Способ подготовки биоткани для ксенопротезированияПатент на изобретение №: 2197818 Автор: Бурцев П.Ю., Бурцева Е.В. Патентообладатель: Закрытое акционерное общество "Медикон ЛТД" Дата публикации: 10 Февраля, 2003 Начало действия патента: 9 Июня, 2001 Адрес для переписки: 105037, Москва, а/я 5, ул. 1-я Прядильная, 12, стр.1, ЗАО "Медикон ЛТД" Изображения Изобретение относится к области медицины, в частности к протезированию клапанов сердца. Сущность способа: биоткань для ксенопротезирования перед ферментативной обработкой выдерживают в течение 15-72 ч в гипертоническом растворе хлорида натрия 1-10%-ной концентрации, обрабатывают ферментом в боратном буферном растворе при 32-37oС, отмывают сначала в 0,6-6%-ном растворе уксусной кислоты, затем в растворе гидрокарбоната натрия и растворах хлорида натрия, выдерживают в многократно заменяемом растворе глутарового альдегида в буферном растворе с возрастающей концентрацией и стерилизуют. Способ позволяет сократить расход дорогостоящих реактивов и уменьшить вероятность минерализации биоткани. 1 табл. ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУИзобретение относится к области медицины, в частности к протезированию клапанов сердца. Известны способы обработки биоткани с целью подавления ее минерализации путем контактирования ткани с водным раствором четвертичной аммонийной соли, в составе которой есть, по крайней мере, один из алкильных радикалов, содержащих 7-15 атомов углерода (Авт. св. СССР 4405327, МКИ 6 А 61 F 2/24, 1983), а также способ, включающий обработку биоткани 2-5%-ным раствором диглицидилового эфира этиленгликоля с последующей обработкой раствором гепарина с концентрацией не менее 100 МЕ/мл (Пат. РФ 2008767 С1, МКИ 6 А 01 N 1/00, 1994). Недостатком этих способов является тот факт, что обработка раствором четвертичной аммониевой соли либо последовательная обработка биоткани раствором диглицидилового эфира этиленгликоля и гепарином лишь экранируют поверхность биоткани, ограничивая, таким образом, доступ минеральных (кальциевых и форфатных) соединений, а при малейшем нарушении этого "экрана" процесс минерализации развивается. Кроме того, отсутствие ферментативной обработки не обеспечивает снижения иммуногенности. Наиболее близким к заявляемому является способ подготовки биоткани для ксенопротезирования путем ферментативной обработки террилитином в фосфатном буферном растворе (из расчета 30 протолитических единиц на 1 г веса влажной ткани ПЕ/г) в течение 4 ч при 43oС, последовательной отмывки в кислотном растворе (20 г лимонной кислоты, 100 г хлорида натрия и 1 л воды), в 1 М растворе гидрокарбоната натрия и растворах хлорида натрия, выдержки в многократно заменяемом растворе глутарового альдегида в буферном растворе с возрастающей концентрацией и стерилизации (Авт. св. СССР 1398855, МКИ 6 А 61 F 2/24, 1988). Недостатками данного способа являются высокая концентрация фермента, вызывающая разрушение коллагеноэластической основы биоткани, высокая температура ферментативной обработки, что может привести к снижению активности фермента, а также использование фосфатного буферного раствора в качестве растворителя фермента и лимонной кислоты для создания кислой среды при отмывке, что приводит к образованию нерастворимых фосфатов и цитратов и дальнейшей минерализации биоткани. Предлагаемый способ устраняет указанные недостатки. Целью данного технического решения является уменьшение расхода фермента и предотвращение минерализации биоткани. Сущность способа состоит в том, что биоткань для ксенопротезирования перед ферментативной обработкой выдерживают в течение 15-72 ч в гипертоническом растворе хлорида натрия 1-10%-ной концентрации, обрабатывают ферментом в боратном буферном растворе при 32-37oС, отмывают сначала в 0.6-6%-ном растворе уксусной кислоты, затем в растворе гидрокарбоната натрия и растворах хлорида натрия, выдерживают в многократно заменяемом растворе глутарового альдегида в буферном растворе с возрастающей концентрацией и стерилизуют. Отличие заявляемого способа состоит в том, что перед ферментативной обработкой биоткань в течение 15-72 ч выдерживают в гипертоническом растворе хлорида натрия 1-10%-ной концентрации, ферментативную обработку проводят при 32-37oС в боратном буферном растворе, а при отмывке в качестве кислотного раствора используют 0,6-6%-ный раствор уксусной кислоты. Ферментативная обработка биоткани необходима для разрушения клеточных элементов (иммуногенных компонентов). Отмывка после ферментативной обработки биоткани в кислотном растворе инактивирует проникающий в биоткань фермент и предотвращает ее дальнейшее разрушение. Раствор гидрокарбоната натрия нейтрализует оставшуюся после инактивации кислоту, а солевые растворы хлорида натрия вымывают продукты протеолиза после ферментативной обработки. Помещение биоткани в раствор глутарового альдегида необходимо для дубления биоткани для ее структурной стабилизации и увеличения иммуногенности. Последовательное увеличение концентрации альдегида позволяет провести дубление сначала в более мягких условиях и дать возможность проникнуть во внутренние слои биоткани, образуя внутренние сшивки, а затем закрепить эффект, увеличив число сшивок в поверхностных слоях. Выдерживание биоткани перед ферментативной обработкой в растворе хлорида натрия сохраняет структуру биоткани и ускоряет разрушение иммуногенных клеточных элементов, что позволяет понизить концентрацию фермента в 1,5-3 раза по сравнению с прототипом, сократив, таким образом, его расход. Выбор концентрации солевого раствора предварительной обработки обусловлен тем, что растворы с концентрацией, близкой к изотонической (0,85-1%), практически не влияют на состояние волокон и клеточных элементов биоткани, в гипотонических растворах (менее 0,85%) происходит набухание биоткани, что нарушает ее структуру. Превышение 10%-ной концентрации растворов хлорида натрия может вызвать разрушение структуры коллагеновых волокон. Выдержка биоткани в гипертоническом растворе менее 15 ч не обеспечивает необходимого эффекта, солевая обработка более 72 ч не имеет смысла, так как за это время процесс разрушения иммуногенных клеточных элементов полностью завершен. Проведение ферментативной обработки выше 37oС может привести к разрушению коллагеноэластической структуры биоткани, уменьшение температуры ниже 32oС не гарантирует сохранность биоткани. Замена фосфатного буферного раствора на боратный в качестве растворителя фермента, так же как и замена лимонной кислоты на уксусную при постферментативной обработке биоткани, позволяет избежать образования нерастворимых соединений кальция. Концентрация раствора уксусной кислоты менее 0,6% полностью не инактивирует фермент, более 6% разрушает биоткань. Способ подготовки биоткани для ксенопротезирования осуществляется следующим образом. Образец биоткани помещают в банку с раствором хлорида натрия 1-10%-ной концентрации из расчета 10 мл раствора на 1 г биоткани, закрывают крышкой и оставляют на 15-72 ч. После чего образец вынимают, промывают проточной водой и помещают в раствор фермента террилитина на боратном буфере (из расчета 3 мл боратного буфера и 10-20 ПЕ на 1 г влажной биоткани) и выдерживают при 32-37oС в течение 4 ч. По истечении указанного времени биоткань извлекают из раствора, промывают проточной водой и погружают на 20 м в кислотный раствор (6-60 г уксусной кислоты, 100 г хлорида натрия и 894-840 г воды). После кислотной отмывки образец промывают проточной водой и переносят сначала на 20 мин в 0,1 М раствор гидрокарбоната натрия, а затем, после промывки проточной водой, последовательно помещают в 2 и 7%-ные растворы хлорида натрия на 17 и 6 ч соответственно. Количественное соотношение масс образца биоткани и растворов для постферментативной отмывки составляет не менее 1:10. После извлечения образца биоткани из солевого раствора и промывки в проточной воде биоткань выдерживают в многократно заменяемых растворах глутарового альдегида с увеличивающейся концентрацией и стерилизуют. Примеры конкретного выполнения способа даны в таблице. Применение заявляемого способа позволяет сократить расход дорогостоящих реактивов и уменьшить вероятность минерализации биоткани.ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯСпособ подготовки биоткани для ксенопротезирования путем обработки биоткани ферментом в буферном растворе, последовательной отмывки в кислотном растворе, в растворе гидрокарбоната натрия и растворах хлорида натрия, выдержки в многократно заменяемых растворах глутарового альдегида с возрастающей концентрацией и стерилизации, отличающийся тем, что перед ферментативной обработкой биоткань в течение 15-72 ч выдерживают в гипертоническом растворе хлорида натрия 1-10%-ной концентрации, ферментативную обработку проводят при 32-37oС в боратном буферном растворе, а при отмывке в качестве кислотного раствора используют 0,6-6%-ный раствор уксусной кислоты.Популярные патенты: 2464769 Машина для прессования тюков с вязальным устройством ... машины для прессования тюков с вязальным устройством, которое снижает риск ошибок при связывании. В соответствии с изобретением решение поставленной задачи достигается за счет того, что в машине для прессования тюков, содержащей прессовальный канал для формирования в нем тюка, расположенное на прессовальном канале вязальное устройство для связывания двух концевых участков наложенного вокруг тюка вязального шпагата, на пути вязального шпагата между вязальным устройством и тюком расположено внутреннее удерживающее устройство для вязального шпагата. Это внутреннее удерживающее устройство для вязального шпагата служит для того, чтобы удерживать связываемый концевой участок вязального ... 2148319 Растительное средство для борьбы с пресноводными моллюсками ... исчезновение земноводных (лягушки, тритоны) 2-5 суток (100%-ную гибель через 2 часа)*. * В скобах дан соответствующий показатель для 5,41-дихлорсалициланилида. Препараты ели не действуют на растительность (5,41-дихлорсалициланилид вызывает ожог различной степени), распадаются в воде весной-летом в течение 4-7 суток, осенью - 6-10 суток (5,41-дихлорсалициланилид - 13-14 суток и 5 - 6,5 месяцев соответственно). Перед дезинвазией пастбищ и спущенных прудов препаратами ели не вносят органические и минеральные удобрения. На обработанных участках пастбищ до гибели моллюсков животных не выпасают. Дезинвазии предлагаемыми средствами подвергают пастбища и спущенные пруды. Обрабатывают ... 2048752 Дождевальная машина ... машина перемещается от сваи к свае на расстояние, которое равно длине машины. Таким порядком машина может перемещаться вперед и назад, не задевая посевы. Следует иметь в виду, что водопровод 1 никогда нельзя оставлять без воды 29, т.к. без этого балласта баллоны с гелием могут унести машину на недосягаемую высоту. Дождевальная машина, поднятая не высоту, обеспечивает долголетнюю эксплуатацию ее. Значительно снижается трудоемкость полевых работ. Достигается высокая урожайность за счет своевременного полива в научно определяемые сроки. Максимальное использование посевных площадей за счет полной ликвидации каналов для воды и борозд. Ликвидируются причины прорастания сорняков. ... 2039429 Линия производства молочных продуктов ... процессом заполнения. Для производства творога и творожных изделий участок снабжен аппаратами 16. Жидкие молочные продукты разливают в тару (посуда стеклянные бутылочки) с помощью разливочного устройства 17, которое крепится на столе 18. Для укупорки линия имеет укупорочное устройство 19. Аппараты 16 для производства творога и творожных изделий имеют ванны 20 для самопрессования, откуда творог по-дают в дозировочно-фасовочное устройство 21 через его бункер 22, имеющий шнек с приводом 28. Выдача творога осуществляется поворотом рычага 24. Хранение готовой продукции осуществляется в холодильной камере 25. Перемещение продукции осуществляется тележкой 26. Выдача готовой продукции ... 2218756 Способ изготовления антипаразитарного ошейника ... стадии формирования изделия, обеспечивая смачивание каждой гранулы термопластичного полимера жидкими компонентами с захватом низкомолекулярных твердых частиц с последующим превращением в гранулят, равномерному распределению инсектицида - диазинона по объему и поверхности ленты, снижению температуры переработки, коррозии оборудования, выделению токсичных веществ, созданию более мягкой эластичной ленты, не вызывающей раздражение кожи животных, увеличению срока годности ошейника. Источники информации 1. Рекламное описание "Ошейник против наружных паразитов" фирмы "Беафар" (Голландия). 2. Патент ЕР 0178908 А2, 23.04.1986. 3. Временное наставление по применению ошейника ... |
Еще из этого раздела: 2421109 Способ роспуска закристаллизовавшегося меда и устройство для его осуществления 2420940 Энергосберегающий способ обеззараживания семян люпина от антракноза 2054429 Способ получения антисептика для защиты древесины 2263431 Устройство для предпосевной обработки семян 2262220 Способ возделывания кормовых культур в условиях астраханской области (варианты) 2260930 Способ внесения органических удобрений 2438305 Способ выращивания цыплят-бройлеров 2281637 Способ производства зеленого корма при возделывании в орошаемом земледелии и устройство для его осуществления 2012206 Инсектицидная композиция для борьбы с тараканами 2496298 Узел крепления пальцев подборщика |
Изобретения в сельском хозяйстве
Обработка почвы в сельском и лесном хозяйствах
Посадка, посев, удобрение
Уборка урожая, жатва
Обработка и хранение продуктов полеводства и садоводства
Садоводство, разведение овощей, цветов, риса, фруктов, винограда, лесное хозяйство
Новые виды растений или способы их выращивания
Производство молочных продуктов
Животноводство, разведение и содержание птицы, рыбы, насекомых, рыбоводство, рыболовство
Поимка, отлов или отпугивание животных
Консервирование туш животных, или растений или их частей
Биоцидная, репеллентная, аттрактантная или регулирующая рост растений активность химических соединений или препаратов
Хлебопекарные печи, машины и прочее оборудование для хлебопечения
Машины или оборудование для приготовления или обработки теста
Обработка муки или теста для выпечки, способы выпечки, мучные изделия
|
|
||