Способ трансформации хлопчатника, способ получения эмбриогенного каллюса (варианты) и векторПатент на изобретение №: 2225882 Автор: РАНГАН Тирумале Сриниваса (IN), АНДЕРСОН Дэвид Морис (US), РАДЖАСЕКАРАН Канниах (IN), ГРУЛА Джон Вилльям (US), ХАДСПЕТ Ричард Лорн (US), ЙЕНОФСКИ Ричард Ли (US) Патентообладатель: МАЙКОУДЖЕН КОРПОРЕЙШН (US) Дата публикации: 10 Октября, 1999 Начало действия патента: 30 Декабря, 1997 Адрес для переписки: 129010, Москва, ул. Б. Спасская, 25, стр.3, ООО "Юридическая фирма Городисский и Партнеры", пат.пов. Н.Г.Лебедевой Изображения    Изобретение относится к генетической инженерии растений. Экспланты или каллюсные клетки растений хлопчатника сокультивируют с Agrobacterium при определенных условиях до получения эмбриогенных каллюсных клеток. Трансформация клеток вектором на основе Agrobacterium, содержащим набор необходимых генов, позволяет придать этим клеткам устойчивость к антибиотикам, гербицидам и грибковым патогенам. 4 с. и 11 з.п.ф-лы, 35 ил., 2 табл. Текст описания в факсимильном виде (см. графическую часть). Формула изобретения1. Способ трансформации хлопчатника, отличающийся тем, что указанный способ предусматривает следующие стадии: (a) взаимодействие эксплантата хлопчатника с вектором на основе Agrobacterium, содержащим экспрессируемый ген, чужеродный по отношению к хлопчатнику, в течение времени, достаточного для переноса указанного гена в клетки эксплантата; (b) инкубирование эксплантата в среде роста каллюса в течение периода времени около 15-200 ч, при температуре около 25-53 С, при цикле: 16 ч - на свету и 8 ч - в темноте; (c) взаимодействие инкубированных эксплантатов со средой роста каллюса, содержащей токсичный для Agrobacterium антибиотик, в течение периода времени, достаточного для лизиса Agrobacterium; (d) культивирование эксплантата, не содержащего Agrobacterium в среде роста каллюса; (e) отбор трансформированного каллюса от нетрансформированного каллюса.2. Способ по п.1, отличающийся тем, что дополненной средой роста каллюса является среда Мурасиге и Скуга, дополненная около 1-10 мг/л нафталинуксусной кислоты.3. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что антибиотиком, токсичным для Agrobacterium, является цефотаксим.4. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный способ предусматривает следующие стадии: (a) взаимодействие в течение периода времени около 1 мин - 24 ч сегментов эксплантатов проростка хлопчатника, отобранных из гипокотиля, семядоли и их смесей, с вектором на основе Agrobacterium, содержащим ген, который определяет устойчивость к антибиотику; (b) перенос эксплантатов в среду роста каллюса, которая является средой, дополненной около 1-10 мг/л нафталинуксусной кислоты, на период времени около 15-200 ч, при температуре около 25-35С, при световом режиме: 16 ч - на свету и 8 ч - в темноте, с целью развития каллюса из эксплантатов; (c) перенос каллюса в свежую среду роста каллюса, содержащую цефотаксим в концентрации, достаточной для лизиса Agrobacterium; (d) культивирование указанного каллюса на свежей среде роста для первичного каллюса; (e) взаимодействие каллюса со свежей средой роста каллюса, дополнительно содержащей цефотаксим для лизиса оставшихся Agrobacterium и антибиотик, к которому трансформированный каллюс является невосприимчивым для отбора каллюса, устойчивого к этому антибиотику.5. Способ по любому из пп.1-4, отличающийся тем, что указанный трансформированный каллюс до взаимодействия со средой роста каллюса, содержащей цефотаксим, промывают в среде роста каллюса, не содержащей цефотаксим.6. Способ по п.4 или 5, отличающийся тем, что указанным антибиотиком для отбора трансформированного каллюса является канамицин.7. Способ получения трансформированного эмбриогенного каллюса хлопчатника из клеток хлопчатника в суспензионной культуре в среде роста каллюса, отличающийся тем, что после культивирования суспензионной субкультуры проводят стадии: (a) выделение клеток и любого образовавшегося эмбриогенного каллюса из среды роста каллюса; (b) ресуспендирование выделенных клеток и каллюса в среде роста каллюса, содержащей вектор на основе Agrobacterium, содержащий последовательность экспрессируемого гена, чужеродную по отношению к хлопчатнику, при поддержании условий культивирования суспензии в течение периода времени, достаточного для трансформации клеток хлопчатника; (c) выделение суспендированных клеток и каллюса из среды роста каллюса, содержащей Agrobacterium; (d) обработка трансформированных клеток и каллюса антибиотиком, токсичным для Agrobacterium, в целях лизиса Agrobacterium; (e) отбор трансформированных клеток хлопчатника и каллюса от нетрансформированных клеток хлопчатника и эмбриогенных каллюсных клеток; (f) фильтрование суспензии клеток в целях выделения эмбриогенных каллюсов, размер которых превышает 600 мкм.8. Способ по п.7, отличающийся тем, что трансформированные клетки и эмбриогенный каллюс по отдельности обрабатывают антибиотиком после фильтрования суспензии.9. Способ по п.7 или 8, отличающийся тем, что после фильтрования суспензии проводят отбор трансформированных клеток и каллюса.10. Способ по любому из пп.7-9, отличающийся тем, что токсичным для Agrobacterium антибиотиком является цефотаксим.11. Способ получения эмбриогенного каллюса хлопчатника из клеток хлопчатника в суспензионной культуре в среде роста каллюса, отличающийся тем, что после стадии культивирования суспензионной субкультуры в течение около 7-14 дней проводят следующие стадии: (a) выделение клеток из среды роста каллюса; (b) ресуспендирование клеток в среде роста каллюса, содержащей вектор на основе Agrobacterium, содержащий последовательность экспрессируемого гена, чужеродную по отношению к хлопчатнику, при поддержании условий культивирования суспензии в течение периода времени, достаточного для трансформации суспендированных клеток; (c) выделение клеток из среды роста каллюса, содержащей Agrobacterium; (d) дополнительное субкультивирование клеток в свежей среде роста каллюса, не содержащей Agrobacterium; (e) фильтрование суспензии для удаления эмбриогенного каллюса размером более 600 мкм; (f) ресуспендирование оставшихся клеток в среде роста каллюса, содержащей антибиотик, который токсичен по отношению к Agrobacterium; (g) обработку эмбриогенного каллюса антибиотиком, который токсичен по отношению к Agrobacterium; (h) отбор трансформированных клеток и эмбриогенного каллюса от нетрансформированных клеток и эмбриогенного каллюса.12. Способ по п.11, отличающийся тем, что указанный способ предусматривает (a) выделение клетки из среды роста каллюса, содержащей Agrobacterium; (b) промывание клеток в свежей среде роста, не содержащей Agrobacterium, до субкультивирования; (c) дополнительное субкультивирование клеток в свежей среде роста каллюса, не содержащей Agrobacterium, и в которой антибиотиком, токсичным для Agrobacterium, является цефотаксим; (d) взаимодействие оставшихся клеток с антибиотиком, к которому трансформированные клетки нечувствительны, для отбора трансформированных клеток.13. Способ по п.11, отличающийся тем, что антибиотиком, токсичным для Agrobacterium, является цефотаксим.14. Вектор для придания растению хлопчатника резистентности к антибиотику, содержащий две правограничные последовательности Т-ДНК из Agrobacterium tumefaciens, способные интегрироваться в геном растений, фланкирующие химерный ген, способный экспрессироваться в хлопчатнике и сообщающий резистентность к канамицину и G418.15. Вектор по п.14, отличающийся тем, что химерный ген содержит промотор нопалинсинтазы, кодирующую область неомицинфосфотрансферазы II из Тn5 и терминатор гена тимидинкиназы вируса простого герпеса.
TK4A - Поправки к публикациям сведений об изобретениях в бюллетенях "Изобретения (заявки и патенты)" и "Изобретения. Полезные модели" Страница: 732 Напечатано: (22) (24) 30.12.1997 Следует читать: (22)(24) 16.11.1988 Номер и год публикации бюллетеня: 8-2004 Код раздела: FG4A Извещение опубликовано: 10.09.2004 БИ: 25/2004 Популярные патенты: 2415560 Способ выращивания корнесобственных саженцев винограда ... азот. Во вторую подкормку совместно с макроэлементами с поливной водой для лучшего развития корневой системы вносится препарат Радифарм из расчета 5 литров на 1 га. Через 7-10 дней препарат Радифарм вносится второй раз из расчета 2,5 л/га. Внесение удобрений через подкормки проводят в конце полива во избежание вымывания их за пределы корнеобитаемой зоны.В течение вегетации проводят три некорневые подкормки препаратом Плантофол (5+15+45) 2 кг/га в сроки июль, август, сентябрь.Для предупреждения возникновения болезней саженцев винограда посадки регулярно опрыскивают фунгицидами. Первое опрыскивание для защиты школки в момент активного роста проводят препаратом Ридомил голд ... 2387127 Способ мелиорации в предгорной зоне и система для его реализации ... прогнозе и при наступлении воздушных засух.Применение способа и системы мелиорации в предгорной зоне позволяет:- предотвратить водную и ветровую эрозию почвы;- накопить и сохранить ранней весной влагу в почве и уменьшить ее потери на испарение; - обеспечить возможность раннего выращивания экологически чистой сельскохозяйственной продукции, получать два урожая сельскохозяйственных культур, осуществлять утилизацию навоза на поле; - уменьшить затраты на обработку почвы и прополку сорняков; - предотвратить уплотнение активного слоя почвы колесами сельскохозяйственной техники;- уменьшить глубинную фильтрацию из поливных борозд вследствие уплотнения их колесами сельскохозяйственной ... 2450135 Двигатель самоходной машины ... Передача импульсов сил давления газов двигателя рабочим органам и движителям без шатунов, коленчатого вала, сложнейшей трансмиссии упрощает конструкцию, управление, использование без смазочных жидкостей в любое время года. Передается мощность двигателя к ходовой системе и рабочим органам трактора, автомобиля, комбайна и других уборочных машин. Совмещение приводов колес и тормозов повышает безопасность работы скоростной машины, а сочетание функций ходовой системы и рабочих органов векторного действия повышает управляемость. Поворот машины осуществляется изменением разностей сил и скоростей бортов, ослаблением и усилением натяжений бортов, поворотом колес, рабочими органами, ... 2165137 Машина для уборки корней лекарственных растений ... V3 лопасти 28 в 3-5 раз больше поступательной скорости трактора, подрезанная часть пласта подвергается изгибу, а направление перемещения пласта изменяется вверх. В этом положении частично деформированный пласт поддерживает лопасть 27. Дальнейший поворот оси ротора на угол 4 приводит к тому, что пласт под своим весом и реакции упругих деформаций падает на закругленную вершину r лопасти 31. Скорость V5 воздействия периферийной кромки лопасти 31 уменьшилась на величину разницы радиусов R3 и R5[(R3-R5)]. Дальнейшее уменьшение радиуса R1 лопасти 30 приводит к тому, что пласт разгибается почти до исходного состояния. Разнонаправленные прилагаемые моменты на подрезанный пласт приводят к ... 2160533 Способ профилактики и коррекции транспортного стресса у крупного рогатого скота ... массу туши. По данному показателю молодняк третьей опытной группы превосходил контрольных бычков на 5,2 кг. Скармливание корня солодки за 6 суток до транспортировки на мясокомбинат показало, что увеличение экспозиции использования корня солодки в различных дозировках оказало положительное влияние на сохранение потерь мясной продуктивности (табл. 2). При этом потери живой массы в контрольной группе составили 27,6 кг (6,43%), а у животных первой, второй, третьей и четвертой опытной групп они были меньше соответственно на 4,8 кг (1,13%); 6,1 кг (1,44%); 7,4 кг (1,73%) и 5,6 кг (1,32%). Наибольшее сокращение потерь мясной продуктивности установлено у молодняка 3-й опытной группы, при ... |
Еще из этого раздела: 2479996 Экологический комплекс для аквакультуры и рекультивации морских вод 2060618 Пневматический высевающий аппарат 2391804 Почвообрабатывающий каток 2229127 Способ испытания растущих деревьев после рубок прореживания и проходных 2154296 Зерноуборочная машина, преимущественно зерноуборочный комбайн, с мультипроцессорным управляющим устройством 2119738 Орудие для уборки грубых кормов 2454066 Светодиодный фитооблучатель 2049387 Инкубатор индивидуального пользования 2228024 Способ профилактики мастита у коров и устройство для его осуществления 2110911 Способ выращивания птицы |
Изобретения в сельском хозяйстве
Обработка почвы в сельском и лесном хозяйствах
Посадка, посев, удобрение
Уборка урожая, жатва
Обработка и хранение продуктов полеводства и садоводства
Садоводство, разведение овощей, цветов, риса, фруктов, винограда, лесное хозяйство
Новые виды растений или способы их выращивания
Производство молочных продуктов
Животноводство, разведение и содержание птицы, рыбы, насекомых, рыбоводство, рыболовство
Поимка, отлов или отпугивание животных
Консервирование туш животных, или растений или их частей
Биоцидная, репеллентная, аттрактантная или регулирующая рост растений активность химических соединений или препаратов
Хлебопекарные печи, машины и прочее оборудование для хлебопечения
Машины или оборудование для приготовления или обработки теста
Обработка муки или теста для выпечки, способы выпечки, мучные изделия
|
|
||