Способ выделения пыльников соиПатент на изобретение №: 2043016 Автор: Соловьев В.П. Патентообладатель: Соловьев Владимир Петрович Дата публикации: 10 Сентября, 1995 Адрес для переписки: подача заявки15.11.1991 публикация патента10.09.1995 Использование: в сельском хозяйстве, в частности селекции растений. Сущность изобретения: выделение пыльников осуществляют путем стерилизации бутонов, гомогенизации в жидкой среде, фильтрации через сито и последующей электрофлотации при напряженности поля 1 10 В/см. ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУИзобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в клеточной биологии. Известен способ выделения пыльников сои, заключающийся в том, что отделение пыльников от соматической ткани проводят путем предварительной фильтрации через сито с последующей флотацией. Недостатком данного способа является невысокая степень очистки и большие потери пыльников во время флотации, что связано с невозможностью добиться соответствия размеров пузырьков газа размерам пыльников. Сущность изобретения заключается в том, что отбирают бутоны, стерилизуют в 0,1%-ном растворе HgCl2 в течение 10 мин, помещают их в емкость с жидкостью, осмотическое давление которой равно или близко к осмотическому давлению внутри микроспор, например физиологический раствор (8,5 г/л NaCl), измельчают с помощью миксера, проводят на сите первичную очистку пыльников от соматической ткани и отделяют измельченную ткань бутонов от пыльников электрофлотацией, затем переносят пыльники на сито, где их промывают свежим физиологическим раствором (8,5% г/л NaCl). При этом повышается качество очистки пыльников и снижаются их потери в процессе выделения за счет того, что размер пузырьков газа при электрофлотации соответствует размеру пыльников сои. В этом случае не происходит слияния пузырьков газа между собой, так как на своей поверхности каждый из них несет некоторый заряд одного знака. Предлагаемый способ осуществляется следующим образом. Растения сои в фазе цветения начало бобообразования с корнем помещают в сосуды с жидкой питательной средой Кнопа и выдерживают в холодильнике при температуре 0-10оС в течение 3-30 дней. При температуре 0-10оС пыльники, достигнув фазы 1-2 ядерных микроспор, останавливаются в своем развитии, за счет чего в дальнейшем повышается процент формирования каллуса из пыльника. Время темпеpатуpной предобработки (3-30 дней) обеспечивает достижение фазы 1-2 ядерных микроспор большим количеством пыльников. Затем пинцетом отделяют бутоны и стерилизуют их в 0,1%-ном растворе HgCl2 в течение 10 мин. Всю дальнейшую работу ведут с соблюдением условий асептики. После стерилизации бутоны дважды отмывают в 500 мл дистиллированной воды в течение 10-15 мин, затем помещают в емкость с жидкостью, осмотическое давление которой близко или равно осмотическому давлению внутри микроспор (5-10 атм.), например физиологический раствор (8,5 г/л NaCl), чтобы не происходило разрушение пыльников и измельчают с помощью мешалки РТ-2 или миксера при 5000 об./мин в течение 10-15 мин. Затем отделяют измельченную ткань бутонов от пыльников электрофлотацией, которую проводят при напряженности электрического поля 1-10 В/см, так как при меньшей напряженности электрического поля образуется недостаточное количество пузырьков газа, а при более высокой напряженности электрического поля происходит чрезмерное перемешивание раствора, что приводит к ухудшению качества разделения. Отделенные пыльники помещают на сито с отверстиями менее 0,1 мм (меньше размера пыльников) и отмывают от примесей диплоидных клеток бутонов свежим физиологическим раствором. После чего очищенные пыльники используют для посадки в культуру или иных целей. П р и м е р 1. Выделенные на сите пыльники сои сорта "Рассвет" помещают в физиологический раствор в кювету для электрофореза вблизи анода. Включают электрический ток напряженностью 1 В/см. При этом наблюдается выделение пузырьков газа на аноде. Выделившиеся пузырьки захватывают из взвеси пыльники и поднимают их к поверхности. Но данная напряженность электрического поля приводит к недостаточному выделению пузырьков газа и к увеличению длительность процесса электрофлотации. П р и м е р 2. Условия по примеру 1, но напряженность электрического поля 5 В/см. При этом выделение пыльников проходило достаточно быстро (10-15 мин) и качество очистки достаточно высокое, а загрязненность не превышает 10% Потери пыльников при электрофлотации не превышают 20% П р и м е р 3. Условия по примеру 1, но напряженность электрического поля 10 В/см. При этом происходит интенсивное выделение газа на аноде, что приводит к перемешиванию жидкости и попаданию загрязняющей соматической ткани к пыльникам. Это снижает качество очистки пыльников. Потери пыльников в этом случае незначительны. Изобретение позволяет значительно (в 2-3 раза) повысить качество очистки пыльников сои по сравнению с флотацией и снизить при этом потери пыльников.ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯСПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ПЫЛЬНИКОВ СОИ, включающий отбор, стерилизацию бутонов, гомогенизацию в жидкой среде, предварительную фильтрацию через сито, отличающийся тем, что после фильтрации осуществляют последующую электрофлотацию при напряженности электрического поля 1 10 В/см.Популярные патенты: 2435369 Гербицидные композиции ... ... 2438304 Улей ... навигацию, а физические поля. Во время облета пчелы визуально не запоминают леток, а ориентируются на физическое поле, создаваемое пчелами в улье, и летят на источник излучения. Мощность поля очень мала и зависит от числа пчел, принимающих участие в его создании, а также от метеорологических и физических условий. При облете насекомое настраивается на частоту своего источника излучения одновременно с созданием энергетического поля [3, 4]. Наличие электромагнитного поля создает помехи в указанном излучении. По наблюдениям специалистов наличие помех в навигационной системе является причиной гибели пчел, так как они «теряют ориентировку и не могут вернуться в улей» [4].Как ... 2437864 Способ микробиологической переработки птичьего помета ... уменьшается патогенная микрофлора и увеличивается полезная микрофлора. Также велось визуальное наблюдение за внешним видом птичьего помета. В ходе испытаний наблюдалось постепенное изменение цвета и агрегатного состояния содержимого буртов и снижение аммиачного запаха. Отбор проб осуществляли в первый день внесения, через 6 суток и через 15 суток от начала обработки и проводили аналитический, микробиологический и паразитологический контроль в соответствии с методиками, указанными выше. В результате применения заявляемого способа получены следующие результаты, отраженные в таблицах 6, 7. Таблица 6 Результаты по изменению общего микробного числа, аммонийного азота, ... 2400069 Способ защиты материалов от микробного разрушения ... erytropolis и R. maris вносили в пробирки с 10 мл среды Раймонда с 2% нефти до концентрации 3×10 8 кл/мл. В пробирки вносили вещество 1 (табл.1) до концентрации 0.005-0.5%. В контрольном варианте биоцид не был добавлен. Пробирки культивировали при 27°С в течение 14 суток. Выводы о наличии роста и развития культур делали на основании помутнения среды, образования эмульсии вода-нефть и микроскопического исследования образцов. Культуры углеводородородокисляющих бактерий выращивали, как описано выше, и добавляли (в количестве 10%) к культурам сульфатвосстанавливающих бактерий, которые затем выращивали на среде Видделя с лактатом в пробирках Балча в течение 2 недель. ... 2093022 Устройство для выпаивания животных ... а при уменьшении дозы уменьшают. После выпойки животных устройство очищают от остатков кормов и производят его мойку. Для этого емкость 26 заполняют дезинфицирующим раствором, и процесс мойки аналогичен процессу выдачи корма. Экономический эффект может быть получен за счет повышения производительности и точности выдаваемой дозы корма. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. Устройство для выпаивания животных, включающее емкость для жидкого корма и сообщенные с ней трубопроводом мерные цилиндры, в каждом из которых размещены поршень со штоком, приспособление для регулирования объема выпаиваемой дозы корма, взаимодействующее с мерными цилиндрами, сливной патрубок, кормушки и привод, ... |
Еще из этого раздела: 2271092 Сортировка барабанного типа 2150193 Установка для бесфреонового охлаждения молока 2138949 Комбинированный препарат для борьбы с таежными и лесными клещами, способ борьбы и аттрактант 2432394 Ингибирование образования биогенного сульфида посредством комбинации биоцида и метаболического ингибитора 2454066 Светодиодный фитооблучатель 2124820 Устройство для изменения объемного заряда в атмосфере 2400963 Передвижной перегрузчик для зерна сельскохозяйственных культур 2287923 Роторный энергосберегающий мостовой агрегат для сельскохозяйственных работ 2167648 Средство для защиты от укусов кровососущих насекомых (варианты) и способ его получения 2253227 Устройство для регулирования температуры в улье |