Штамм бактерий pseudomonas species для получения препарата, используемого для стимуляции роста и защиты растений от фитопатогенных микроорганизмовПатент на изобретение №: 2130261 Автор: Дашкевич В.С., Дашкевич Н.Ю., Ашмарина Л.Ф., Репин В.Е. Патентообладатель: Дашкевич Вера Степановна Дата публикации: 20 Мая, 1999 Адрес для переписки: 630090, Новосибирск, пр-т акад.Лаврентьева, 10, ИЦ и Г СО РАН, Патентный отдел Изображения  Изобретение относится к биотехнологии, микробиологии и сельскому хозяйству. Штамм Pseudomonas species 17-2 выделен из ризосферы диких злаков, растущих в Ордынской лесостепи Новосибирской области. Депонирован в НИИ ККМ ГНЦ ВБ "Вектор" под N В-696. Для получения препарата штамм выращивают на среде LВ, содержащей, г/л: пептон 10,0, дрожжевой экстракт 5,0, натрий хлористый 10,0, воду дo 1 л, в течение 16-18 ч при 28-31oС до концентрации 5  1010 кл/мл и полученную суспензию используют для обработки семян растений. Препарат, полученный на основе данного штамма, позволяет стимулировать рост растений и подавляет рост фитопатогенных грибов рода Alternaria, Bepolaris, Fusarium. 2 табл.
Изобретение относится к биотехнологии и касается нового штамма Pseudomonas specias, который может быть использован для получения бактериального препарата для защиты растений от фитопатогенных микроорганизмов или для стимуляции роста растений. Известен штамм Pseudomonas specias АР33, подавляющий развитие возбудителей сосудистого и слизистого бактериозов капусты. (Патент РФ N 17993878, кл. A 01 N 63/00, 1993). Семена капусты обрабатывают суспензией штамма бактерий Pseudomonas sp. (ВКПМ В-3481) в концентрации 106-109 кл/мл и высевают в теплицу. Перед высадкой в поле корневую систему саженцев капусты вновь обрабатывают бактериальной суспензией данного штамма, а затем проводят обработку в фазе кочанообразования. Недостатком известного штамма является узкий спектр его действия и большой расход суспензии, идущей на обработку капусты. Известен штамм Pseudomonas aureofaciens 35, оказывающий антагонистическое действие на фитопатогенные бактерии (Патент РФ N 1482188 C кл. C 12 N 1/20, 1994), однако спектр его антагонистического действия на фитопатогенные микроорганизмы узок, так как он способен подавлять рост, в основном, фитопатогенных агробактерий, вызывающих бактериальный рак винограда и других растений. Наиболее ближайшим к заявляемому штамму - прототипом, является штамм Pseudonomas aureofaciens H16, используемый для стимуляции роста растений (Патент РФ N 2001950 C, кл. C 12 N 1/20, 1993). Известный штамм выделен из ризоплана корневищ пырея ползучего, депонирован ВКМ при ИБФМ РАН под N В-1973Д. Для получения препарата штамм выращивают на среде Альбит-1, содержащей отвар из проростков растений, спиртовый экстракт проростков семян, хлористый натрий, гидролизат казеина и воду, в течение 24-30 часов при 28-30oC с аэрацией до титра 2-4 109 кл/мл. Полученную суспензию используют для обработки семян. Недостатком известного штамма является то, что он, обладая способностью стимулировать рост растений, не защищает их от различных фитопатогенов, обладает низкой продуктивностью и требователен к питательным средам. Технической задачей изобретения является выделение природного штамма бактерий с широким спектром антагонистического действия на фитопатогенные грибы, и способностью стимулировать рост и развитие растений. Поставленная задача достигается выявлением и использованием нового штамма Pseudomonas species 17-2, выделенного из ризосферы диких злаков, произрастающих на черноземных почвах в Ордынской лесостепи Новосибирской области. Выделенный штамм депонирован в НИИ "Коллекция культур микроорганизмов" ГНЦ ВБ "Вектор" под регистрационным N В-696. Штамм Pseudomonas species 17-2 характеризуется следующими признаками, Морфологические признаки. Грамотрицательные подвижные палочки с полярными жгутиками, размером 0,5-0,6 х 1,6-2,7 мкм, спор не образуют. Морфология колоний, образующихся при культивировании при 28oC в течение 2-3 суток. На мясопептонном агаре (МПА) - круглые, гладкие, слабовыпуклые, прозрачные с матовым оттенком, диаметр 3-5 мм; на МПА с LB бульоном или с 2%-ным глицерином колонии прозрачные с беловатым оттенком, слабовыпуклые, гладкие, мелкие. Пигмент с LB бульоном яркозеленый. Пигментация на диагностических средах Кинга для флурресцирующих псевдомонад (King Е.О. at all. J. Lab. Clin. Med., 1854, v. 44, p. 301). Кинг A - пигмент отсутствует. Кинг Б - пигмент зеленый. Физиолого-биохимические свойства. Аэроб использует глюкозу только по окислительному пути. В факторах роста не нуждается. Крахмал и целлюлозу не гидролизует. Индол и сероводород не образует. Каталазу образует. Хорошо растет при pH среды от 6,5 до 8,0 и при температуре от 4oC до 37oC; при 41oC - не растет; оптимальная температура роста 28-31oC. Усваивает с образованием кислоты глюкозу, маннит и глицерин. Не усваивает сахарозу, рафинозу, сорбит, дульцит, инулин. Хорошо усваивает пептон, аланин, аргинин, слабо - аспарагин, тирозин, мочевину. Новый штамм устойчив к антибиотикам: ампицилину (200 мкГ/мл), хлорамфениколу (20 мкГ/мл), новобиоцину (50 мкГ/мл), чувствителен к тетрациклину (10 мкГ/мл), канамицину (100 мкГ/мл). Новый штамм не фитотоксичен, о чем свидетельствует отсутствие мацерации на ломтиках картофеля и некротических пятен на листьях табака при нанесении на них уколом суспензии живых клеток штамма. Штамм не патогенен для лабораторных животных: при внутрибрюшинном введении двадцати белым мышам весом 14-16 г по 0,5 мл 1 млрд. взвеси 16 часовой культуры штамма Pseudomonas species 17-2 в течение 30 дней гибели животных не наблюдалось. Штамм хранят в лиофильно высушенном состоянии не менее одного года. Штамм идентифицирован: 1) по первоисточнику: H.Stolp, D.Gadkari in "The Prokaryotes", Berlinea, 1981, V.1, ch.61, p.719-741. 2) по определителю: Kried N.R. at all. "Bergey's mannual of Systematic Bacteriology", Baltimore-London, 1984. Для культивирования Pseudomonad species 17-2 (KKM В-696) применяют среду LB следующего состава (г/л): пептон - 10,0, дрожжевой экстракт - 5,0, натрий хлористый - 10,0, вода до 1 литра. Культивирование проводят 28-31oC при аэрации в течение 16-18 часов до концентрации 51010 кл/мл, затем разводят водой до необходимого титра. Определяющим отличием предлагаемого штамма от прототипа является то, что он не только стимулирует рост растений, но и подавляет рост фитопатогенных микроорганизмов. Кроме этого, заявляемый штамм обладает более высокой продуктивностью и не требователен к питательным средам. Свойства нового штамма иллюстрируются следующими примерами. Пример 1. Штамм выращивают в течение 16 часов при 30oC с аэрацией до титра 51010 кл/мл на среде LB, затем разводят водой до необходимой концентрации. Полученной суспензией обрабатывают семена растений перед посевом. Пример 2. Методом агаровых блочков изучили действие нового штамма на фитопатогенные грибы. Культуру бактерий Pseudomonas species 17-2 высевали сплошным "газоном" на поверхность питательного агара (МПА с 2% глицерина или среда Кинга Б) и выращивали в течение 2-3 суток при 28oC. Затем вырезали диски (агаровые блочки) и переносили на поверхность сплошного "газона" тест-культуры фитопатогенного гриба на среде Чапека или на картофельном агаре (суспензию гриба высевали глубинным способом из расчета около 100 спор на 1 мл среды) чашки со сплошным "газоном" тест-культуры с нанесенными на него агаровыми блочками, засеянными культурой нового штамма, помещали в термостат при 28-30oC и инкубировали 2-3 суток. Учет проводили по зонам отсутствия или подавления роста тест-культуры вокруг диска с культурой нового штамма. Результаты представлены в таблице 1 (см, в конце описания) и свидетельствуют о том, что новый штамм Pseudomonas sp. 17-2 имеет широкий спектр антагонистического действия на фитопатогенные грибы. Пример 3. В производственных условиях ОПХ Института земледелия и химизации сельского хозяйства РАСХ изучили влияние препарата на основе суспензии клеток нового штамма Pseudomonas sp. 17-2 на способность стимулировать рост растений пшеницы (сорт Новосибирская 89), кукурузы (гибрид Молдавский-23) и сои (сорт СибНИИК-315). Для этого провели предпосевную обработку семян вышеназванных растений из расчета 50 мл суспензии клеток предлагаемого штамма (титр клеток 11010 кл/мл) на 1000 кг семян. Контрольные семена растений обрабатывали водой. Обработанные семена высевают в открытый грунт на делянки размером 1 м2 (опыт). Параллельно высевают семена пшеницы, кукурузы и сои, обработанные водой (контроль). В контроле и опыте по 3 делянки на каждую культуру. Стимулирующий эффект препарата оценивают по дню появления всходов после высева семян растений. Результаты представлены в таблице 2 (см. в конце описания). Из таблицы 2 видно, что предлагаемый штамм в составе биопрепарата обладает способностью стимулировать рост растений. Таким образом, новый штамм Pseudomonas sp. 17-2, обладает антагонистической активностью в отношении широкого спектра фитопатогенных микроорганизмов, обладает способностью стимулировать рост растений и может использоваться в составе биопрепаратов для повышения урожая с/х растений.
Формула изобретенияШтамм бактерий Pseudomonas species НИИ ККМ ГНЦ ВБ "Вектор" В-696 для получения препарата, используемого для стимуляции роста и защиты растений от фитопатагенных микроорганизмов.Популярные патенты: 2051971 Способ определения биологической активности -эндотоксинов различных патотипов bacileus thuringiensis ... > -эндотоксинов так, как описано в примере 1. В качестве тест-объекта используют клетки M. flavus, предварительно не росшие в присутствии ЭДТА и ПЭГ-600. Получают значения антибактериальной активности меньшие, чем при выполнении приведенных условий определения. П р и м е р 7. Растворение всех кристаллов подвидов B.thuringiensis, используемых в работе, в 0,005 н.NaOH не приводит к достаточному полному выходу -эндотоксинов различных патотипов bacileus thuringiensis, патент № 2051971" SRC="/images/patents/421/2051145/948.gif" > -эндотоксинов, поэтому проведение всех остальных операций, описанных в примере 1, дало возможность получить значительно более слабые значения биологической ... 2160981 Способ создания плантаций солодки голой на обесструктуренных почвах в орошаемом земледелии ... покровное боронование и осуществляют борьбу с нежелательной и сорной растительностью. Плантации создают семенами солодки голой местного, степного или пойменного экотипа, наиболее близко расположенных к месту создания плантации. Солодка относится к галофитам и является многолетним растением. В условиях Нижнего Поволжья возраст солодки степного экотипа достигает 25 - 30 лет, а пойменного - старше 40 лет. Возраст материнских корней определен по годичным кольцам корневищ. В качестве однолетнего галофита используют амарант типа Багряный и др. Периоды посева семян солодки и амаранта совпадают. Глубина посева каждого из них - 1,5 - 2,0 см. Температура почвы в период посева не ниже +15oC. ... 2484613 Способ создания почвенно-растительного покрова при рекультивации нарушенных земель ... хорошим теплоизоляционным свойствам, а также снижает трудоемкость технических работ по рекультивации вследствие малого веса вермикулита. Субстрат является самостоятельным носителем ценных макро- и микроэлементов, что увеличивает долговременность травяного покрытия. Вспученный вермикулит является активным поглотителем (сорбентом) химических соединений, ионов тяжелых металлов и радионуклидов и образует вместе с отходами на сильно загрязненных участках грунта почвоподобный слой, благодаря которому растения созданного покрова могут расти и развиваться в течение длительного срока. Этот слой вермикулита защищает и посеянные семена, и выращенные из них растения от влияния этих ... 2197796 Рабочий орган ручного почвообрабатывающего орудия ... глубокие щели. Конструкция лезвия позволяет также работать как киркой и кетменем, глубоко разрыхляя тяжелую глинистую, труднообрабатываемую другими орудиями почву. Таким же образом можно рыхлить компост в компостных кучах, разбивать кучки навоза и компоста на грядках, и это делать удобней, чем традиционными граблями, можно прореживать густо посеянные морковь, петрушку, укроп, прорезая канавки в почве поперек рядков посевов. Рыхление почвы рабочим органом попеременно в горизонтальной, вертикальной и промежуточной плоскостях по воздействию на воздушно-тепловой режим почвы равносильно ее перекопке или перепашке с одновременным боронованием и пригодно как основная обработка (без ... 2488422 Сеть фильтров ... изобретению или фильтровальные системы согласно изобретению, состоящие из нескольких фильтров этого типа, могут использоваться в любых корпусах. Форма и размеры не имеют конкретных ограничений. Фильтры согласно изобретению вводят в корпус с такой точностью, чтобы между боковыми стенками корпуса и фильтрами не могла или почти не могла просачиваться загрязненная текучая среда. Подходящие корпуса фильтров имеются в продаже.Корпуса фильтров имеют вход, например, для грязной воды, например, из пруда, а также выход для очищенной воды. Обычно грязная пода подается подходящим насосом. По выбору, грязную воду можно облучать ультрафиолетовым светом с подходящей длиной волны перед входом в ... |
Еще из этого раздела: 2492650 Микроэмульсионная бактерицидная композиция 2228022 Способ ведения виноградных кустов 2142696 Способ выращивания цветочных и декоративных растений в тепличных и домашних условиях 2426302 Всепогодная теплица 2200377 Сельскохозяйственный агрегат 2152151 Гербицидная водорастворимая гранулированная композиция 2201910 Устройство для ферментационной обработки жидкого навоза 2084104 Ручная сеялка для разбросного посева семян травосмесей 2271095 Многофункциональное устройство 2272399 Зерноуборочный комбайн |
Изобретения в сельском хозяйстве
Обработка почвы в сельском и лесном хозяйствах
Посадка, посев, удобрение
Уборка урожая, жатва
Обработка и хранение продуктов полеводства и садоводства
Садоводство, разведение овощей, цветов, риса, фруктов, винограда, лесное хозяйство
Новые виды растений или способы их выращивания
Производство молочных продуктов
Животноводство, разведение и содержание птицы, рыбы, насекомых, рыбоводство, рыболовство
Поимка, отлов или отпугивание животных
Консервирование туш животных, или растений или их частей
Биоцидная, репеллентная, аттрактантная или регулирующая рост растений активность химических соединений или препаратов
Хлебопекарные печи, машины и прочее оборудование для хлебопечения
Машины или оборудование для приготовления или обработки теста
Обработка муки или теста для выпечки, способы выпечки, мучные изделия
|
|
||