Способ получения пула нормальной плазмыПатент на изобретение №: 2174841 Автор: Шанская А.И., Старицына Н.Н., Папаян Л.П., Иванова Р.П. Патентообладатель: Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Дата публикации: 20 Октября, 2001 Начало действия патента: 6 Июня, 2000 Адрес для переписки: 193024, Санкт-Петербург, ул. 2-я Советская, 16, Рос НИИГТ, Руководителю ОНМПИ И.В.Монахенко ИзображенияИзобретение относится к медицине, а именно к препаратам, используемым в диагностике патологий гемостаза. Способ включает смешение донорской крови с консервантом, содержащим цитрат натрия и азид натрия, отделение плазмы, объединение плазмы, полученной из крови отдельных доноров, и сублимационную сушку плазменного пула в присутствии N-(2-гидроксиэтил)-пиперазин-N'-2- этансульфоновой кислоты. Консервант дополнительно содержит глицерин и аспарагиновую кислоту, или их смесь. N-(2-гидроксиэтил)-пиперазин-N'-2-этансульфоновую кислоту вводят в плазменный пул перед сублимационной сушкой в количестве 3,5-4,5 мг на 1 мл плазмы. Технический результат: снижение расхода N-(2-гидроксиэтил)-пиперазин-N'-2-этансульфоновой кислоты на 1 мл плазменного пула. 1 табл. Изобретение относится к медицине, а именно, к препаратам, используемым в диагностике, и в частности к получению пула нормальной плазмы из донорской крови. Указанный материал находит применение в качестве контрольного материала при исследовании патологий гемостаза, таких как гемофилия А и В, болезнь Виллебранда и других, а также при мониторинге терапии антикоагулянтами различного типа. Качество исследования патологий гемостаза значительно повышается в случае использования в процессе исследования контрольных референтных материалов. Таким контрольным материалом является пул нормальной плазмы, аттестованный по основным параметрам коагулограммы. Пул нормальной плазмы получают из крови не менее чем 20 здоровых доноров в возрасте от 20 до 40 лет, не принимающих медикаменты и контрацептивы. Пул нормальной плазмы характеризуют значениями активированного парциального тромбопластинового времени (АПТВ), протромбинового времени, тромбинового времени и содержания фибриногена. Для использования пула нормальной плазмы в качестве референтного материала эти показатели не должны существенно меняться в процессе хранения пула. Наиболее близким по совокупности существенных признаков к заявляемому изобретению является способ [патент РФ N 1592717, МКИ A 61 K 35/16, опубликованный 1990, БИ N 34] получения пула нормальной плазмы, включающий смешение донорской крови, взятой от отдельных доноров, с раствором-консервантом, отделение плазмы крови, объединение плазмы, полученной из крови отдельных доноров, сублимационную сушку плазменного пула. Раствор-консервант в известном способе содержит растворенные в 100 мл дистиллированной воды 3,8 г цитрата натрия, 1 мл 10%-ного раствора азида натрия, 0,05 мл контрикала и 8,925 г N-(2-гидроксиэтил)- пиперaзин-N'-2-этaнcульфoнoвoй кислоты (сокращенно HEPES). Сублимационную сушку под вакуумом производят при температуре от - 35-58oC до 5oC в течение 36-38 часов. Полученный плазменный пул охарактеризован по следующим параметрам: активность факторов протромбинового комплекса 91% (через 12-14 месяцев хранения 101%), фактора V 99% (94%), VII+X - 98% (102%), pH 7,36 (7,45) и содержание фибриногена 2 г/л (1,5 г/л). Недостатком известного способа получения плазменного пула является очень высокое содержание N-(2-гидроксиэтил)-пиперазин-N'-2-этансульфоновой кислоты в растворе-консерванте: его расход на 1 мл полученной плазмы составляет 26,7 мг. Высокая цена указанного препарата и его большой расход делают известный способ получения плазменного пула нерентабельным, а сам пул плазмы слишком дорогим для использования в практическом здравоохранении. Техническая задача, на решение которой направлено заявляемое изобретение, состоит в снижении расхода HEPES на 1 мл плазменного пула с сохранением показателей референтного материала в пределах нормы. Указанная задача решается тем, что в способе получения пула нормальной донорской плазмы, включающем смешение донорской крови, взятой от отдельных доноров, с консервантом, содержащим цитрат натрия и азид натрия, отделение плазмы крови, объединение плазмы, полученной из крови отдельных доноров, и сублимационную сушку плазменного пула в присутствии N-(2-гидроксиэтил)- пиперазин-N'-2-этансульфоновой кислоты, используют консервант, дополнительно содержащий вещество, выбранное из группы, включающей глицин и аспарагиновую кислоту, или их смесь, а N-(2-гидроксиэтил)-пиперазин-N'-2-этансульфоновую кислоту вводят в объединенный плазменный пул перед сублимационной сушкой в количестве 3,5-4,5 мг на 1 мл плазмы. При получении плазменного пула использовали вещества, выпускаемые промышленностью: - цитрат натрия, ГОСТ 3161-57; - глицин, ГОСТ 5860-68; - аспарагиновая кислота, ТУ 5П-168-69; - вода дистиллированная, ГОСТ 6909-71; - азид натрия фирмы ISN, США, каталожный N 102891; - HEPES фирмы Sigma, США, каталожный N H0891. Донорская кровь отбиралась в соответствии с Инструкцией по медицинскому освидетельствованию доноров плазмы крови и костного мозга, утвержденной MЗ РФ 16.11.98. Далее заявляемый способ иллюстрируется примерами. Пример 1. Готовят консервирующий раствор: 3 г глицина, 3,8 г цитрата натрия, 1 мл 10% раствора азида натрия растворяют в 100 мл дистиллированной воды. Раствор разливают по 2,5 мл в 20 пластиковых центрифужных пробирок. Донорскую кровь от 20 здоровых лиц в возрасте от 20 до 40 лет, не принимающих медикаменты и контрацептивы, берут по 25 мл в центрифужные пробирки с консервирующим раствором. Кровь центрифугируют при 3000 об/мин, 4oC в течение 20 минут. Отбирают плазму и повторно центрифугируют в том же режиме в течение 10 минут. Дважды отцентрифугированную плазму объединяют в один флакон емкостью 500 мл. К пулу плазмы добавляют HEPES из расчета 4 мг HEPES на каждый мл плазмы. Нативный пул разливают по 2 мл в силиконированные флаконы и замораживают при температуре -50oC. Затем кассеты с замороженной плазмой загружают в сублимационный аппарат, полку которого предварительно охлаждают до -40oC. Включают вакуум-насос и понижают давление в сублиматоре до 30,01 мм рт. ст. Через 5 часов после включения вакуум-насоса начинают подогрев полки. Повышение температуры полки производят постепенно для плавного увеличения температуры пула нормальной плазмы. Конечная температура в препарате 10oC. Общая продолжительность сушки 34 часа. Через месяц после получения и через 13 месяцев были определены следующие показатели коагуляции: АПТВ, сек; протромбиновое время (ПВ), сек; тромбиновое время (ТВ), сек; содержание фибриногена, г/л; активность фактора VIII, %; активность фактора IX, %. Показатели коагуляции определялись методами, изложенными в учебном пособии "Гемостаз", под редакцией Н.Н. Петрищева, Л.П. Папаян, Санкт-Петербург, 1999, а также в книге Балуда В.П., Баркаган З.С., Гольдберг Е.Д. и др. "Лабораторные методы исследования системы гемостаза", Томск, 1980. Результаты определения представлены в таблице. Пример 2. Готовят консервирующий раствор: 4 г аспарагиновой кислоты, 3,2 г цитрата натрия, 1 мл 10% раствора азида натрия, 100 мл дистиллированной воды. Раствор разливают по 2,5 мл в 23 пластиковые центрифужные пробирки. Донорскую кровь от 23 здоровых лиц в возрасте от 20 до 40 лет, не принимающих медикаменты и контрацептивы, берут по 25 мл в центрифужные пробирки с консервирующим раствором. Кровь центрифугируют при 3000 об/мин, 6oC в течение 20 минут. Отбирают плазму и повторно центрифугируют в том же режиме в течение 10 минут. Дважды отцентрифугированную плазму объединяют в один флакон емкостью 500 мл. К пулу плазмы добавляют HEPES из расчета 3,5 мг HEPES на каждый мл плазмы. Нативный пул разливают по 2 мл в силиконированные флаконы и замораживают при температуре -60oC. Затем кассеты с замороженной плазмой загружают в сублимационный аппарат, полку которого предварительно охлаждают до -35oC. Включают вакуум-насос и понижают давление в сублиматоре до 40,01 мм рт. ст. Через 5 часов после включения вакуум-насоса начинают подогрев полки. Повышение температуры полки производят постепенно для плавного увеличения температуры пула нормальной плазмы. Конечная температура в препарате 10oC. Общая продолжительность сушки 35 часов. Через 0,5 месяца и через 14 месяцев после получения пула плазмы были определены те же, что и в примере 1, показатели коагуляции. Результаты определения представлены в таблице. Пример 3. Готовят консервирующий раствор: 1,2 г глицина, 2,2 г аспарагиновой кислоты, 3,8 г цитрата натрия, 1 мл 10% раствора азида натрия, 100 мл дистиллированной воды. Раствор разливают по 2,5 мл в 21 пластиковую центрифужную пробирку. Донорскую кровь от 21 здорового лица в возрасте от 20 до 40 лет, не принимающего медикаменты и контрацептивы, берут по 25 мл в центрифужные пробирки с консервирующим раствором. Кровь центрифугируют при 3000 об/мин, 4oC в течение 20 минут. Отбирают плазму и повторно центрифугируют в том же режиме в течение 10 минут. Дважды отцентрифугированную плазму объединяют в один флакон емкостью 500 мл. К пулу плазмы добавляют HEPES из расчета 4,5 мг HEPES на каждый мл плазмы. Нативный пул разливают по 2 мл в силиконированные флаконы и замораживают при температуре -55oC. Затем кассеты с замороженной плазмой загружают в сублимационный аппарат, полку которого предварительно охлаждают до -40oC. Включают вакуум-насос и понижают давление в сублиматоре до 50,01 мм рт. ст. Через 5 часов после включения вакуум-насоса начинают подогрев полки. Повышение температуры полки производят постепенно для плавного увеличения температуры пула нормальной плазмы. Конечная температура в препарате 11oC. Общая продолжительность сушки 36 часов. Показатели коагуляции полученного пула плазмы определяли через 0,5 и через 12 месяцев после получения. Результаты определения представлены в таблице. Как видно из таблицы, полученный заявляемым способом пул нормальной плазмы стабилен при хранении в течение года; при этом не изменяется активность весьма лабильных факторов свертывания VIII и IX. Это позволяет использовать пул, полученный заявляемым способом, для исследования факторов свертывания. Значительное снижение содержания HEPES, использование других недорогих материалов - глицина и аспарагиновой кислоты снижает стоимость контрольного материала и делает его более доступным практическому здравоохранению. Формула изобретенияСпособ получения пула нормальной плазмы путем смешения донорской крови, взятой от отдельных доноров с консервантом, содержащим цитрат натрия и азид натрия, отделение плазмы крови, объединение плазмы, полученной из крови отдельных доноров, и сублимационную сушку плазменного пула в присутствии N-(2-гидроксиэтил)-пиперазин-N'-2-этансульфоновой кислоты, отличающийся тем, что используют консервант, дополнительно содержащий вещество, выбранное из группы, включающей глицин и аспаргиновую кислоту, или их смесь, а N-(2-гидроксиэтил)-пиперазин-N'-2-этансульфоновую кислоту вводят в объединенный пул перед сублимационной сушкой в количестве 3,5-4,5 мг на 1 мл плазмы.Популярные патенты: 2495556 Секционный отсекатель дозатора и сельскохозяйственный агрегат, содержащий его ... навигационная система GPS или ГЛОНАСС обнаруживает, что часть указанного сельскохозяйственного агрегата недавно уже прошла по конкретному участку.7. Сельскохозяйственный агрегат по п.1, в котором указанное средство автоматического подъема содержит множество гидравлических цилиндров, оперативно соединенных с соответствующими из указанного множества монтажных рычагов для поднятия и опускания указанных монтажных рычагов, и дополнительно содержит средства, приспособленные для приведения в движение указанных гидравлических цилиндров после получения входного сигнала от указанной навигационной системы GPS или ГЛОНАСС. 8. Сельскохозяйственный агрегат для внесения в почву материала, ... 2054429 Способ получения антисептика для защиты древесины ... массу опасных для дерева и других природных материалов видов плесневых грибков, например, coniophora cerebella, aspergillus, penicillium, paecilomyces, scopulariopsis. Помимо противогрибковых свойств данный препарат обладает выраженной бактерицидной активностью, что позволяет применять его в качестве биоцидного компонента целого ряда технических составов, например, смазочно-охлаждающих жидкостей, дезинфицирующих препаратов и т. д. Установлено, что полученный препарат (10-12%-ный водный раствор) подавляет жизнедеятельность целой группы культур бактерий: pseudomonos, desulfobrio, eschperichia, achromobacter, acrobacter и др. Препарат является также достаточно эффективным ... 2025945 Способ выращивания насаждений сосны ... способ не учитывает режима густоты выращивания древостоев после 25-30 лет. А к этому времени, в результате полного смыкания крон, вводимый кустарник, как правило, выпадает из насаждения и понижает рекреационные свойства насаждения. Не все кустарники могут использоваться в рассматриваемой схеме (например лещина). Чрезмерное уплотнение лещиной главной породы в рядах может заглушать ее. К тому же лещина дорогостоящий посадочный материал, а его использование по данной схеме неэффективно. Целью изобретения является формирование сложного сосняка в свежем сугрудке - С2 с повышенными рекреационными свойствами и совмещение ведения хозяйства на пиловочник и "орех" в связи с ограничением ... 2254705 Способ уплотнения и герметизации консервируемых кормов в рулонах ... водокольцевой насос типа ВВН-1 производительностью 60 м3 в час и мощностью 4 кВт для доильных установок. Для герметичной упаковки рулонов уплотняющим колпаком используют зажим 25 (фиг.5, 6). Для захвата рулонов и установки их на устройство, укладки их в штабель и выгрузки их из него используют тракторный погрузчик типа ПКУ-0,8, оснащенный специальным захватом 26 (фиг.4, 8). Захват-кантователь (не показан) должен обеспечивать захват рулонов за боковую поверхность и поворот на 90-180° вокруг продольной оси погрузчика.Способ уплотнения и герметизации консервируемых кормов в рулонах осуществляется посредством данного устройства следующим образом.Сформированные рулоны, ... 2271095 Многофункциональное устройство ... поворота 14, а с помощью ручки 17 поворачивают ось 14 с закрепленным на ней приводом 5 и рабочим органом 4 до вертикального положения ротора 10. Фиксируют устройство затяжкой гаек 18 и 23. При вращении ротора 10 с измельчающими элементами 11 происходит измельчение материала 26, поступающего из бункера 7а при открытой заслонке 27.Для получения большой степени измельчения достаточно произвести наклон ротора на небольшой угол от 0 до 90° (в зависимости от желаемой степени измельчения) так же, как описано выше.Повернув рабочий орган 4 с приводом 5 на больший угол - около 180° и установив вместо решета 8а вставку 7в (фиг.3), можно измельчать и другие материалы, например, ... |
Еще из этого раздела: 2019938 Рабочий орган почвообрабатывающей машины 2124290 Препаративная форма в виде раствора для местного применения для обработки животных (варианты), способ получения и способ обработки животных (варианты) 2450505 Порционное устройство для вытирания семян трав 2197082 Установка для охлаждения молока с использованием естественного холода 2102853 Питательное устройство для растений 2477036 Агрегат для предпосевной обработки почвы и посева 2060651 Бытовой инкубатор 2048752 Дождевальная машина 2120753 Способ получения пестицидного водного суспензионного концентрата и пестицидный водный суспензионный концентрат 2427121 Почвообрабатывающий агрегат |