Питательная среда для индукции каллуса и микроклонального размножения персика из незрелых зародышейПатент на изобретение №: 2128429 Автор: Фардзинова И.М. Патентообладатель: Горский государственный аграрный университет Дата публикации: 10 Апреля, 1999 Адрес для переписки: 362040, Владикавказ, ул.Кирова, 37, Горский ГАУ ИзображенияИзобретение относится к сельскому хозяйству и предназначено для ускоренного размножения посадочного материала персика на основе незрелых зародышей. Предлагаемая питательная среда составлена по прописи среды Мурасиге-Скуга (1962), содержит в качестве стимулятора роста сок каланхоэ. Использование сока каланхоэ позволяет значительно сократить сроки формирования узелкового каллуса, обладающего высоким регенерационным потенциалом, и в несколько раз повысить коэффициент размножения исходного материала. 2 табл. ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУИзобретение относится к сельскому хозяйству и может быть использовано для ускоренного размножения посадочного материала персика на основе культуры тканей зиготических незрелых зародышей. Известны питательные среды для получения каллуса и дополнительных побегов нормальных параметров /Davidson O.W. The germination of "non-viable" peache seeds - Proc. Am. Soc. Hor. v. 30, 193; Zosley J.W. The development of normal peach seedling. - Am. Sci. 1952 Здруйковская - Рихтер А.И. Воспитание зародышей разносозревающих сортов персика in vitro. - В кн. Труды Гос. Никит. бот. сада, 36, 1962/. Недостатками этих сред являются длительный период выращивания культур, часто встречающаяся витрифицированность побегов, сравнительно невысокий процент размножения, дороговизна добавляемых в питательные среды стимуляторов роста. Наиболее близкой по технической сущности к изобретению является классическая питательная среда Мурансиге-Скуга /1962/ в полном объеме /Hammerschlang F. , Bauchan J. Scorja R. Regeneration of peach plants from callus dereved from immature embryos. Theor. and app. Jenet. 70, N 3, 1985, p. 248-251/. Состав среды прототипа, в переводе миллимолей на мг/л: NH4NO3 - 1650 KNO3 - 1900 CaCl22H2O - 440 MgSO47H2O - 370 KH2PO4 - 170 H3BO3 - 6,2 MnSO44H2O - 22,3 CoCl26H2O - 0,025 CuSO45H2O - 0,025 ZnSO47H2O - 8,6 NaMoSO47H2O - 0,25 Источники микроэлементов: Kl - 0,83 FeSO47H2O - 27,8 Na2 ЭДТА2H2O - 37,3 Органические вещества: Тиамин хлорид - 0,2 Пиридоксин - 0,5 Никотиновая кислота - 0,5 Мезоинозит - 100 2,4-Д - 1 6-БАП - 0,1 Сахароза - 30000 Агар - 6000 Недостатками данной среды является невозможность получения узелкового каллуса с высокой регенерационной способностью. На данной среде получали только рыхлый каллус, и для преобразования его в узелковый был необходим перенос на питательную среду несколько иного состава, т.е. создавался дополнительный этап в цикле культивирования, связанный с растяжением срока регенерации и дополнительными расходами. Целью изобретения является сокращение срока получения каллуса, обладающего высокой регенерационной способностью, уменьшение срока микроклонирования, уменьшение себестоимости питательной среды. Цель достигается тем, что предлагаемая питательная среда, составленная по основной прописи среды Мурасиге-Скуга, в качестве стимулятора роста содержит сок каланхоэ 2-5 мг/л, выпускаемый медицинской промышленностью для лечебных целей. Благодаря новой совокупности компонентов достигается положительный эффект, а именно - значительно сокращаются сроки получения каллуса с высокой регенерационной способностью, тем самым повышается коэффициент размножения и эффективность выхода побегов нормальных параметров. Пример. Проводили исследования развития узелкового каллуса из незрелых зародышей персика - сорт Алая Заря. От свободно опыляемых деревьев зародыши брались спустя 50 дней после полного цветения. Ткань перикарпия срезалась, после чего семена стерилизовали 15 мин в 0,5% р-ре гипохлорита натрия, трижды промывались стерильной дистиллированной водой. В асептических условиях незрелые зародыши вычленяли, в 2-3 местах делали неглубокие надрезы и высаживали на питательные среды составов, приведенных в табл. 1 (см. в конце описания). Маточные растворы макро- и микросолей, витаминов и регуляторов роста готовили на бидистиллированной воде. Питательные среды готовили общепринятыми методами. Автоклавирование проводили при 1 атм в течение 20 мин, пробирки с эксплантами ставили в термокамеру. Условия культивирования были следующими: температура 23-25oС, длительность светового периода 16 ч, освещенность 1500 лк, влажность 70%. Через 15-18 дней каждый эксплант образовывал в местах надрезов узелковый каллус. Для получения побегов сформировавшийся каллус пересаживали на свежую питательную среду такого же состава, в результате чего через 20-25 дней каждый комочек каллуса образовывал до 10-17 побегов длиной 20-30 мм. Регенераты укоренили и высадили в теплицу. Число хромосом всех растений было диплоидным 2n=2x=16. В таблице 2 представлены основные параметры развития узелкового каллуса при выращивании на испытуемых питательных средах с различным содержанием сока каланхоэ. Из табл. 2 следует, что питательная среда предлагаемого состава обеспечивает значительное по сравнению с прототипом сокращение сроков образования узелкового каллуса до 15,2-0,7 дней вместо 90-100, увеличение коэффициента размножения до 1:30-35, а также повышение эффективности выхода стандартных черенков для укоренения в грунте. Использование изобретения позволяет сократить сроки получения каллуса, обладающего большим регенерационным потенциалом и, тем самым, сократить сроки размножения побегов, повысить эффективность процесса дифференциации эксплантов независимо от генотипа, увеличить общую производительность селекционного процесса от высадки незрелых зародышей на питательную среду от укоренения регенерантов, значительно снизить себестоимость среды.ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯПитательная среда для индукции каллуса и микроклонального размножения персика из незрелых зародышей, содержащая аммоний азотнокислый, калий азотнокислый, кальций хлористый двухводный, магний сернокислый семиводный, калий фосфорнокислый однозамещенный, борную кислоту, марганец сернокислый четырехводный, цинк сернокислый семиводный, натрий молибденовокислый двухводный, калий йодистый, медь сернокислую пятиводную, кобальт хлористый шестиводный, железо сернокислое семиводное, мезоинозит, сахарозу, тиамин хлорид, пиридоксин хлорид, никотиновую кислоту, агар, стимулятор роста и воду бидистиллированную, отличающаяся тем, что в качестве стимулятора роста она содержит сок каланхоэ при следующем соотношении компонентов, мг/л: Аммоний азотнокислый - 1640 - 1660 Калий азотнокислый - 1800 - 2000 Кальций хлористый двухводный - 430 - 460 Магний сернокислый семиводный - 360 - 385 Калий фосфорнокислый однозамещенный - 160 - 190 Борная кислота - 6,0 - 7,0 Марганец сернокислый четырехводный - 22,0 - 22,7 Кобальт хлористый шестиводный - 0,02 - 0,03 Медь сернокислая пятиводная - 0,02 - 0,03 Цинк сернокислый семиводный - 8,0 - 9,4 Натрий молибденовокислый двухводный - 0,2 - 0,35 Калий йодистый - 0,8 - 0,9 Железо сернокислое семиводное - 27,0 - 33,0 Тиамин хлорид - 0,2 Пиридоксин хлорид - 0,5 Никотиновая кислота - 0,5 Мезоинозит - 100 Сок каланхоэ - 2,0 - 5,0 Сахароза - 30000 Агар - 6000 Вода бидистиллированная - ОстальноеПопулярные патенты: 2411718 Устройство для внутрипочвенного импульсного дискретного полива растений ... практически совпадает с окружной скоростью опорной поверхности колеса шасси. По фиг.2 в исходном положении выдвижной шприц 10 расположен в механической направляющей системе выдвижного шприца 11 так, что гидравлическое уплотнительное кольцо 14 занимает позицию напротив выступа зуба зубчатой рейки линейного реверсивного сервопривода выдвижного шприца 10.По фиг.1 блок управления 3 циклически вырабатывает сигнал управления, по которому шприцевой элемент 7 из исходного положения выдвижного шприца 10 над почвой в позиции 7 заглубляет выдвижной шприц 10 в почву в позиции 7.1. По фиг.2 заглубление в почву выдвижного шприца 10 происходит следующим образом. Включается сервопривод 15. ... 2437262 Культиватор-плоскорез ... машин. М.: Агропромиздат, 1989. - С. 16-22.2. Рекламный проспект группы компаний Агро-мастер «Сберегающие почвообрабатывающие системы». - С.6. Формула изобретения 1. Культиватор-плоскорез, содержащий присоединительное устройство, шарнирно сопряженные центральную и боковые секции с рамами и плоскорезными лапами, опорно-транспортные колеса и механизмы перевода из рабочего положения в транспортное и обратно, отличающийся тем, что расстояние от нижней плоскости балок рамы, несущих лапы, до опорной плоскости лап составляет 0,65... 0,85 ширины междуследия лап, превышающего максимальную глубину обработки лапами не более чем в 6 раз, а центральная секция снабжена ... 2413409 Способ и устройство для уплотнения убранной массы для получения силоса ... в силосной траншее или наземном силосохранилище с использованием рабочей сельхозмашины, оснащенной уплотнительным устройством, характеризуется тем, что укладываемую отдельными слоями убранную массу уплотняют посредством, по меньшей мере, одного уплотнительного элемента, причем, по меньшей мере, один уплотнительный элемент передает нагрузку на убранную массу и движется относительно нее. За счет того, что укладываемую отдельными слоями убранную массу уплотняют посредством уплотнительного устройства, причем уплотнительное устройство передает нагрузку на убранную массу и движется относительно нее, выгодным образом надежно обеспечивается равномерное по всей поверхности и достаточное ... 2384052 Способ повышения эмбриональной жизнеспособности и естественной резистентности цыплят-бройлеров ... шт. яиц) расходуется 80 мл раствора лимонтара. Препарат разводится в воде (10 мг на 100 мл воды - 0,1% раствор, 55 мг на 100 мл воды - 0,55% раствор) и с помощью пульверизатора наносится на яйца.Предлагаемый способ иллюстрируется следующими примерами взаимодействия органических кислот (см. Приложение). Указанный способ 1 (применение 0,02-0,2% растворов янтарной кислот перед инкубацией) позволяет повысить выводимость яиц на 4-6% по сравнению с контролем.Предлагаемый способ обработки инкубационных яиц экономичен, лимонтар не токсичен, высокоактивен, используется в медицине и показан в качестве средства для повышения неспецифической реактивности организма беременных женщин, улучшения ... 2200377 Сельскохозяйственный агрегат ... которой установлены плужные корпусы и расположенные в горизонтальной плоскости с возможностью поворота вокруг и перестановки вдоль своих продольных осей передний и задний брусья, на бороздных концах которых установлены с возможностью поворота вокруг и перестановки вдоль осей стойки с прикрепленными к ним соединительными узлами концов свободно вращающегося цепного модуля с рыхлящими зубьями на звеньях цепи (см. патент Украины 17384, по классу А 01 В 49/02, опубликованный 29.08.97 в Бюл. 5). Основным недостатком этого сельскохозяйственного агрегата является высокая вероятность его поломки при использовании на кочковатом грунте, что обусловлено несовершенством его конструкции. Этот ... |
Еще из этого раздела: 2259028 Устройство для безотвальной обработки почвы 2177226 Способ защиты растений от болезней, регулирования их роста и защитно-стимулирующий комплекс для его осуществления 2175477 Способ борьбы с тлями 2112361 Контроллер программируемого управления поливом 2158069 Способ повышения урожайности сельскохозяйственных культур 2440708 Комбинированное устройство для ротационного внутрипочвенного рыхления 2016512 Средство для борьбы против стресса у рыб и способ борьбы со стрессом у рыб 2459398 Способ рекультивации почв, загрязненных минерализованными водами 2263431 Устройство для предпосевной обработки семян 2261583 Выгрузное устройство бункера зерноуборочного комбайна |