достигло максимума у 58-часовых проростков. Максимум МИ соответствовал 50-52-часовым проросткам, когда или преобладали профазные клетки (), или количество клеток в стадии про-, мета-, анафазы было приблизительно одинаково (соответственно 257, 285, ), а в стадии анафазы - несколько ниже, (фиг. 1,а). После обработки при J=155 Нсм-2 амплитуда колебаний ФИ (рис.1,б) была более значительной, чем в контроле. Отмечено существенное увеличение числа анафазных клеток (до ) у 54-часовых проростков, указывающее на задержку большинства клеток на данной стадии. Эти нарушения были временными, так как уже через 56 часов отмечался максимум телофазных клеток (). Максимум МИ соответствовал прохождению метафазы и особенно анафазы большинством клеток, что также указывало на изменение в смене фаз митоза. Обработка J=401 Нсм-2 способствовала наиболее значительным изменениям ФИ (фиг. 1,в). Увеличилось количество клеток, находящихся на стадии профазы (48 часов - , 50 часов - ) и анафазы (52 часа - , 54 часа - ). Первые телофазы появились только через 52 часа, тогда как в контроле они присутствовали постоянно. Под действием J=554 Нсм-2 амплитуда колебаний ФИ также превышала контроль (фиг. 1, г). Характерно увеличение количества метафазных клеток до через 52 и 54 часа и анафазных клеток до через 54 часа. Количество профазных клеток 48 часов в опыте соответствовало контролю ( и соответственно). Первые телофазы появились только через 54 часа, а через 56 часов составляли уже . При анализе аномалий делений анафазно-телофазным методом во всех вариантах опыта аберраций хромосом (мосты и фрагменты) не было обнаружено. Таким образом, предварительная обработка оказывает влияние на прохождение митотического цикла, но не вызывает повреждений хромосом, то есть сама не вызывает мутагенного эффекта и может быть использована для синхронизации клеточных делений. В специальных экспериментах исследовалось последействие обработки. Семена обрабатывали по описанной методике, 3 партии семян хранили в течение 1, 30 и 40 суток, проращивали и определяли МИ в возрасте 48-58 часов. Данные приведены в табл. 2. Видно, что последействие обработки сохраняется при хранении семян до 30 суток. Как следует из табл. 2, при хранении семян в течение 1 суток после обработки обнаруживается максимальный эффект синхронизации (в 1,47...2,75 раз). При хранении в течение 30 суток эффективность воздействия практически не изменяется. При хранении в течение 40 суток эффект синхронизации митозов снижается и составляет 9-98%. Источники информации 1. Патент РФ 2083073 Способ предпосевной обработки семян сельскохозяйственных культур. Атрощенко Э.С., Хрянин В.Н и др. 2. А. С. 1692408 "Способ предпосевной обработки семян для синхронизации клеточных делений в зародышевой меристеме зерновых культур. Н.Г. Шестопалова, Л.Г. Головина и др. 3. Бендрорайтите Л.П. Цитология и генетика, 1978, т.12, 3 - С.195-199. 4. Артемьева В.В. Автореферат диссертации на соискание уч. степени кан. биол. наук. Л., 1987, 22 с. 5. Пихтовников Р.В., Завьялова В.И. Штамповка листового металла взрывом. М.: Машиностроение, 1964. - С.42-43.ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯСпособ предпосевной обработки семян сельскохозяйственных культур для синхронизации клеточных делений в корневой меристеме, включающий однократное воздействие на семена ударной волной в водной среде, отличающийся тем, что ударную обработку семян проводят в воде при 2oС с созданием импульсов 155. . . 554 Нсм-2 с последующим замачиванием семян в воде при данной температуре в течение 12 ч.Популярные патенты: 2495561 Машина лесозаготовительная ... с опорой 27.Предлагаемая конструкция машины лесозаготовительной практически исключает зажим пильного механизма при срезании дерева и его поломку, упрощает конструкцию, снижает время на формирование пачки и повышает эффективность использования машины лесозаготовительной. Формула изобретения 1. Машина лесозаготовительная, включающая самоходное шасси и прицеп, на которых установлено технологическое оборудование, содержащее пильный механизм, размещенный по всей ширине лесозаготовительной машины, механизм сталкивания дерева с пня и кониковые устройства, отличающаяся тем, что самоходное шасси и прицеп соединены устройством, позволяющим им перемещаться относительно друг друга ... 2142696 Способ выращивания цветочных и декоративных растений в тепличных и домашних условиях ... по определенной формуле (RU, 2062555, 1996). Однако известный способ является достаточно сложным. Задачей настоящего изобретения является разработка простого способа питания растений, требующих умеренного или обильного полива в период максимального роста, цветения и плодоношения. Поставленная задача решается описываемым способом выращивания цветочных и декоративных растений в тепличных и домашних условиях, включающих посадку, полив и подкормку с распределением питательных веществ во времени, при этом подкормку осуществляют путем установки в емкость для посадки мембранного корнепитателя КП-5, представляющего собой диффузионно-осмотический дозатор, заключенный в полупроницаемую ... 2435369 Гербицидные композиции ... формулу: Он известен как гербицидный антидот. В общем, гербицидный антидот представляет собой соединение, которое снижает действие гербицида при применении на культурах. Желательно делать вододиспергируемые гранулы, содержащие гербициды. Причина в том, что такие гранулы легки для применения, текут подобно жидкости после смешивания с водой и не образуют или мало образуют пыли в течение применения вододиспергируемых гранул. Однако когда клохинтоцет-мексил вступает в контакт с водой, он легко превращается в его гидрат, который предрасположен к образованию больших кристаллов, что затрудняет его способность к разбрызгиванию и затем его способность работать в качестве ... 2227965 Способ возделывания бахчевых культур и устройство для его осуществления ... используют в качестве направляющей при механизированной уборке плодов (RU, патент №2121254 С1. МПК6 А 01 В 79/02, 49/06. Заявлено 10.12.96; Опубл. 10.11.98).К недостаткам данной технологии, принятой нами в качестве наиближайшего аналога, следует отнести то, что при возделывании растения бахчевых культур не подвергают некорневой подкормке макро- и микроэлементами. Результатами исследований установлено, что последние оказывают существенное влияние на качество урожая и питательную ценность арбуза, дыни, тыквы.Известно устройство для ухода за посевами бахчевых культур, включающее навешиваемые на переднюю и заднюю навески трактора поперечные брусья с опорными колесами, плетеукладчики, ... 2141756 Способ многоуровневого культивирования растений и устройство для его осуществления ... для культивирования 130 вниз из верхнего уровня на средний уровень, когда растения становятся выше, новые подвесные стержневые элементы 150 присоединяют к средним кронштейнам 123 для продолжения культивирования. При таких обстоятельствах вспомогательный кронштейн 124 можно использовать для прикрепления временных поддерживающих мест для подвесных стержневых элементов 150, используемых в верхнем уровне, сразу после перемещения или, если требуется, вспомогательный кронштейн можно использовать для возможности использования подвесных стержневых элементов 150, применяемых в верхнем уровне, до тех пор, пока растение не вырастет до определенной высоты. Конфигурация кронштейнов 123 и ... |
Еще из этого раздела: 2159526 Устройство для навешивания сельскохозяйственных орудий на трактор 2260932 Способ уборки льна и тресты при неблагоприятных погодных условиях 2169462 Улей (варианты), способ его сборки и способ круглогодичного содержания в нем пчел 2080774 Способ изготовления брикетов для выращивания растений и устройство для его осуществления 2251837 Рабочий орган кустореза 2019090 Самонапорная оросительная система 2402211 Способ получения трансгенных кроликов, продуцирующих белки в молочную железу 2455815 Самоходный универсальный комбайн для уборки картофеля и топинамбура 2405306 Способ определения содержания крахмала по содержанию глюкозы с учетом индивидуального коэффициента пересчета в растительном материале 2381650 Синергические фунгицидные комбинации биологически активных веществ и их применение для борьбы с нежелательными фитопатогенными грибами |