Способ идентификации мутантных форм кукурузыПатент на изобретение №: 2005353 Автор: Феденко В.С., Стружко В.С., Глушко В.В. Патентообладатель: Феденко Владимир Савельевич Дата публикации: 15 Января, 1994 Адрес для переписки: подача заявки19.09.1991 публикация патента15.01.1994 Изображения Использование: биотехнология, биохимия, биофизика, сельское хозяйство, селекция и семеноводство. Сущность изобретения: мутантные формы кукурузы идентифицируют по уменьшению у них максимума флуоресценции по сравнению с немутантными (исходными), измеренного в интервале 500 - 525 нм после облучения среза зерна исследуемых образцов светом при длине волны 375 - 390 нм. 3 табл. ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУИзобретение относится к биотехнологии и сельскому хозяйству, в частности к генетическим исследованиям зерновых культур, и может быть использовано в селекционной практике для отбора мутантных форм кукурузы с хозяйственно ценными признаками. Селекционные программы на улучшение качества зерна кукурузы включают использование мутантных форм как источников полезных признаков. В связи с этим возникает необходимость проведения идентификации мутантов, а также селекционных форм, созданных на их основе. Известны способы оценки мутантных форм кукурузы по физическим характеристикам, включающие определение массы, плотности или стекловидности зерна. К недостаткам указанных способов следует отнести использование большого количества анализируемого селекционного материала, а также невысокую контрастность маркерных признаков, что, в ряде случаев, затрудняет отбор зерна мутантов, фенотипически неразличимых с обычными аналогами. Наиболее близким по технической сущности и достигаемому эффекту является способ, включающий идентификацию мутантных форм кукурузы по величине оптической плотности диффузионного отражения размолотого зерна. Согласно способу получают ИК-спектр диффузного отражения размолотого зерна кукурузы в области 1300-2400 нм. Отбор мутантных форм проводят по уменьшению величины оптической плотности в интервале длин волн 1400-2400 нм в сравнении с обычным аналогом. Основными недостатками способа является необходимость подготовки образца к анализу путем размола зерна, использование для проведения идентификации большого количества селекционного материала (около 20 г). Кроме того, указанный способ не может быть использован для позерновочного отбора, что ограничивает возможность селекционной диагностики для мутантных форм с ограниченным выходом зерна. Целью предполагаемого изобретения является упрощение и ускорение отбора. Способ осуществляется следующим образом. Срез зерна кукурузы помещают в кювету спектрофлуориметра, облучают светом при длине волны 375-390 нм, измеряют спектр флуоресценции образца в области 420-540 нм и определяют положение максимума флуоресценции в интервале 500-525 нм. Отбор мутантных форм кукурузы проводят по уменьшению значения указанного максимума на 8-18 нм в сравнении с обычными аналогами. Интервал значений длин волн возбуждения (375-390 нм) и флуоресценции (500-525 нм) обоснован экспериментально. Отличительной особенностью способа является использование в качестве образца среза зерна кукурузы и проведение идентификации по флуоресцентным параметрам. По указанным отличительным признакам проведен патентный поиск. Аналогичных решений не обнаружено, поэтому указанные признаки являются существенными. П р и м е р 1. Срез зерна кукурузы помещают в кювету спектрофлуориметра МРФ-4, облучают его светом при различных значениях длины волны возбуждения, измеряют спектр флуоресценции образца в области 420-540 нм и определяют положение максимума флуоресценции по результатам анализа 3-5 индивидуальных зерновок каждого образца. В качестве контрольных образцов используют зерно исходной линии кукурузы (W 155 +/+), а в качестве исследуемой - зерно линии кукурузы, мутантной по гену опейк - 2(W 155 o2/o2). Полученные результаты приведены в табл. 1 (данные статически достоверны, ошибка измерения не более 5% ). В результате эксперимента установлено, что оптимальным интервалом для идентификации мутантных форм является область длин волн возбуждения 375-390 нм. При значениях длины волны возбуждения меньше 375 нм снижается контрастность различий между контрольным и исследуемым образцом, а при значениях выше 390 нм уменьшается интенсивность флуоресценции и точное определение максимума затруднено из-за уширения полосы. П р и м е р 2. Аналогично примеру 1 проводят измерения флуоресценции при длине волны возбуждения 382 нм и идентифицируют образцы мутантных форм кукурузы (02/02) в сравнении с исходными (+/+) (табл. 2). П р и м е р 3. Аналогично примеру 1 определяют максимум флуоресценции при длине волны возбуждения 382 нм и проводят идентификацию высоколизиновых гибридов кукурузы (ВЛ) на основе мутации опейк-2 в сравнении с обычными аналогами (табл. 3). Полученные результаты показывают, что предложенный маркерный признак позволяет проводить отбор не только мутантных линий, но и высоколизиновых гибридов кукурузы. Использование предлагаемого способа в сравнении с прототипом упрощает и ускоряет проведение идентификации, так как исключает размол зерна при подготовке к анализу. Способ дает возможность проводить позерновочный экспресс-отбор без разрушения зерновки, которая после идентификации может быть использована в селекционном процессе при создании перспективных форм кукурузы с улучшенным качеством зерна. (56) Van Twisk P. , Qnicke V. , Jevers H. O. Cer. Chem. , 1976, vol. 53, N 4, p. 692-698. Jupta H. O. , Singh J, Singh R. P. Indian J. Agric. Sci. , 1983, vol. 53, N 9, p. 767-770. Paez A. V. Crop Sci. , 1973, vol. 13, N 6, p. 633-636. Авторское свидетельство СССР N 1634191, кл. A 01 H 1/04, G 01 N 33/02, 1991.ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯСПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ МУТАНТНЫХ ФОРМ КУКУРУЗЫ, включающий определение оптического параметра зерна исследуемых образцов и выявление мутантных форм путем сравнения измеренного параметра с идентичным параметром немутантных форм, отличающийся тем, что срез зерна исследуемых образцов облучают светом при длине волны 375 - 390 нм, в качестве оптического параметра измеряют положение максимума флуоресценции в интервале 500 - 525 нм и мутантные формы выявляют по уменьшению максимума флуоресценции у исследуемых образцов на 8 - 18 нм по сравнению с данным показателем немутантных форм.Популярные патенты: 2384052 Способ повышения эмбриональной жизнеспособности и естественной резистентности цыплят-бройлеров ... двухлинейного гибрида К39, n=5 Группа Показатели Масса, г цыплятцыплят без желткасердца мышечно-го желудкажелезисто- го желудка фабрицие-вой сумки печениселезен- ки контрольабсолютная масса (Х±m) 37,20±0,47 32,36±0,56 0,23 ±0,01 1,69±0,050,28±0,01 0,032±0,011 1,21±0,04 0,024±0,005 относитель ная масса, % к массе тела 87,00 0,62 4,540,75 0,083,25 0,05 2 опытнаяабсолютная масса (X±m) 40,94±0,77 35,26±0,81 0,28±0,011,78±0,11 0,34±0,03** 0,054±0,010* 1,28±0,02** 0,030±0,007 относитель ная масса, % к массе тела 86,12 0,68 4,350,83 0,123,13 0,07 Таблица ... 2025945 Способ выращивания насаждений сосны ... пород и кустарников: кустарники транспирируют влагу и иссушают почву меньше, чем древесные растения. Г.Н. Высоцким разработан принцип создания культур по древесно-кустарниковому типу смещения, но при этом отсутствуют конкретные параметры размещения деревьев в насаждении: например для сосны оптимальная ширина междурядий и шаг посадки. Отсутствует также ранее неизвестная совокупность лесоводственных преимуществ этого способа. Не всегда учитывается биологическая совместимость выращиваемых древесных и кустарниковых пород в конкретных лесорастительных условиях. Наиболее близким по технической сущности является "Способ выращивания сосновых насаждений в лесостепной зоне, включающий ... 2434381 Технологическая линия для приготовления и раздачи влажных кормов ... корма в дозатор (8). Для перекрытия окон (7) на корпусе дозатора (8) установлен электромагнитный клапан с заслонкой (9). Для привода тросово-шайбового конвейера (4) предусмотрен электродвигатель (10) с редуктором (11). Повышается качество получаемых влажных кормов, снижаются энергозатраты и предотвращаются потери корма при раздаче. 4 ил. Изобретение относится к области кормоприготовления и раздачи готовых кормов, в частности для приготовления и раздачи влажных мешанок.Известно устройство для увлажнения сыпучих кормов [RU 2179801 С2, А01К 5/02, G01F 11/24, G01F 11/34, G01F 11/46, 02.02.2002], выполненное из дозатора сухого корма, смесительной камеры, блока ... 2157064 Способ промышленного производства миниклубней картофеля в искусственном климате культивационного сооружения (фитотроне) ... в период вегетации и снижали до 10-12 градусов в период клубнеобразования. Температура атмосферы корневой зоны фитотрона поддерживалась на уровне 16-20 градусов. Содержание углекислого газа в атмосфере стеблевой зоны фитотрона в световой период поддерживали на уровне 0.18% при постоянном перемешивании атмосферы. Содержание углекислого газа в атмосфере корневой зоны поддерживали на уровне 0.09-0.1%. Опрыскивание всего объема корневой части растений картофеля питательным минеральным раствором в период вегетативного роста осуществляли в течение 35 с с интервалами в 5 мин, в период клубнеобразования - 5 с и 140 мин соответственно. Состав и pH питательной минеральной среды ... 2263431 Устройство для предпосевной обработки семян ... шнек 15 в поворотном желобе 16 и ротор 17 с криволинейными лопастями 18. Лопасти 18 с равным угловым шагом размещены на ступице 19 ротора 17. Положением желоба 16 управляют рычагом 20, фиксируемым на раме смесительной камеры 1. В качестве привода выгрузного шнека 15 использован электродвигатель 21 и шкивы 22 и 23 клиноременной передачи 24. Привод ротора 17 осуществлен от электродвигателя 25 через шкивы 26 и 27 клиноременной передачи 28. Смесительная камера 1 шнековыми транспортерами 29 и 30 кинематически связана с загрузочной емкостью 2 и выгрузной емкостью 3.Устройство для предпосевной обработки семян работает следующим образом. Семена, подлежащие обработке перед посевом жидким ... |
Еще из этого раздела: 2105446 Плоскорежущая лапа 2021671 Машина для уборки льна-долгунца 2093016 Устройство для водоподачи 2028749 Капустоуборочная машина 2496309 Зубчатое устройство для вычесывания домашних животных с механизмом выброса шерсти 2257713 Способ производства пестицида (варианты) 2217912 Способ проведения контрольного лова молоди пелагических рыб, в частности лососевых, и обкидной невод 2164741 Устройство для заготовки древесины 2265444 Способ консервирования пантов 2479988 Способ формирования линейно ориентированного виноградника с капельным орошением (версия 3) |
Изобретения в сельском хозяйстве
Обработка почвы в сельском и лесном хозяйствах
Посадка, посев, удобрение
Уборка урожая, жатва
Обработка и хранение продуктов полеводства и садоводства
Садоводство, разведение овощей, цветов, риса, фруктов, винограда, лесное хозяйство
Новые виды растений или способы их выращивания
Производство молочных продуктов
Животноводство, разведение и содержание птицы, рыбы, насекомых, рыбоводство, рыболовство
Поимка, отлов или отпугивание животных
Консервирование туш животных, или растений или их частей
Биоцидная, репеллентная, аттрактантная или регулирующая рост растений активность химических соединений или препаратов
Хлебопекарные печи, машины и прочее оборудование для хлебопечения
Машины или оборудование для приготовления или обработки теста
Обработка муки или теста для выпечки, способы выпечки, мучные изделия
|
|
||