Способ получения энтомопатогенного препарата диприн

Международная патентная классификация:       A01K

Патент на изобретение №:      2128911

Автор:      Тихонова Л.В., Бессонов А.С., Шестов А.Л., Писарев Б.А., Макаров П.П., Масюк Ю.А., Зейрук В.Н., Коноплев Г.К., Костина Л.Я., Вышинский Г.В., Гуманов Л.Л., Трофименков В.Н.

Патентообладатель:      Всероссийский научно-исследовательский институт гельминтологии им.К.И.Скрябина

Дата публикации:      20 Апреля, 1999

Адрес для переписки:      117218, Москва, ул.Б.Черемушинская, 28, Рябовой В.А.

Изображения

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к производству биологического агента для защиты растений и может быть использовано для борьбы с вредителями картофеля и других сельскохозяйственных культур. Способ получения биологического энтомопатогенного препарата включает воспроизводство насекомого-хозяина, заражение насекомых-хозяев нематодами, сбор и концентрирование инвазионных личинок нематод с последующим приготовлением биопрепарата. Инвазионных личинок нематод извлекают из погибших насекомых в жидкую питательную среду. Осуществляют дальнейшее размножение нематод, хранение, транспортировку и применение в плотной среде на основе торфа, который включает в качестве дополнительного питания для нематод сапропель, куриный помет, отходы трихограммного производства, биопрепарат агат и др. в различных соотношениях. Применение биологического препарата "Диприн" позволяет обеспечить истребление вредных насекомых, способствует повышению плодородия почвы и улучшения ее структуры, что в конечном итоге приведет к повышению урожайности картофеля и других сельскохозяйственных культур и получению экологически чистой сельскохозяйственной продукции. 4 табл. , ,

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к защите растений, и может быть использовано для борьбы с вредителями картофеля и других сельскохозяйственных культур.

Наиболее близким к заявляемому объекту техническим решением является способ получения энтомопатогенного биологического препарата, который включает заражение гусениц озимой совки (Agrotis segetum Schift) нематодой (Pristionchus uniformis), сбор погибших насекомых, отлов в воду мигрирующих инвазивных личинок, концентрирование нематодной суспензии, ее консервацию и хранение до применения.

Недостатками указанного способа являются низкая выживаемость инвазионных личинок в период хранения, снижение биологической активности препарата в процессе хранения, низкая эффективность перезимовавшего препарата в полевых условиях.

Целью изобретения является повышение выживаемости инвазионных личинок в период хранения, повышение вирулентности (ЛД50) и эффективности препарата.

Известный способ включает поточное круглогодичное разведение озимой совки, заражение гусениц, сбор погибших насекомых и культивирование в них нематод, сбор нематодной биомассы, концентрирование, стандартизация и хранение нематодной суспензии. В качестве садков для культивирования озимой совки используют вазоны для выращивания растений различного диаметра. Емкости устанавливают попарно одну над другой, стыкуя широкими отверстиями. В качестве корма для гусениц озимой совки используют морковь, пшеничные отруби, картофель и воду с добавлением витаминов - аскорбиновой и фолиевой кислот.

Гусениц выращивают до IV-V возраста и затем инвазируют нематодами из расчета 50-100 личиной на гусеницу. Гибель насекомых от заражения наступает на 2-3-и сутки. Заражение осуществляют в чашках Петри по 10-20 особей в каждой. Инокулюм наносят в водном растворе на фильтровальную бумагу, которой выстилают донышки чашек Петри, прежде чем поместить туда гусениц.

Погибших насекомых, инвазированных нематодами, раскладывают на платформы из перевернутых (меньшего размера) чашек Петри, обернутых фильтровальной бумагой, которые помещают в чашки большего диаметра с тонким слоем воды на дне. Воду с отловленными нематодами сливают ежедневно. На каждую платформу помещают 10-15 особей.

Суспензию нематод отстаивают в течение суток, сливают супернатант и добавляют формалин в количестве 0,01%, после чего хранят в течение 1 - 1,5 года в холодильнике при температуре 4-5oC.

Цель изобретения достигается тем, что для повышения потенциала размножения и повышения выхода мигрирующих личинок нематод их отлавливают не в воду, а в вытяжку из естественно опавших осенних листьев березы или других древесных пород (именуемых в дальнейшем искусственная питательная среда); концентрированную нематодную суспензию смешивают с инертным наполнителем (торф, почва гумусная) в концентрации 60-80% и питательными добавками (отходы трихограммного производства) - моли зерновой (Sitotroga cerealella Olig), огневки мельничной (Ephestia Kuchniella Voeg), озимой совки (Agrotis segetum Schift), помимо этого при предлагаемом способе в производство возвращаются погибшие бабочки озимой совки маточной и массовой культур, остающиеся от наработки гусениц, что делает производство биопрепарата более экономичным, куриный помет или другие отходы сельскохозяйственного производства в количестве 100 - 200 г/кг.

Указанные добавки в биопрепарат обеспечивают сохранение жизнеспособности, повышение потенциала размножения нематод в течение технологического процесса, наработки биопрепарата в производственных условиях, а также в период хранения, транспортировки, применения биопрепарата в полевых условиях и сохранения инвазионной активности биоматериала в естественных природных условиях в почве, в ризосфере растений, в пазухах листьев.

Применение получаемой таким образом формы биопрепарата путем внесения в почву поздней осенью или ранней весной освобождает почву от почвенных вредителей, а также внесение с нематодами инертных наполнителей (торф, гумусная почва) и питательных добавок (отходы трихограммного производства, куриный помет, сапропель и др.) усваиваются при этом растениями, улучшают структуру почвы и повышает ее плодородие, что приводит к дополнительному повышению урожая картофеля и других сельскохозяйственных культур.

Применение предлагаемой формы биопрепарата "Диприн" приводит к снижению количества применяемых ядохимикатов и минеральных удобрений, что обеспечивает получение экологически чистой сельскохозяйственной продукции и повышает ее качество. Помимо этого применение с целью защиты растений заявляемого биопрепарата не препятствует параллельной интродукции в природу различных полезных насекомых - энтомофагов и паразитов, - божьи коровки, златоглазки, ктыри, сирфиды, жужелицы, эдовум, эфидиус и т.д., а также способствует сохранению естественного фона энтомофагов и паразитов. Отсутствие пестицидных остатков способствует увеличению числа насекомоядных птиц и млекопитающих, повышает активность деятельности дождевых червей.

По предлагаемому способу препарат получают следующим образом.

В контейнеры-инсектарии объемом 3000х3500х2500 мм насыпают на 1/3 объема инертный экологический наполнитель (торф или гумусную почву). Поверх наполнителя насыпают слой (1-2 мм) свежих пшеничных отрубей. По углам расставляют поилки для гусениц или бабочек емкостью 0.3 - 0.5 л, которые заполняют ватой, смоченной раствором витаминов - аскорбиновой кислотой (0.001%) и фолиевой кислотой (0.0001%), 2 поилки, и с чистой водой - 2 поилки. Для бабочек 2 поилки заполняют чистой водой и 2 поилки - раствором сахарозы (5%).

Контейнер закрывает полупрозрачной пластиковой крышкой с отложенными на нее 5-10 тысячами яиц озимой совки маточной культуры. Гусеницы отрождаются из яиц и внедряются в среду. Выращивание гусениц до заражения (IV-V возраст) продолжается 20-24 суток. Содержимое поилок заменяют 1 раз в 2-3 дня. Корм добавляют по мере поедания. Для получения маточной культуры на питательный субстрат на кусочках полиэтиленовой пленки помещают ломтики картофеля, морковки или картофельную ботву. Корм меняют ежедневно до окукливания гусениц.

Вылетевшие бабочки спариваются и откладывают яйца на крышку контейнера. Через каждые двое суток крышку выталкивают из контейнера другой чистой крышкой, а крышку с отложенными на нее яйцами переносят в контейнер с предварительно подготовленным кормом.

Контейнеры с гусеницами IV-V возраста заражают нематодами из расчета 50-100 инвазионных личинок на одну гусеницу путем опрыскивания нематодной суспензией (1-2 л) рабочей поверхности контейнера из любого опрыскивателя.

Гусеницы заболевают, выходят на поверхность, где погибают на 2-3-и сутки после заражения.

После гибели гусениц переносят в чашки Петри по 10-20 особей в каждую и заливают искусственной питательной средой - 50-100 мл.

Водную вытяжку (искусственную питательную среду) готовят следующим образом: 10 г естественно опавших осенних листьев березы или хвои заливают 100 мл холодной воды и настаивают в течение 10 суток при комнатной температуре.

Выход нематод из погибших насекомых наблюдается через 10-12 суток после погружения их в среду. Выходящие личинки могут проходить полный сапрофитный цикл развития в искусственной среде. Жизненный цикл нематод - 6-7 дней. Плодовитость - 6-10 тысяч яиц/самку. Выходящие нематоды группируются возле погибшей жертвы и затем распределяются по всему субстрату. Выход нематод длится 2-3 месяца.

Через каждые 6 суток погибших насекомых с помощью пинцета переносят в другие чашки Петри, которые заливают средой, а содержимое предыдущей чашки переливают вместе с нематодами в емкость для хранения суспензии. В суспензии подсчитывают титр, помещают в холодильник или готовят сухую форму с наполнителем и добавками. Можно также осторожно сливать содержимое чашек Петри в емкость, не трогая погибших гусениц.

Нематоды размножаются на погибших насекомых с большой интенсивностью в течение 1-2 месяцев и поддерживают существование в течение 1-3 лет (без существенного наращивания титра). Каждое погибшее насекомое позволяет репродуцировать от 100 до 500 тысяч инвазионных личинок нематоды в месяц.

Нематодную суспензию концентрируют следующим образом: сначала отстаивают в течение суток, затем верхний слой супернатанта сливают, повышая тем самым титр суспензии в десятки раз. Полученную нематодную концентрат-суспензию смешивают с наполнителем с доведением титра до 50 тысяч инвазионных личинок в 1 г (см. примеры, табл. 1).

Применяемые наполнители и добавки существенно улучшили качество биопрепарата "Диприн" (табл. 2), нематоды хорошо воспроизводились в используемых субстратах (табл. 3). Применение предлагаемых препаративных форм биопрепарата "Диприн" при проведении полевых испытаний снижало численность зимующих стадий колорадского жука на 83-33%, заболеваемость фитофторозом снижалась на 99.56 - 64.8% и повышался урожай картофеля на 24 - 94% в сравнении с необработанным контролем. Новая препаративная форма биопрепарата "Диприн" показала также преимущество перед существующими жидкими формами биопрепаратов (табл. 1-4).

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Способ получения энтомопатогенного биологического препарата, включающий воспроизводство насекомых-хозяев, заражение их нематодами, сбор и концентрирование суспензии инвазионных личинок нематод с последующим приготовлением биопрепарата, отличающийся тем, что сбор личинок проводят в искусственную питательную среду, в которой они способны проходить полный сапрофитный цикл развития, давая несколько последовательных генераций, а приготовление биопрепарата осуществляют путем смешивания нематодной суспензии с инертным наполнителем - торфом или почвенным гумусом в сочетании с питательными добавками - отходами трихограммного производства, или куриным пометом, или агатом - 25.

Популярные патенты:

2236122 Устройство для содержания животных

... навоза термофильными бактериями);5 - установка в треугольных выступах отсасывающих воздуховодов с патрубками с перфорацией, причем патрубки и воздуховод являются элементами для крепления боковых перегородок и отсасывающего раструба, установленного в помещении для ферментации, соединенных в фильтровальной камере с высоконапорными вентиляторами, которые связаны с ассимиляторами аммиака и углекислоты и с выхлопными трубами с фильтром;6 - отделение глубокими бордюрами зоны озеленения, естественное покрытие, защита от атмосферных осадков и сама зона озеленения;7 - преддоильная площадка;8 - расширение прохода, примыкающего к доильному залу, до размеров кормонавозного прохода;9 - ...

2056737 Способ диагностики морозоустойчивости плодовых культур

... чрезвычайно сложно. Кроме того, в качестве диагностического критерия морозоустойчивости плодовых растений более надежно применять показатель, связанный с углеводным обменом и одновременно характеризующий в конкретно сроки стрессовое состояние растительного организма, вызванное действием низких отрицательных температур. Следует отметить, что при использовании для прогнозирования отмеченного свойства растений различных тканей однолетнего побега затруднителен отбор проб для анализа. Таким образом, предложенный путь оценки морозоустойчивости сортов яблоки нельзя считать абсолютно надежным и простым. Задачей настоящего изобретения является повышение достоверности и упрощение способа ...

2216903 Устройство для отделения плодов от ветвей

... Отработанные ветви вращающимися барабанами 4, 5 перемещаются к выходному каналу 14, в котором за счет трения о пружинные направляющие 15 замедляют свое движение, задерживаясь в активационной камере 3 для более полного отделения плодов от ветвей, и выгрузным барабаном 16 удаляются из активационной камеры 3. Плоды с примесями листьев, соплодий и мелких веточек попадают на деку 17 и, пройдя через зазоры между перемычками 18 треугольного сечения, равные 3-5 диаметра плода, падают на транспортер 19 для улавливания плодов. Уменьшение зазора между перемычками 18 не обеспечит прохождение крупных плодов и соплодий через деку 17, а его увеличение приведет к попаданию на транспортер 19 ...

2495561 Машина лесозаготовительная

... и его поломку из-за неровностей поверхности лесосеки и повышает эффективность использования машины. 4 з.п. ф-лы, 5 ил. Изобретение относится к машинам лесозаготовительным и может быть использовано в лесной промышленности и лесном хозяйстве на валке, пакетировании и трелевке деревьев.Известна машина лесозаготовительная, включающая самоходное шасси, на котором установлено техническое оборудование, содержащее захватно-подающее и пакетирующее устройства (Авторское свидетельство 457448, кл. A01G 23/08, 28.02.1975 г.).Недостатком этой машины лесозаготовительной является малая производительность, сложность регулировки и управления.Наиболее близкой по техническому результату является ...

2310308 Способ определения выполненности семян сельскохозяйственных культур и устройство для его осуществления

... что продольная ось их параллельна главной оптической оси системы, а плоскость поперечного сечения расположена между главным фокусом объектива и точкой, находящейся на дистанции двух фокусных расстояний от него. Увеличенное изображение семян проецируется на светопроницаемый матовый экран, на котором прорисована окружность заданного диаметра. Равенство площадей окружности и проекции обеспечивают изменением масштаба последней.Поставленная задача решается также благодаря тому, что устройство для определения выполненности семян сельскохозяйственных культур, содержащее оптическую схему проектора с автоматической фокусировкой, согласно изобретению дополнительно снабжено прозрачным ...

Еще из этого раздела:

2280351 Установка для скашивания сорной растительной массы с берм и откосов канала

2127511 Композиция пленочного полимерного материала для покрытия теплиц и оптический активатор для полимерного материала (варианты)

2251837 Рабочий орган кустореза

2050341 Устройство для переработки органического субстрата в биогумус

2182889 Дезинфицирующее средство

2261583 Выгрузное устройство бункера зерноуборочного комбайна

2005344 Способ облучения живых организмов или растений

2112341 Лапа плоскорежущая

2397634 Жалюзийное решето

2053661 Устройство для сколачивания ульевых рамок

Изобретения в сфере сельского хозяйства, животноводства, рыболовства

Способ получения энтомопатогенного препарата диприн

Изображения

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ