Изобретения в сфере сельского хозяйства, животноводства, рыболовства

 
Изобретения в сельском хозяйстве Обработка почвы в сельском и лесном хозяйствах Посадка, посев, удобрение Уборка урожая, жатва Обработка и хранение продуктов полеводства и садоводства Садоводство, разведение овощей, цветов, риса, фруктов, винограда, лесное хозяйство Новые виды растений или способы их выращивания Производство молочных продуктов Животноводство, разведение и содержание птицы, рыбы, насекомых, рыбоводство, рыболовство Поимка, отлов или отпугивание животных Консервирование туш животных, или растений или их частей Биоцидная, репеллентная, аттрактантная или регулирующая рост растений активность химических соединений или препаратов Хлебопекарные печи, машины и прочее оборудование для хлебопечения Машины или оборудование для приготовления или обработки теста Обработка муки или теста для выпечки, способы выпечки, мучные изделия

Штамм гриба entomophthora thaxteriana (petch.) (zygomycetes; entomophthorales) № 9 (визр) - продуцент биопрепарата энтокс

 
Международная патентная классификация:       A01N C12N

Патент на изобретение №:      2226547

Автор:      Мукамолова Т.Ю., Павлюшин В.А.

Патентообладатель:      Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений

Дата публикации:      10 Апреля, 2004

Начало действия патента:      26 Августа, 2002

Адрес для переписки:      196608, Санкт-Петербург - Пушкин, ш. Подбельского, 3, ВИЗР, патентная группа

Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии и может быть использовано при получении препаратов для защиты растений от тлей, паутинных клещей и трипсов. Штамм Entomophthora thaxteriana (Petch.) № 9 (ВИЗР) получен путем ступенчатого отбора из моноконидиального рассева природного изолята, выделенного из персиковой тли. Отбор проведен по признаку образования токсинов энтокса изолятами этого гриба при культивировании в глубинных условиях. Штамм Entomophthora thaxteriana (Petch.) депонирован в коллекции чистых культур ВИЗР под № 9. Выход энтокса у штамма составляет - 8,39-8,45 г с 1 л питательной среды, состоящей из 4% глюкозы, 1% соевой муки и воды. Содержание энтокса в биомассе 70-71%. Полученный штамм гриба обладает более высоким (по сравнению с известным) уровнем образования токсических веществ (основы биопрепарата энтокс) и инсектицидной активностью против сосущих вредителей. 2 табл.

Предложение относится к области сельскохозяйственной микробиологии и может быть использовано при получении препаратов для защиты растений от глей, паутинных клещей и трипсов.

Известны штаммы гриба Entomophthora thaxteriana Fetch. № 18, 35-МР и 19-11 (Zygomycetes; Entomophthorales) (ВИЗР) (А.С. № 1345385 и № 2150836), являющиеся продуцентами токсических веществ - основы биопрепаратов. Однако в процессе сохранения и многократных пересевов штамм № 35-МР утратил свои токсинообразующие свойства, и снизил биологическую эффективность по отношению к насекомым - вредителям. Штамм 19-11 был отобран как продуцент микоафидина Т и в связи с этим имеет очень низкую продуктивность по энтоксу.

За прототип взят штамм № 18 (А.С. № 1658432), так же являющийся продуцентом токсинов, со временем его токсинообразующие свойства и активность токсинов значительно понизились.

Задача изобретения состоит в получении нового штамма гриба, обладающего более высоким (по сравнению с известным) уровнем образования токсических веществ (основы биопрепарата энтокс) и инсектицидной активностью, против сосущих вредителей. Штамм Entomophthora thaxteriana (Petch.) № 9 (ВИЗР) получен путем ступенчатого отбора из моноконидиального рассева природного изолята, выделенного из персиковой тли. Отбор проведен по признаку образования токсинов - энтокса изолятами этого гриба при культивировании в глубинных условиях. Штамм Entomophthora thaxteriana (Petch.) депонирован в коллекции чистых культур ВИЗР под № 9. Выход энтокса - у штамма 8.39-8.45 г с 1 л питательной среды, состоящей из 4% глюкозы, 1% соевой муки и воды (остальное). Содержание энтокса в биомассе 70-71%.

Mорфологические признаки

Вегетативный мицелий штамма несентированный бесцветный, распадающийся через 24 ч на короткие прямые или изогнутые гифенные тела. Образование конидиеносцев с конидиями происходит на субстратном мицелии.

Конидиеносцы короткие, бесцветные, неразветвленные, с одной конидией на конце.

Конидии сферические с сосочком у основания содержат одно крупное или несколько мелких жировых включений.

Гомеры конидий 25-3921-32 мкм, в среднем 3226 мкм. Конидии имеют однослойную клеточную стенку, гладкую поверхность.

Формирование покоящихся спор начинается к 66 часам роста. Покоящиеся споры округлые с двойной оболочкой и крупной жировой каплей в центре. Размеры покоящихся спор 20-25 мкм, в среднем 22 мкм. Поверхность спор гладкая, клеточная стенка трехслойная.

Культурально-морфологические признаки штамма изучены на сусло (50% не охмеленное пивное сусло), среде Сабуро (1% пептон и 4% глюкозы) и соевой (1% соевой муки и 4% глюкозы). На всех указанных средах штамм образует плоские, гладкие и бесцветные колонии, которые при 24 часовом освещении покрываются налетом конидий, что придает колониям белый цвет. Пигмент в среду не выделяется.

Характер поверхностного роста гладкий. Скорость роста колонии в стандартных условиях (рН 6,5-7,0; температура выращивания 22С) на сусло и среде Сабуро 3.0 мм сутки, на соевой среде - 2,8 мм сутки.

Цвет

На агаризированных питательных средах (Сабуро, соевой и сусло) штамм образует бесцветные колонии. Пигмент в среду не выделяется. Хорошо спорулирующая колония имеет белый цвет за счет обильного белого налета из конидий.

Физиологические признаки

Пигмент не образуется и в среду не выделяется. Из источников углерода хорошо усваивает глюкозу, мальтозу, крахмал, фруктозу (на них отмечен наилучший рост и споруляция). На среде с аминокислотами может расти без углеводородов за счет углеродной части аминокислот, однако, рост слабый и сноруляция отсутствует. Плохо растет и спорулирует на средах, содержащих сахарозу, лактозу, галактозу, арабинозу, ксилозу и спирты.

Из источников азота усваивает смеси аминокислот, пептиды, белки, может расти на средах с аспарагином. Нитратный азот не усваивает, на средах с аммонийным азотом - рост слабый.

Температура

Рост отмечался в диапазоне температур +3-36С. Температурный оптимум для роста 27С для конидиеобразования 20-22С.

Микроаэрофильный рост.

Штамм является строгим аэробом. Проверка жизнеспособности штамма осуществляется пересевом культуры на свежеприготовленный сусло-агар с последующим выращиванием в термостате при 22С.

Способ пересевов

Продолжительность выращивания на косяках сусло-агара 7-8 суток, после чего штамм может храниться без пересевов 1-1,5 года.

Способ консервации

Штамм может храниться на косяках cуcлo-aгapa при +4С в течение 1-1.5 лет без пересева. В Госколлекции микроорганизмов ВИЗР России штамм хранится 8 лет без потери жизнеспособности.

Наличие маркерных признаков

Штамм продуцирует два вида эндотоксинов (микоафидин Т в меньшем количестве и энтокс в большем) и обладает избирательным токсическим действием. Продуктивность Entomophthora thaxteriana (Petch.) № 9 но энтоксу - 8,39-8,48 г/л среды, инсектицидная активность 98-100% в различных вариантах с тест - насекомыми. Уровень токсинообразования штамма является стабильным признаком: после 16 генераций токсигенность штамма и эффективность образцов препаратов остается на первоначальном уровне.

Пример

Штаммы Е. thaxteriana № 35-МР, 18, 19-11 и № 9 выращивают на среде содержащей 1% соевой муки и 4% глюкозы, вода - остальное (рН 6,5-7,0) при 27С в течение 3 суток. Биомассу отфильтровывают, высушивают при температуре 37С (до воздушно-сухого состояния) и размалывают.

Выделение энтокса из 1 г биомассы проводят, гидролизуя ее спиртовым раствором щелочи. Полученные растворы отделяют фильтрованием от биомассы и выпаривают спирт до полного его удаления.

Выход энтокса для штамма Е. thaxteriana № 9 составляет 71% или 8,482 г/л питательной среды соответственно.

Выход энтокса для штамма Е. thaxteriana № 35-МР составляет 45% или 3,5 г/л питательной среды соответственно.

Выход энтокса для штамма Е. thaxteriana № 18 составляет 11,5% или 0,35 г/л питательной среды соответственно.

Выход энтокса для штамма Е. thaxteriana № 19-11 составляет 14,5% или 1,885 г/л питательной среды соответственно.

Инсектицидную активность определяли экспресс-методом, описанным в "Методике испытаний микоафидина Т в лабораторных, полевых и производственных условиях" (составители: Воронина Э.Г., Мукамолова Т.Ю. и др. Л. - Пушкин, 1988). Метод состоит в следующем: в чашку Петри диаметром 40 мм на фильтр, смоченный 0,3 мл раствора препарата, помещали тлей, учет гибели проводили через 1 ч контакта с обработанной поверхностью, количество повторностей - 4-5 чашек, число насекомых в 1 чашке 20-30 особей.

Эффективность действия препаратов на личинок табачного трипса определяли экспресс-методом, аналогичным для тлей. Обработку паутинных клещей проводят путем окунания листьев фасоли с клещами в 1% водную эмульсию препаратов. Листья затем помещают в чашки Петри с водой для предотвращения перемещения клещей с обработанной поверхности, гибель учитывают через 24 ч.

В табл. 1, 2 приведены инсектицидная активность и выход препаративных форм штаммов гриба Е. thaxteriana № 18 и № 9.

Таким образом, штамм Entomophthora thaxteriana (Рetch.) № 9 обладает повышенным уровнем токсинообразования и биологической эффективности, что позволяет снизить концентрацию рабочей эмульсии препаратов, полученных на его основе до 0,5% для достижения 90-100% гибели вредителей сельскохозяйственных культур в открытом и закрытом грунте.

Формула изобретения

Штамм гриба Entomophthora thaxteriana (Petch.) (Zygomycetes; Entomophthorales) № 9 (ВИЗР) для получения биопрепарата энтокс против сосущих насекомых-вредителей и клещей.



Популярные патенты:

2498561 Способ тандемного возделывания сельскохозяйственных культур для повышения производства пищевых зерновых культур

... разных растительных видов [1], должны разрешить такое предполагаемое рентабельное возделывание пшеницы и горчицы в раби/зимнем сезоне в Индо-Гангских равнинах и других географических областях, имеющих соответствующие агроклиматы, где почвенные условия также аналогичны условиям, преобладающим в Индо-Гангских равнинах.В соответствии с этим, в данном изобретении предлагается способ тандемного возделывания сельскохозяйственных культур для повышения производства пищевых зерновых культур, причем способ включает следующие стадии, на которых осуществляют:(а) выбор, по меньшей мере, одной подходящей культуры на основе характеристик фенологической пластичности и признаков устойчивости к ...


2464780 Способ, устройство и компьютерный программный продукт для управления группой молочного скота

... доят и учитывают индивидуальный надой молока игде животные получают индивидуальный рацион, причем собирают данные по группе молочного скота, которые включают, по меньшей мере, индивидуальный надой молока и потребленный рацион,где последующий индивидуальный надой молока рассчитывают при помощи модели на основании указанных данных,где для одного или более животного, по меньшей мере, один индивидуальный рацион и надой молока от отдельного молочного животного регулируют на стадии регулирования, задавая предварительные условия. 2. Способ по п.1, где предварительные условия включают прогнозируемый кормовой баланс для отдельного молочного животного более высокий после стадии ...


2488422 Сеть фильтров

... и поперечные элементы (1, 5) фильтровального материала, если он жесткий, уложены друг на друга.6. Фильтр по любому одному из пп.1-3, отличающийся тем, что фильтровальный материал состоит из полотен природных и синтетических материалов, таких как маты, полосы или нити, например волокон копры, пробки, сизаля, конопли, соломы, ткани, такой как шелк, хлопок, бумага, полимеры, пластики, пены, металлические нити, железная вата, графит, стекловата, которые могут быть, по выбору, гидрофилизованы или гидрофобизованы. 7. Фильтр по любому одному из пп.1-3, отличающийся тем, что фильтровальный материал состоит из жестких формованных полос, изготовленных из природных или синтетических ...


2463776 Система и способ для массовой валки деревьев

... снизу ствола дерева, помещенного в харвестерную головку 4, верхний нож легко высвобождается путем приведения соединительной оси в поворотное движение относительно корпуса харвестерной головки, при этом традиционные сучкорезные ножи по-прежнему обжимают одно или несколько деревьев в харвестерной головке. Благодаря шарнирной конструкции оснастки для массовой валки ее верхний нож прогибается на оси, и, таким образом, появляется возможность передвинуть верхний нож из-под пачки деревьев, собранных в харвестерной головке, в положение сверху. Высвобожденной таким образом оснасткой 12 для массовой валки можно управлять так, чтобы она совершила новый поворот до упора в стволы деревьев, ...


2066320 Производные тиазола, способ их получения и способ борьбы с грибками

... с силикагелем с использованием смеси 1:9 /по объему/ этилацетата: петролейного эфира /60-80/ в качестве элюанта привел к получению двух энантиомерных пар целевого продукта в качестве образца А /2R, 4R/ /2S, 4S/ 0,49 г и образца В /2R, 4S/ /2S, 4R/ 0,45 г. М+ Рассчитано: 330.012 Найдено: Образец А: 330.014 Образец В: 330.013 Пример 5. Получение 2-/4-фторфенил/-2-/тиазол-5-илметил/-4-метил-1,3-диоксолана. /R 4-фторфенил, R1=метил, R2=водород, Смесь 1-/4-фторфенил/-2-/5-тиазолил/этанона /0,75 г, 3,3 ммоля/, полученного по способу, аналогичному способа примера 1, пропан-1,2-диола /2 мл/ и метансульфокислоты /0,5 мл/ в ксилоле /30 мл/ перемешивали при кипячении с обратным ...


Еще из этого раздела:

2178965 Картофелекопатель ручной мотыжный

2254705 Способ уплотнения и герметизации консервируемых кормов в рулонах

2479988 Способ формирования линейно ориентированного виноградника с капельным орошением (версия 3)

2182765 Имитатор звуков рыб

2199195 Мостовая сельскохозяйственная платформа "сотка"

2275006 Устройство для крепления стеблей малины в вертикальном и горизонтальном положениях

2452165 Высевающий аппарат зерновой сеялки с централизованным дозированием семян

2438304 Улей

2162635 Устройство для аэрозольного распыления (варианты)

2200947 Способ количественной оценки лесопригодности почвогрунтов