Способ получения инсектицидаПатент на изобретение №: 2005378 Автор: Митина Г.В., Павлюшин В.А., Новикова И.И., Конюхов В.П. Патентообладатель: Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений Дата публикации: 15 Января, 1994 Адрес для переписки: подача заявки01.07.1991 публикация патента15.01.1994 Изображения   Использование: сельскохозяйственная микробиология, производство средств защиты растений от насекомых, в частности инсектицидов. Сущность изобретения: гриб Verticillium lecanii выращивают на питательной среде, содержащей источник углерода, азота и минеральные соли, отделяют полученную биомассу фильтрованием, высушивают и размалывают, проводят экстракцию инсектицидсодержаще вещество хлороформом в соотношении 1 : 5 - 1 : 10. Отделяют экстракт фильтрованием и очищают методом колоночной хроматографии с последовательным использованием системы растворителей: гексан-хлороформ в соотношении 1 : 1, хлороформ и 10% -ный этанол в хлороформе. 5 табл. , , ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУИзобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии и защите растений, а именно к способу получения инсектицида на основе метаболитов энтомопатогенных грибов. Известны способы получения биопрепаратов для защиты растений от сосущих вредных насекомых на основе метаболитного комплекса энтомофторовых грибов, в частности способ получения инсектицида путем экстракции токсинов из биомассы грибов p. Entomophthora хлороформом, выдерживание полученной смеси и отделения хлороформенной фазы, отличающийся тем, что с целью повышения выхода целевого продукта, перед экстракцией из биомассы выделяют фракцию, не обладающую инсектицидной активностью, с помощью диоксана. Основной недостаток указанного способа - низкая активность токсичной фракции и низкий выход. За прототип принят способ получения инсектицида из гриба Verficillium lecanii на основе живых спор. Однако эффективность полученного таким способом препарата ограничена относительной влажностью воздуха (80-97% ) и температурой (16-18оС ночью и 24-30оС днем). Кроме того, препарат быстро теряет активность при хранении. Цель изобретения - увеличение биологической эффективности биопрепарата и удлинение срока хранения без ее потери. В качестве продуцента биопрепарата используют гриб V. lecanii. В отличие от прототипа из биомассы энтомопатогенной гриба экстрагируют токсинсодержащую фракцию с предварительным извлечением фракции, не обладающей инсектицидной активностью, методом колоночной хроматографии. Это обеспечивает значительное увеличение выхода и активности биологического инсектицида. Поскольку эти признаки отсутствуют в прототипе, то предложенное решение соответствует критерию "новизна". Сущность предложенного способа заключается в том, что на питательной среде выращивают биомассу гриба V. lecami, которую отделяют от среды и высушивают. Затем биомассу гриба экстрагируют хлороформом при соотношении 1: 5 - 1: 10 и проводят последовательное выделение фракций методом колоночной хроматографии с использованием силикагеля марки 40/100 производства ЧССР. Колонку набивали путем разбавления силикагеля гексаном. П р и м е р 1. Гриб V. lecanii (шт. Р-81, деп. в кол. ВИЗР) выращивали на качалке в течение 6 сут при 28+2о на среде следующего состава: КН2РО4 - 2,0 г; MgSO4 - 1,0 г; пептон - 10,0 г; глюкоза - 20,0 г; Н2О - до 1 л. Биомассу отделяли фильтрованием; высушивали при 38-40о и размалывали. Данные по подбору оптимального для экстракции соотношения биомассы и объема растворителя приведены в табл. 1. Данные таблицы свидетельствуют, что оптимальным является отношение биомассы к объему хлороформа 1: 5 - 1: 10. На основании полученных результатов было взято соотношение биомассы и растворителя 1: 5. К 100 г воздушно-сухой биомассы добавляли 500 мл хлороформа, настаивали 24 ч. Раствор отделяли фильтрованием, растворитель упаривали под вакуумом на роторном испарителе при 40о. Экстракт (3,0 г) наносили на колонку с силикагелем высотой 40 см и внутренним диаметром 3 см, заполненную 180 г силикагеля в гексане сухим способом. Экстракт растворяли в 80 мл спирта, смешивали раствор с 20 г силикагеля, спирт упаривали, остаток наносили на колонку. Колонку мыли системой растворителей: гексан, хлороформ, спирт с постепенным увеличением полярности (табл. 2). Контроль за разделением вели методом тонкослойной хроматографии (ТСХ) на пластинах Silufol в системе толуол-этилацетат-муравьиная кислота 9: 2: 1 соответственно, вещества обнаруживали парами йода. Фракции, одинаковые по содержанию веществ и Rf, объединяли. С целью предварительного изучения состава фракций были испытаны общие и специфические обнаружители для липидов. Анализ липидов проводили путем опрыскивания пластин проявляющими реагентами непосредственно (Кейтс. , 1975) после разделения фракций в указанной системе. Анализ липидов показал, что при делении исходного хлороформного экстракта по предложенной схеме гексаном и хлороформом вымываются триглицериды, свободные жирные кислоты, нейтральные липиды (фракции 1 и 2), хлороформом - липиды промежуточной полярности: альдегиды, кетоны, сложные эфиры (фракции 3-26), смесью этанола с хлороформом - полярные липиды; фосфолипиды, гликолипиды, сульфолипиды и др. (фракции 27, 28, 29). Дальнейшую работу проводили с объединенными фракциями. Таким образом были получены фракции 1, 2, 3, 6 объединенная (4-7), 12 объединенная (9-14), 15, 26 объединенная (16-26), 27 и 28 объединенная (28 и 29). Инсектицидная активность полученных фракций была оценена на личинках старших возрастов и самках гороховой тли. Для этого в чашку Петри диаметром 40 мм помещали фильтры такого же диаметра, смоченные 0,3 мл 0,1-41,5% -ными растворами экстрактов, и подсаживали 20-30 особей насекомых. Учет гибели тлей проводили через 2 ч после выдерживания чашек при 28о. В контроле фильтры обрабатывали водой. Данные представлены в табл. 3. Анализ данных табл. 3 показал, что описанный способ позволяет получать фракции общего экстракта V. lecanii, обогащенные инсектицидными веществами. П р и м е р 2. Описанным по примеру 1 способом был получен образец биопрепарата, обогащенный токсином V. lecanii (фракции 26 объед. , 27,28 объед. ). Данные по содержанию токсина и инсектицидной активности в отношении гороховой тли по сравнению с прототипом представлены в табл. 4. Данные таблицы свидетельствуют, что биопрепарат, полученный по предлагаемому способу, обладает значительно более высокой инсектицидной активностью в отношении гороховой три при увеличении выхода активной фракции в 100 раз. П р и м е р 3. Описанным согласно примеру 1 способом был получен образец биопрепарата. Испытания эффективности в лабораторных условиях были проведены по указанной методике в отношении ряда вредных насекомых (табл. 5). Для сравнения был взят биопрепарат, полученный на основе штамма Steptomysec aurantiacus (заявка N 449936/13), как наиболее активный в отношении комплекса сосущих вредных насекомых. Данные таблицы свидетельствуют, что биопрепарат, полученный предлагаемым способом, обладает значительно более высокой активностью в отношении оранжерейной белокрылки, (эффективность 0,5% экстракта - 91,7% по сравнению с 68,1% в контроле) и персиковой тли. Гибель 60% тлей наблюдается при концентрации рабочей эмульсии 0,1% по сравнению с 0,5% в прототипе. Высокую эффективность биопрепарат проявил в отношении гороховой и бахчевой тлей. Таким образом, по предлагаемому способу выход токсической фракции многократно увеличивается по сравнению с прототипом при одновременном повышении биологической активности в отношении сосущих насекомых (27,6% в отношении персиковой тли и 25,7% в отношении белокрылки соответственно при 0,5% -ной концентрации рабочей эмульсии). (56) Авторское свидетельство СССР N 1396121, кл. А 01 N 63/00, 1983.ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯСПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНСЕКТИЦИДА путем культивирования гриба Verticillium lecanii с последующим отделением биомассы гриба и высушиванием ее, отличающийся тем, что из сухой биомассы экстрагируют инсектицидсодержащее вещество хлороформ при соотношении 1 : 5 - 1 : 10, полученный экстракт отделяют и очищают методом колоночной хромотографии, удаляя неактивные фракции с последовательным использованием системы растворителей: гексан - хлороформ в соотношении 1 : 1, хлороформ и 10% -ный этанол в хлороформе.Популярные патенты: 2492650 Микроэмульсионная бактерицидная композиция ... ... 2463776 Система и способ для массовой валки деревьев ... образом предназначена для использования в качестве сырья для производства энергии или изготовления бумаги, то для заготовки древесины лучше подходит способ, известный как массовая валка. Однако известные харвестерные головки имеют относительно тяжелую конструкцию, сложны и дорогостоящи, что является другой причиной, почему они не подходят для заготовки менее ценной топливной древесины, идущей на выработку энергии. Следовательно, все чаще обычной практикой становится использование также и в процессе заготовки топливной древесины устройств, известных как грейферы для заготовки топливной древесины, которые монтируются на лесохозяйственной машине и конструкция которых не ... 2260932 Способ уборки льна и тресты при неблагоприятных погодных условиях ... тресту. При реализации предлагаемого способа во время осуществления одной из указанных операций уборки льна или приготовления тресты на почве одновременно выполняют две канавки на стабильном расстоянии одна от другой, равном в зависимости от ширины ленты стеблей 120...150 см. Для этого на одной из машин, служащих для осуществления способа, то есть на льнокомбайне, теребилке, подборщике-очесывателе (подборщике-молотилке) или подборщике-оборачивателе (ворошилке) устанавливают на указанном расстоянии два рабочих органа, изготовленные, например, в виде ножа или диска. При движении машины с выполнением технологического процесса каждый нож или диск прорезает или продавливает на почве ... 2253227 Устройство для регулирования температуры в улье ... температуры, задатчик внутриульевой температуры, силовой коммутирующий элемент, стабилизирующее устройство, светоизлучатель, фотоприемник, нагревательный элемент, микроЭВМ. МикроЭВМ позволила значительно уменьшить габаритные размеры, снизить электропотребление, организовать более гибкий алгоритм работы устройства. 2 ил. Изобретение относится к области пчеловодства и может найти применение на индивидуальных и коллективных пасеках.Известны устройства для регулирования температуры в улье, но они не имеют достаточных функциональных возможностей [1].Известно устройство для регулирования температуры в улье [2], содержащее датчик внутриульевой температуры, первую и вторую ... 2384065 Инсектоакарицидное средство ... из организма не только через кожные покровы и волосы, т.е. относительно быстрое снижение концентраций в наружных тканях и снижение контактного воздействия. Фипронил - инсектицид из группы арилпиразолов (фенилпиразолов) контактного, кишечного и частично системного действия с длительным защитным эффектом. Он эффективно подавляет развитие клещей и летающих насекомых - из отрядов жесткокрылых и прямокрылых и др. Фипронил поражает центральную нервную систему эктопаразитов, не влияя на центральную нервную систему животных. При нанесении на кожу фипронил локализуется в сальных железах, не попадая в кровь животного. Таким образом, создается эффект "резервуара", который ... |
Еще из этого раздела: 2121787 Устройство для регулирования температуры воздуха в теплице 2427999 Способ повышения плодородия мерзлотных засоленных почв в условиях криолитзоны 2150193 Установка для бесфреонового охлаждения молока 2462016 Устройство для протравливания семян 2415542 Пневматический высевающий аппарат 2381650 Синергические фунгицидные комбинации биологически активных веществ и их применение для борьбы с нежелательными фитопатогенными грибами 2261588 Способ электростимуляции жизнедеятельности растений 2407282 Способ выращивания корнесобственных саженцев винограда и машина для его осуществления 2449809 Дезинфицирующее средство 2123784 Сетное каскадное устройство для промысла поверхностных объектов лова |
Изобретения в сельском хозяйстве
Обработка почвы в сельском и лесном хозяйствах
Посадка, посев, удобрение
Уборка урожая, жатва
Обработка и хранение продуктов полеводства и садоводства
Садоводство, разведение овощей, цветов, риса, фруктов, винограда, лесное хозяйство
Новые виды растений или способы их выращивания
Производство молочных продуктов
Животноводство, разведение и содержание птицы, рыбы, насекомых, рыбоводство, рыболовство
Поимка, отлов или отпугивание животных
Консервирование туш животных, или растений или их частей
Биоцидная, репеллентная, аттрактантная или регулирующая рост растений активность химических соединений или препаратов
Хлебопекарные печи, машины и прочее оборудование для хлебопечения
Машины или оборудование для приготовления или обработки теста
Обработка муки или теста для выпечки, способы выпечки, мучные изделия
|
|
||