Способ лечения и профилактики заболеваний рыб

Международная патентная классификация:       A01K A61K

Патент на изобретение №:      2186576

Автор:      Борисова М.Н., Новоскольцева Т.М., Иренков И.П., Белявская В.А., Ильичев А.А.

Патентообладатель:      Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор"

Дата публикации:      27 Марта, 2000

Начало действия патента:      18 Мая, 1998

Адрес для переписки:      633159, Новосибирская обл., Новосибирский р-н, пгт. Кольцово, ГНЦВБ "Вектор", патентный отдел, Ю.Н.Мистюрину

Изображения

Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарии. Предложен высокоэффективный способ лечения и профилактики заболеваний у рыб с использованием пробиотического препарата нового поколения субалина (ветосубалина). На тонну корма для рыб добавляют не менее 100 доз (700 млрд живых бактерий Bacillus subtilis ВКПМ В-4759 в споровой форме) пробиотика субалина (ветосубалина) и скармливают ежедневно в течение пяти дней. Способ позволяет улучшить кожный покров и состояние жаберного аппарата рыб, стабилизировать функции кишечника и восстановить естественный баланс между нормальной и потенциально патогенной микрофлорой кишечника. 2 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарии и может быть использовано в рыбоводстве для лечения и профилактики заболеваний рыб, в частности таких, как аэромоноз.

Аэромонады - возбудители бактериальной гемораггической септицемии у рыб, которые могут вызывать гемораггии у теплокровных, в том числе у человека. Иногда при вспышке аэромоноза выделяются вирулентные штаммы, вызывающие 100%-ю гибель рыбы в течение первых суток. Известно также, что вспышкам заболеваемости способствует снижение иммунитета, вызванное стрессовыми экологическими факторами.

Для лечения и профилактики этих заболеваний наиболее широко используются антибиотики левомицетин, биомицин, окситетрациклин, фуразолидон, а также комбикорма с кормогризином, биомицином, фуразолидоном. Общераспространенным является применение препаратов нитрофуранов. Курс лечения антибиотиками составляет не менее 10 дней и часто приводит к иммунодепрессивным состояниям у рыб, ухудшению эпизоотической ситуации, а также ухудшению потребительских качеств промысловой рыбы из-за наличия в ней антибиотиков [1].

Альтернативой применению антибиотиков является использование пробиотических препаратов из живых бактерий, обладающих антагонистическим действием в отношении возбудителей заболевания [2].

Наиболее близким к заявляемому способу является способ лечения и профилактики заболеваний рыб, заключающийся в скармливании рыбам лечебного корма, содержащего пробиотический препарат азогидин на основе Azomonas agilis и Lactobacterium acidophilus. Применение этого препарата позволило получить положительный результат на лососевом рыбозаводе и в тепловодном прудовом хозяйстве [3, прототип].

Однако недостатком способа-прототипа является ограниченность применения, так как бактерии, входящие в состав азогилина, осуществляют свою жизнедеятельность, проявляя антибактериальную активность лишь в тепловодных условиях, что ограничивает сферу его применения. Кроме того, препарат не обладает выраженными антивирусными и иммуномодулирующими свойствами.

Технической задачей изобретения является разработка способа лечения и профилактики заболеваний у рыб, позволяющего расширить сферу применения.

Поставленная задача решается путем использования для лечения и профилактики заболеваний у рыб пробиотика субалина.

Субалин (ветосубалин) является препаратом нового поколения, полученным генно-инженерными методами для целенаправленного улучшения лечебно-профилактических свойств пробиотика [4]. Бактерии Bacillus subtilis ВКПМ В-4759, входящие в состав указанного пробиотического препарата, помимо природных антагонистических свойств в отношении патогенной микрофлоры, обладают способностью синтезировать интерферон-альфа, обладающий антивирусным и иммуномоделирующим действием [5]. Субалин показал высокую эффективность в животноводстве [6].

Основанием для использования субалина в рыбоводстве служат следующие данные: - бациллы могут осуществлять свою жизнедеятельность и при более низких температурах в организме пойкилотермных животных, к которым относят и рыб; - интерфероны, хотя и являются видоспецифическими белками, однако частичная гомология позволяет проявлять, хотя и пониженную, специфическую активность у эволюционно далеко отстоящих видов животных.

Предлагаемый способ лечения и профилактики заболеваемости среди рыб, в частности аэромонозом, заключается в использовании лечебных кормов с добавлением субалина в количестве не менее 100 доз (700 млрд живых бактерий Bacillus subtilis ВКПМ В-4759 в споровой форме) на 1 тонну корма из расчета 5% лечебного корма к массе рыб. Корм дается ежедневно в течение не менее чем 5 дней.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Подавление субалином роста бактерий-возбудителей аэромонозов рыб при совместном культивировании in vitro.

Поскольку антагонистические свойства сенной палочки (Bacillus subtilis) проявляются на необогащенной питательной среде, испытания проводят на пептонной воде. В пробирки с пептонной водой вносят субалин по 0,04 дозы до конечной концентрации спор 0,008 дозы. После суточного культивирования отмечается помутнение пептонной воды. Во все 8 пробирок вносят взвеси культур аэромонад, патогенных для рыб штаммов, выращенных в течение суток на мясопептонном агаре и смытых физиологическим раствором, и разведенных до концентрации 1 млн кл./мл (всего около 100 тыс.кл.). Для контроля культуры аэромонад высевают в пептонную воду без субалина. Культивирование проводят при 20oС, при этом ежесуточно проводят высевы на чашки со средой Эндо для подсчета жизнеспособных аэромонад. Результаты представлены в табл.1.

Результаты, представленные в табл.1, свидетельствуют о том, что бактерии субалина в дозе 0,008/мл активно подавляют рост аэромонад - возбудителей аэромоноза.

Пример 2. Профилактическое действие субалина при экспериментальном заражении рыб в аквариальных условиях.

Материалом для исследования служат сеголетки карпа средней штучной массой 22 грамма, доставленные в аквариальную лабораторную установку из ТХР "Шатурское". Рыб содержат в непроточных аквариумах (при работающих аэраторах) с температурой воды 19-20oC; кормят стандартным рационом. После адаптации (в течение 14 дней) рыб делят на 4 группы: три опытных и одну контрольную, по 20 особей в каждой группе. В опытных группах испытывают действие субалина в различных дозировках. Рыбы контрольной группы препарат не получают. Лечебный корм с субалином готовят перед употреблением следующим образом: ингредиенты корма увлажняют теплой кипяченой водой, тщательно перемешивают и добавляют по каплям водный раствор субалина в разведении 1:5. После перемешивания влажную мешанку скармливают карпам, находившимся в аквариумах. Норму суточного кормления определяют из расчета 5% корма к массе рыб. Карпов кормят лечебным кормом два дня подряд, затем переходят на обычный рацион. Спустя сутки после двукратного скармливания субалина в смеси с кормом, сеголетков карпа подвергают внутрибрюшинному заражению двухсуточной бульонной культурой A. hidrophila в дозе 0,2 мл на 1 рыбу, что соответствует 0,2 млрд микробных клеток. За подопытными рыбами наблюдают в течение 12 дней. Учитывают поведенческие реакции рыб, клинические признаки болезни. По окончании опыта проводят анатомическое вскрытие рыб. Поедаемость кормов с добавкой субалина была удовлетворительной; через 5 часов лечебный корм съедался рыбами полностью и не было замечено каких-либо отклонений в поведении рыб или нарушений физиологического статуса.

В контрольной группе первый случай гибели карпов констатировали на третьи сутки после заражения. В двух опытных группах первые случаи гибели рыб отмечены на 4-5 день после заражения аэромонадами. У больных рыб (контрольная группа) отмечали экзофтальмию, общее и локальное ерошение чешуи, выпячивание ануса, асцит, точечные кровоизлияния на поверхности тела и у основания грудных плавников. В опытных группах признаки болезни были выражены менее отчетливо. В третьей опытной группе, где рыбы получали наиболее высокую дозу субалина, гибель карпов отмечена на 9-10 день после заражения. Результаты опытов представлены в табл.2.

Пример 3. Лечебный эффект субалина при аэромонозе рыб.

Эксперименты проводили в нагульных прудах Бисеровского рыбокомбината во время вспышки аэромоноза. Перед производственными испытаниями был проведен клинический осмотр и ихтиопатологическое исследование 100 экземпляров карпа из нагульного пруда. У всех осмотренных рыб отмечена сухость кожного покрова (у зеркальных и чешуйчатых карпов), анемия жабр, гиперемия брюшка, точечные и пятнистые кровоизлияния, единичные язвы на поверхности тела (более чем у 60% осмотренных рыб), воспаления ануса (20% рыб). При анатомическом вскрытии отмечены анемия печени, увеличение объема и дряблость почек, на слизистой кишечника у всех подвергнутых вскрытию рыб очаги точечных и пятнистых кровоизлияний (передний и средний отделы), признаки воспаления плавательного пузыря (у 41% рыб), гиперемия магистральных сосудов внутренних органов (печени, почек, наружных капилляров кишечника). На основании клинического осмотра и анализа результатов анатомического вскрытия был поставлен диагноз: аэромоноз карпов.

При лечении субалином препарат добавляли в корм, который готовили перед кормлением. Для разового кормления субалин в количестве 200 доз (700 млрд спор) добавляли к 1 тонне корма, предварительно растворив препарат в воде. Кормление лечебным кормом проводили в течение 5 дней из расчета 5% лечебного корма к массе рыб. Температура воды колебалась от 20o до 12,5oС, содержание кислорода составляло от 2,5 до 3,0 мг/мл. На 12-е сутки после окончания лечебного курса проведен контрольный отлов рыбы. Наружным осмотром пролеченной субалином рыбы было установлено, что у всех особей поверхность тела равномерно покрыта блестящей, прозрачной слизью; жабры темно-вишневого цвета, соответствуют физиологической норме: количество рыб с внешними поражениями (язвы, покрытые эпителиальной тканью, гиперемия брюшка, выраженный сосудистый рисунок плавников) не превышает 1%. При применении субалина достигнуто заживление язв, ослизнение кожного покрова, улучшение состояния жаберного аппарата; стабилизация функций кишечника и улучшения его ферментативной активности; восстановление естественного баланса между нормальной и потенциально патогенной микрофлорой кишечника.

Таким образом, предложен высокоэффективный способ лечения и профилактики заболевания рыб с использованием пробиотического препарата субалина.

ЛИТЕРАТУРА 1. Навашин С.М. Некоторые экологические аспекты современной химиотерапии: Материалы Всес. семинара "Колонизацион. резистентность и химиотерапевтические антибактериальные препараты". Москва, 28-29 июня 1988 г. - М., 1988.

2. Смирнов В.В., Резник С.Р., Сорокулова И.Б. и др. Современные представления о механизмах лечебно-профилактического действия пробиотиков и бактерий рода Bacillus// Микробиол. журн. - 1993. - 55, 4. - С. 92-112.

3. Карасева Т. А. Эффективность применения биостимуляторов и бактериальных препаратов для борьбы с болезнями заводской молоди семги: Сб. научн. трудов "Заполярная марикультура". Мурманск, 1994 г.

4. Сорокулова И.Б., Белявская В.А., Масычева В.И., Смирнов В.В. Рекомбинантные пробиотики: проблемы и перспективы использования для медицины и ветеринарии// Вестник РАМН, 1997, 3, с. 46-49.

5. Патент РФ 1839459, кл. 5 C 12 N 1/21, 1994 г.

6. Патент РФ 2035185, кл. 5 А 61 К 35/66, 1995 г.

Формула изобретения

Способ лечения и профилактики заболеваний рыб, заключающийся в скармливании рыбам лечебного корма, содержащего пробиотический препарат, отличающийся тем, что в качестве пробиотика используют субалин (ветосубалин) из расчета не менее 100 доз (700 млрд живых бактерий Bacillus subtilis ВКПМ В-4759 в споровой форме) на тонну корма в течение пяти дней.

MM4A - Досрочное прекращение действия патента СССР или патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 19.05.2006

Извещение опубликовано: 10.05.2007 БИ: 13/2007

Популярные патенты:

2464784 Защитный слой для растений и деревьев, его изготовление и его применение

... на поверхности листа посредством золь-гель процесса, предпочтительно является вода (H2O).Матрица SiO 2 защитного слоя по данному изобретению может более того преимущественно, благодаря своему Si2+ заряду, иметь противомикробное действие посредством процессов ионного обмена. Для функционализации с одной стороны добавляют алифатические и ароматические альдегиды, карбоновые кислоты или аминокарбоновые кислоты в золь из тетраэтоксисилана, триметоксиметилсилана или диметоксидиметилсилана. Альтернативно посредством измененных заместителей на предшественнике (R'Si(OC2H 5)3), органически модифицируют сетку SiO 2. Также для этого применяется синтез различных алкилтриэтоксисиланов ...

2475020 Способ подбора лучших сортов опылителей для насаждений яблони

... яблони, пыльца которых содержит водорастворимых веществ свыше 50% от своей сухой массы. Способ позволяет ускорить и упростить достоверный подбор совместимых комбинаций сортов яблони при перекрестном опылении. 1 з.п. ф-лы, 9 ил., 4 табл., 2 пр. Способ подбора сортов (форм) (далее в тексте используем термин «сорт», который принимается как синоним словосочетания «селекционная форма») опылителей для насаждений яблони относится к сельскому хозяйству, а именно к садоводству, и может быть использован при селекции сортов яблони.Цель изобретения заключается в повышении достоверности, упрощении, ускорении и сокращении селекционного процесса подбора новых форм и ...

2019938 Рабочий орган почвообрабатывающей машины

... тем, что режущая кромка ножа направлена по имеющей постоянный угол подъема винтовой линии, расположенной на конической поверхности с вершиной конуса, обращенной вверх, при этом нижний конец указанной режущей кромки смещен вперед относительно ее верхнего конца по направлению вращения рабочего органа, а задний угол резания ножа имеет величину, большую 15o, но меньшую ...

2270545 Посевной комбинированный агрегат

... отношения где d1 - диаметр катка с деформаторами почвы; d2 - диаметр катка с ребрами;h - глубина формируемой деформаторами ложбины(RU, патент №2226324. С1. МПК7 А 01 В 49/06. Посевной комбинированный агрегат / С.А.Корпушов, В.И.Петров, А.М.Салдаев, А.Г.Терюков (RU). - Заявка №2002123087/12; Заявлено 28.08.2002; Опубл. 10.04.2004, Бюл. №10 // Изобретения. Полезные модели. - 2004. - №10). К недостаткам описанного комбинированного агрегата, принятого нами в качестве наиближайшего аналога, относятся ограниченные функциональные возможности при создании естественных травосмесей и кормовых угодий.Сущность заявленного изобретения заключается в следующем.Задача, на решение которой ...

2403705 Способ автоматического управления температурно-световым режимом в теплице

... в теплице / Ф.Я.Изаков, С.А.Попова. Е.В.Стрельникова и Л.В.Гребенкина (СССР). - 3738938/30-15; Заявлено 20.01.1984; Опубл. 23.11.1988, Бюл. 43], выбранный за прототип, в котором для повышения эффективности весь период выращивания растений делится на равные промежутки времени и для каждого вычисляется оптимальная из условия равенства нулю производной от экономического критерия температура. В соответствии с этой температурой изменяется уставка задатчика температуры. Рассмотренный способ имеет ряд недостатков. Во-первых, до сих пор отсутствуют математические модели урожая как конечного продукта процесса вегетации растений, а значит этот способ трудно реализуем. Во-вторых, цены на ...

Еще из этого раздела:

2160533 Способ профилактики и коррекции транспортного стресса у крупного рогатого скота

2060651 Бытовой инкубатор

2084132 Устройство для выращивания растений

2384988 Способ и устройство для управления сельскохозяйственной машиной

2201065 Приемная часть осевого сепаратора

2095957 Устройство для транспортирования подстилочного навоза

2492640 Способ выращивания рыбы в мелководных заморных озерах с применением глубокого водоема-спутника

2278503 Способ управления формированием качества виноградного вина

2142331 Устройство для гомогенизации и гомогенизирующая головка

2076603 Способ повышения урожайности сельскохозяйственных культур

Изобретения в сфере сельского хозяйства, животноводства, рыболовства

Способ лечения и профилактики заболеваний рыб

Изображения

Формула изобретения