Энтомопатогенный биопрепарат для защиты растений от вредителей и способ его получения

Энтомопатогенный биопрепарат для защиты растений от вредителей содержит сухую смесь концентрата культуральной жидкости на основе инфекционных единиц энтомопатогенных грибов вида Verticillium lecanii, или Beauveria bassiana, или Metarhizium anisopliae, аэросила и добавки, защищающей инфекционные единицы от потерь жизнеспособности и биологической эффективности при высушивании, при следующем соотношении компонентов, мас.%: концентрат культуральной жидкости - 69,0-77,5, добавка - 10,8-13,8, аэросил - 11,6-17,2. В качестве добавки биопрепарат содержит спирт многоатомного ряда, углевод, растительное масло, глюконат натрия и воду при следующем соотношении компонентов, мас.%: спирт многоатомного ряда - 6,2-13,4, углевод - 38,0-41,9, растительное масло - 38,7-41,0, глюконат натрия - 0,4-0,5, вода - 9,3-10,5. Биопрепарат получают введением в концентрат культуральной жидкости добавки при соотношении 5-7:1, а затем аэросила при соотношении 4,5-7.6:1 и высушиванием смеси. Изобретение обеспечивает увеличение биологической эффективности биопрепарата, сохранение и повышение жизнеспособности инфекционных единиц грибов в процессе высушивания и хранения. Эффективность биопрепарата на белокрылке составляет 95-100% в рабочей концентрации 1·107 спор/мл, титр жизнеспособных единиц составляет (0,35-5,5)·1010 КОЕ/г. 2 н. и 6 з.п. ф-лы, 3 табл., 15 пр.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ

Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии и касается производства средств защиты растений от вредителей, в частности способа получения грибных энтомопатогенных препаратов. Известны биопрепараты на основе энтомопатогенных грибов для защиты растений от вредителей и способы их получения путем поверхностного и глубинного культивирования микроскопического гриба Verticillium lecanii, Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae на питательных средах, содержащих источники углерода, азота и минеральные соли, с последующим концентрированием и сушкой концентрата. Двухстадийным глубинно-поверхностным способом получают Вертициллин зерновой ТУ 10.01.28-89 [1], Вертициллин-К ТУ 10.01.29-89 [2], Боверин-концентрат Ж ТУ 10.01.26-88 [3]. Недостатками этих препаратов являются краткий срок хранения этих препаратов в жидком виде или дороговизна сухих препаратов. Недостатками способов их получения является необходимость длительного культивирования грибов (не менее 14 суток), многостадийность, снижение жизнеспособности спор в процессе сушки и хранения.

Наиболее близким техническим решением к изобретению, взятый за прототип (Патент РФ 2035144. Третьяков В.П. Способ получения энтомопатогенного препарата от 22.01.1993 [4]) является биопрепарат и способ получения энтомопатогенного биопрепарата в сухом виде путем глубинного культивирования микроскопических грибов (Verticillium lecanii, Beauveria bassiana или Metarhizium anisopliae) на питательной среде, содержащей глюкозу, глицерин, гидролизат белково-витаминного концентрата, мел и воду, концентрирование культуральной жидкости, добавления наполнителя цеолита типа NaX и монтмориллонита или палыгорскита и высушивания. Для улучшения качества бипрепаратов и неслеживаемости их после высушивания гранулируют. Препараты, полученные по описанному способу, имеют биологическую эффективность на оранжерейной белокрылке: на основе бластоспор Verticillium lecanii - 70%, титр жизнеспособных бластоспор 1,5·1010 спор/г, на основе Beauveria bassiana - 85%, титр жизнеспособных бластоспор 9·109 спор/г, на основе Metarhizium anisopliae - 80%, титр жизнеспособных бластоспор 2·109 спор/г.

Таким образом, недостатками биопрепаратов по прототипу и способов их получения являются сравнительно низкая биологическая эффективность биопрепаратов и снижение жизнеспособности инфекционных единиц за счет воздействия неблагоприятных факторов в процессе высушивания и хранения.

Задача изобретения - увеличение биологической эффективности биопрепарата, сохранение и повышение жизнеспособности инфекционных единиц в процессе высушивания и хранения.

Задача относительно предлагаемого биопрепарата решается за счет содержания в концентрате культуральной жидкости на основе инфекционных единиц энтомопатогенных грибов вида Verticillium lecanii, или Beauveria bassiana, или Metarhizium anisopliae добавки, защищающей инфекционные единицы от потерь жизнеспособности и биологической эффективности при высушивании и хранении, при следующем соотношении компонентов, мас.%: концентрат культуральной жидкости - 69,0-77,5; добавка - 10,8-13,8; аэросил - 11,6-17,2. В состав добавки входит спирт многоатомного ряда, углевод, растительное масло, глюконат натрия при следующем соотношении компонентов, мас.%:

В качестве спирта многоатомного ряда добавка содержит один из следующих компонентов: глицерин, полиэтиленгликоль, дульцит или их смеси. В качестве углевода добавка содержит один из следующих компонентов: сахарозу, глюкозу, рамнозу, инозит, сорбит, кукурузный декстрин или их смеси. В качестве растительного масла добавка содержит один из видов масел: подсолнечное, кукурузное, оливковое, рапсовое, арахисовое, пальмовое или их смеси. В качестве наполнителя биопрепарат содержит аэросил.

Задача относительно предлагаемого способа решается следующим путем: готовят жидкую стерильную питательную среду, засевают инокулюмом грибов Verticillium lecanii, или Beauveria bassiana, или Metarhizium anisopliae и культивируют глубинно, скорость перемешивания 200-220 оборотов/мин в течение 4-5 суток при 27°С до максимального спорообразования. Полученную культуральную жидкость концентрируют фильтрованием до остаточной влажности не более 85% и вводят добавку, защищающую инфекционные единицы от потерь жизнеспособности и биологической эффективности смеси при соотношении 5-7:1, затем в полученную смесь вносят наполнитель при соотношении 4,5-7,6:1. В качестве добавки используют спирт многоатомного ряда, углевод, растительное масло, глюконат натрия при следующем соотношении компонентов, мас.%:

В отношении биопрепарата достигнут следующий результат: биопрепарат получен в форме сухого смачивающегося порошка, однородного, стабильного при хранении не менее 6 месяцев. Биологическая эффективность биопрепарата превышает прототип на 10-28%, более того он имеет более высокий исходный титр жизнеспособных инфекционных единиц.

В отношении способа получения биопрепарата: достигается сохранение жизнеспособности инфекционных единиц в процессе высушивания и дальнейшего хранения. Также происходит упрощение процесса получения биопрепарата за счет отсутствия стадии гранулирования.

Пример 1. Сухой биопрепарат представляет собой смачивающийся порошок, содержащий 60 г концентрата культуральной жидкости, 10 г добавки, 12 г аэросила. Концентрат культуральной жидкости с остаточной влажностью 73% получали в результате культивирования гриба Verticillium lecanii штамм Р-81 (Каталог государственных коллекций полезных и вредных организмов, М.-СПб., РАСХН, 2001, с.14 [5]), или Beauveria bassiana штамм Bb 2 (Митина и др., Энтомопатогенные грибы рода Lecanicillium: систематика, факторы вирулентности, токсинообразование. Биологические средства защиты растений, технологии их изготовления и применения, СПб., 2005, с.277 [6]), или Metarhizium anisopliae штамм МАК-1 (Крюков В.Ю. и др. Сравнительный анализ двух штаммов энтомопатогенного гриба Metarhizium anisopliae с разными жизненными стратегиями. Микология и фитопатология, 2011, 45(2), с.164 [7]) на жидкой питательной среде, содержащей, мас.: 20 г глюкозы, 10 г пептона, 2 г дрожжевого экстракта, H2 O - до 1 л, рН 6,5 (Леднев и др. «Возбудители микозов насекомых», СПб., 2003, с.71 [8]). В качестве питательной среды могут быть использованы любые среды, применяемые для культивирования этих видов энтомопатогенных грибов. Добавка, защищающая инфекционные единицы от потерь жизнеспособности и биологической эффективности при высушивании и хранении, содержит: глицерин - 0,6 мл или 0,76 г 80%-ный сахарный сироп - 5,2 мл (4,16 г сахара в 1,04 мл горячей воды), подсолнечное масло - 4,2 мл или 3,9 г и глюконат натрия - 0,04 г. В качестве компонентов добавки могут использованы спирты многоатомного ряда, углеводы и растительные масла, указанные в таблице 3.

После внесения аэросила и высушивания на поддонах при температуре 35-37°С с принудительной вентиляцией до остаточной влажности 23%, биопрепарат представляет собой рыхлый смачивающийся порошок белого цвета, неслеживающийся при хранении и легко суспендируемый в воде при использовании. Титр жизнеспособных единиц образцов биопрепаратов составляет 8,5·109 -1,0·10 спор/мл (табл.1), что выше, чем по прототипу (табл.2). Биологическая эффективность препаратов на личинках оранжерейной белокрылки (Trialeuroides vaporariorum) в стандартных условиях в рабочей концентрации споровой суспензии 1·10 7 пор/мл составляет от 95-100%, что выше, чем по прототипу (табл.1).

Пример 2. Сухой биопрепарат представляет собой смачивающийся порошок, содержащий 77 г концентрата культуральной жидкости, полученный, как в примере 1; 11,32 г добавки и 11,8 г аэросила. Добавка, защищающая инфекционные единицы от потерь жизнеспособности и биологической эффективности при высушивании и хранении, содержит: глицерин - 0,74 г, 80%-ный сахарный сироп - 5,9 мл (4,7 г сахара в 1,2 мл горячей воды), подсолнечное масло - 4,64 г и глюконат натрия - 0,04 г. Данный пример показывает, что при минимальных концентрациях компонентов добавки и аэросила свойства получаемого биопрепарата не изменяются по сравнению с примером 1, а количество жизнеспособных единиц на грамм препарата и биологическая эффективность выше, чем в прототипе (табл.1).

Пример 3. Сухой биопрепарат представляет собой смачивающийся порошок, содержащий 100 г концентрата культуральной жидкости, полученный как в примере 1, а также 15,5 г добавки и 20,5 г аэросила. Добавка, защищающая инфекционные единицы от потерь жизнеспособности и биологической эффективности при высушивании и хранении, содержит: ПЭГ - 2,3 г, 6,6 мл сиропа (6,5 г рамнозы в 1,1 г горячей воды), оливковое масло - 6,5 г и глюконат натрия - 0,1 г. Данный пример показывает возможность использования различных компонентов добавки, приведенных в таблице 3.

Пример 4. Сухой биопрепарат представляет собой смачивающийся порошок, содержащий 100 г концентрата культуральной жидкости, полученный, как в примере 1, а также 17,2 г добавки и 22 г аэросила. Добавка, защищающая инфекционные единицы от потерь жизнеспособности и биологической эффективности при высушивании и хранении, содержит: дульцит - 2,45 г, 6,6 мл сиропа (6,96 г инозита в 0,45 г горячей воды), рапсовое масло - 7,08 г и глюконат натрия - 0,07 г. Данный пример показывает возможность использования различных компонентов добавки, приведенных в таблице 3.

Пример 5. Сухой биопрепарат представляет собой смачивающийся порошок, содержащий 100 г концентрата культуральной жидкости, полученный, как в примере 1, а также 15,7 г добавки и 21 г аэросила. Добавка, защищающая инфекционные единицы от потерь жизнеспособности и биологической эффективности при высушивании и хранении, содержит: смесь, а именно глицерин - 1,17 г, ПЭГ - 1,1 г, 6,81 мл сиропа (6,44 г глюкозы в 0,37 г горячей воды), рапсовое масло - 3,56 г, пальмовое - 3 г и глюконат натрия - 0,06 г). Данный пример показывает возможность использования смесей спиртов многоатомного ряда в качестве компонентов добавки, приведенных в таблице 3.

Пример 6. Сухой биопрепарат представляет собой смачивающийся порошок, содержащий 100 г концентрата культуральной жидкости, полученный, как в примере 1, а также 14,37 г добавки и 17 г аэросила. Добавка, защищающая инфекционные единицы от потерь жизнеспособности и биологической эффективности при высушивании и хранении, содержит: ПЭГ - 2,08 г, 6,6 мл сиропа (смесь углеводов, а именно 2,9 г кукурузного декстрина и 3,02 г сорбита в 0,28 г горячей воды), арахисовое масло - 6,03 г и глюконат натрия - 0,06 г. Данный пример показывает возможность использования смесей углеводов в качестве компонентов добавки, приведенных в таблице 3.

Пример 7. Так же, как в примерах 1-2, но сухой биопрепарат получают при максимально допустимых количествах компонентов добавки и наполнителя: на 69 г концентрата культуральной жидкости вносят 13,36 г добавки, 17,34 г аэросила. Добавка, защищающая инфекционные единицы от потерь жизнеспособности и биологической эффективности при высушивании и хранении, содержит: глицерин - 1,8 г, 80%-ный сахарный сироп - 6,25 мл (5 г сахара в 1,25 мл горячей воды), подсолнечное масло - 5,2 г и глюконат натрия - 0,07 г. Данный пример показывает, что при максимальных концентрациях компонентов добавки и аэросила свойства получаемого биопрепарата не изменяются по сравнению с примером 1, а количество жизнеспособных единиц на грамм препарата и биологическая эффективность выше, чем в прототипе (табл.1).

Пример 8. Так же, как в примерах 1-3, но сухой биопрепарат получают из 100 г концентрата культуральной жидкости и при запредельных количествах компонентов добавки и наполнителя. При этом заявленные свойства биопрепарата не достигаются (табл.3).

Пример 9. То же, что в примере 1, получают препарат на основе культуральной жидкости гриба V.lecanii с различным титром (табл.2). При этом титр концентрата культуральной жидкости составляет (1,3-8,5)·108 КОЕ/г. При сушке с защитной смесью титр препарата достигает до (0,35-5,5)·1010 КОЕ/г за счет дальнейшего концентрирования без потери жизнеспособности спор. В прототипе титр препарата практически не изменяется (1,5·10 10 спор/г) по сравнению с исходным титром концентрата (1,3·10 10 спор/г), что свидетельствует о потерях жизнеспособных спор при сушке препарата.

Биологическая эффективность препарата на основе культуральной жидкости гриба V.lecanii на белокрылке 100% (табл.1), в прототипе ниже на 28%.

Пример 10. То же, что в примере 1-9, получают препарат. Для видов B.bassiana штамм Bb 2 или M.anisopliae штамм МАК-1 также происходит повышение титров препаратов за счет концентрирования без потери жизнеспособности спор при сушке с защитной смесью. Биологическая эффективность препаратов на основе культуральной жидкости гриба B.bassiana и M.anisopliae на белокрылке 95% (табл.1), в прототипе ниже на 10 и 15% соответственно.

Пример 11. Способ получения биопрепарата заключается в следующем: готовят жидкую стерильную питательную среду следующего состава, масс: 20 г глюкозы, 10 г пептона, 2 г дрожжевого экстракта, H 2O - до 1 л, рН 6,5 (Леднев и др. «Возбудители микозов насекомых», СПб., 2003, с.71 [8]), засевают грибом Verticillium lecanii штамм Р-81 (Каталог государственных коллекций полезных и вредных организмов, М. - СПб., РАСХН, 2001, с.14 [5]), или Beanveria bassiana штамм Bb 2 (Митина и др., Энтомопатогенные грибы рода Lecanicillium: систематика, факторы вирулентности, токсинообразование. Биологические средства защиты растений, технологии их изготовления и применения, СПб., 2005, с.277 [6]), или Metarhizium anisopliae штамм МАК-1 (Крюков В.Ю. и др. Сравнительный анализ двух штаммов энтомопатогенного гриба Metarhizium anisopliae с разными жизненными стратегиями. Микология и фитопатология, 2011, 45 (2), с.164 [7]), и культивируют глубинно, скорость перемешивания 200-220 оборотов/мин. В качестве питательной среды могут быть использованы любые среды, применяемые для культивирования этих видов энтомопатогенных грибов.

Культивирование осуществляют в течение 4-5 суток при 27°С до максимального спорообразования. Полученную культуральную жидкость концентрируют до остаточной влажности 73% фильтрованием. Для получения сухого энтомопатогенного препарата в 100 г концентрата культуральной жидкости вводят 14,3 г (7:1) защищающей добавки при следующем содержании каждого компонента: глицерин - 1,9 г; сахароза - 5,4 г; кукурузное масло 5,5; глюконат натрия 0,07; вода - 0,2 и затем 15 г аэросила (7,6:1) и высушивают.

В результате внесения добавки инфекционные единицы были защищены от отрицательного воздействия процесса высушивания, их титр составил 8,5·10 9-1,0·1010 спор/мл (табл.1), что выше, чем по прототипу (табл.2). Биологическую эффективность препаратов определяли на личинках оранжерейной белокрылки (Trialeuroides vaporariorum) в стандартных условиях, рабочая концентрация споровой суспензии 1-10 спор/мл. Она составляла, в зависимости от вида гриба 95-100%, что выше, чем по прототипу (табл.1).

Достигнуто сохранение жизнеспособности инфекционных единиц в процессе дальнейшего хранения. Данный способ не требует гранулирования, что упрощает процесс получения биопрепарата.

Пример 12. То же, что в примере 7, получают препарат на основе культуральной жидкости Verticillium lecanii штамм Р-81, или Beauveria bassiana штамм Bb 2, или Metarhizium anisopliae штамм МАК-1. Но используют концентрат культуральной жидкости с влажностью 80% и другие компоненты защищающей добавки (табл.3). Для получения сухого энтомопатогенного препарата в 100 г концентрата культуральной жидкости вводят 17,2 г (5,8:1) защищающей добавки при следующем содержании каждого компонента: дульцит - 2,45 г; инозит - 6,96 г; рапсовое масло - 7,08 г; глюконат натрия 0,07; вода - 0,45 г и затем 22 г аэросила (5,3:1) и высушивают.

Пример 13. То же, что в примере 7, получают препарат на основе культуральной жидкости Verticiuium lecanii штамм Р-81, или Beauveria bassiana штамм Bb 2, или Metarhizium anisopliae штамм МАК-1. Но используют концентрат культуральной жидкости с влажностью 78% и смесь компонентов защищающей добавки (табл.3). Для получения сухого энтомопатогенного препарата в 100 г концентрата культуральной жидкости вводят 15,7 г (6,3:1) защищающей добавки, в состав которой входят смеси многоатомных спиртов и растительных масел, при следующем содержании каждого компонента: глицерин - 1,17 г; ПЭГ - 1,1 г; глюкоза - 6,44 г; рапсовое масло - 3,56 г; пальмовое - 3 г; глюконат натрия - 0,06 г; вода - 0,37 г и затем 21 г аэросила (5,5:1) и высушивают.

Пример 14. То же, что в примере 7, получают препарат на основе культуральной жидкости Verticillwn lecanii штамм Р-81, или Beauveria bassiana штамм Bb 2, или Meiarhizmm anisopliae штамм МАК-1. Но используют концентрат культуральной жидкости с влажностью 85%. Для получения сухого энтомопатогенного препарата к 100 г концентрата культуральной жидкости вводят 20 г (5:1) защищающей добавки при следующем содержании каждого компонента: глицерин - 2,7 г; сахароза - 7,6 г; кукурузное масло 7,7; глюконат натрия 0,1; вода - 1,9 и затем 26,7 г аэросила (4,5:1) и высушивают.

Данный пример показывает, что при максимальных концентрациях компонента добавки и аэросила свойства получаемого биопрепарата не изменяются по сравнению с примером 1, а количество жизнеспособных единиц на грамм препарата и биологическая эффективность выше, чем в прототипе (табл.1, 3).

Пример 15. Так же, как в примерах 7-8, но сухой биопрепарат получают из 100 г концентрата культуральной жидкости и при запредельных значениях соотношений ККЖ к защищающей добавке и наполнителю (аэросилу). При этом заявленные свойства биопрепарата не достигаются (табл.3). Количества компонентоз в рекомендуемом диапазоне обеспечивают увеличение биологической эффективности биопрепарата, сохранение и повышение жизнеспособности инфекционных единиц в процессе высушивания и хранения.

Предлагаемый энтомопатогенный биопрепарат и способ его получения в форме смачивающегося порошка путем глубинного культивирования грибов (Verticillivm lecanii или Beauveria bassiana, или Metarhizium anisopliae) при внесении защитной добавки, состоящей из спиртов глицеринового ряда, углеводов, воды, растительного масла и глюконата натрия, и наполнителя - аэросила (по сравнению с внесением только наполнителей цеолита типа NaX и монтморрилонита или палыгорскита по прототипу) обладают преимуществами: более высокая биологическая эффективность биопрепарат, более высокий исходный титр жизнеспоспособных единиц при длительном хранении. Данный способ обеспечивает сохранение жизнеспособности инфекционных единиц в процессе высушивания и дальнейшего хранения, а также упрощение процесса получения биопрепарата, т.к. не требует дополнительного гранулирования для предотвращения слеживания, что является более экономичным. Данный способ универсален и применим при промышленном получении биопрепаратов и показал эффективность в производственных масштабах.

Источники информации

1. Вертициллин зерновой ТУ 10.01.28-89.

2. Вертициллин-К ТУ 10.0L29-89.

3. Боверин-концентрат Ж ТУ 10.01.26-88.

4. Патент РФ 2035144. Третьяков В.П. Способ получения энтомопатогенного препарата от 22.01.1993.

5. Каталог государственных коллекций полезных и вредных организмов, Москва - С.Петербург, РАСХН отд. защиты растений. 2001.

6. Митина Г.В., Сокорнова С.В, Павлюшин В.А. Энтомопатогенные грибы рода Lecanicillium: систематика, факторы вирулентности, токсинообразование. Биологические средства защиты растений, технологии их изготовления и применения. С-Петербург, 2005, с.273-281.

7. Крюков В.Ю., Дубовский И.М., Ярославцева О.Н., Левченко М.В., Слямова Н.Д., Белгибаева А.Б., Ходырев В.П., Леднев Г.Р., Глупов В.В.. Сравнительный анализ двух штаммов энтомопатогенного гриба Metarhizium anisopliae с разными жизненными стратегиями. Микология и фитопатология, 2011, 45 (2), с.164-176.

8. Леднев Г.Р., Борисов Б.А., Митина Г.В. Возбудители микозов насекомых, СПб. 2003.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Энтомопатогенный биопрепарат для защиты растений от вредителей, содержащий сухую смесь, образованную из концентрата культуральной жидкости на основе инфекционных единиц энтомопатогенных грибов вида Verticillium lecanii, или Beauveria bassiana, или Metarhizium anisopliae с добавлением наполнителя, и подвергнутую высушиванию, отличающийся тем, что смесь в качестве наполнителя содержит аэросил и дополнительно добавку, защищающую инфекционные единицы от потерь жизнеспособности и биологической эффективности при высушивании, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

2. Энтомопатогенный биопрепарат по п.1, отличающийся тем, что в качестве спирта многоатомного ряда содержит один из следующих компонентов: глицерин, полиэтиленгликоль, дульцит или их смеси.

3. Энтомопатогенный биопрепарат по п.1, отличающийся тем, что в качестве углевода он содержит один из следующих компонентов: сахарозу, глюкозу, рамнозу, инозит, сорбит, кукурузный декстрин или их смеси.

4. Энтомопатогенный биопрепарат по п.1, отличающийся тем, что в качестве растительного масла он содержит один из видов масел:подсолнечное, кукурузное, оливковое, рапсовое, арахисовое, пальмовое или их смеси.

5. Способ получения энтомопатогенного биопрепарата для защиты растений от вредителей, заключающийся в том, что в концентрат культуральной жидкости на основе инфекционных единиц энтомопатогенных грибов вида Verticillium lecanii, или Beauveria bassiana, или Metarhizium anisophae вводят наполнитель и смесь высушивают, отличающийся тем, что в качестве наполнителя используют аэросил при соотношении 4,5-7,6:1, а предварительно, до введения аэросила, в концентрат культуральной жидкости в качестве добавки, защищающей инфекционные единицы от потерь жизнеспособности и биологической эффективности смеси при соотношении 5-7:1 вносят спирт многоатомного ряда, углевод, растительное масло, глюконат натрия и воду при следующем соотношении компонентов, мас.%:

6. Способ по п.5, отличающийся тем, что в качестве спирта многоатомного ряда используют один из следующих компонентов: глицерин, полиэтиленгликоль, дульцит или их смеси.

7. Способ по п.5, отличающийся тем, что в качестве углевода используют сахарозу, глюкозу, рамнозу, инозит, сорбит, кукурузный декстрин или их смеси.

8. Способ по п.5, отличающийся тем, что в качестве растительного масла используют один из видов масел: подсолнечное, кукурузное, оливковое, рапсовое, арахисовое, пальмовое или их смеси.