Способ повышения жизнеспособности рыб и рыбообразных на ранних стадиях развитияПатент на изобретение №: 2115308 Автор: Баранникова Ирина Алексеевна, Дюбин Валентин Павлович, Коваленко Римма Ивановна, Тренклер Игорь Владимирович, Попов Станислав Михайлович, Семенкова Татьяна Борисовна Патентообладатель: Баранникова Ирина Алексеевна, Дюбин Валентин Павлович, Коваленко Римма Ивановна, Тренклер Игорь Владимирович, Попов Станислав Михайлович, Семенкова Татьяна Борисовна Дата публикации: 20 Июля, 1998 Адрес для переписки: подача заявки21.07.1994 публикация патента20.07.1998 Изображения   Изобретение предназначено для повышения жизнеспособности личинок и молоди рыб и рыбообразных и может быть использовано в рыбоводстве, что позволяет решить задачу повышения резистентности объектов к воздействию стрессорных факторов различной природы. Способ предусматривает добавление в водную среду биологически активного вещества, полученного путем лиофилизации кислотного экстракта ткани пинеальной железы, и выдерживание рыб и рыбообразных в указанном водном растворе в течение 1 - 1,5 ч при концентрации раствора 10 - 50 мг/л. 4 табл. , , ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУИзобретение относится к способам повышения выживаемости и жизнеспособности личинок и молоди рыб и рыбообразных в условиях воздействия стрессорных факторов, возникающих в процессе пересадки, сортировки, транспортировки рыб, а также при воздействии некоторых токсикантов, загрязняющих водную среду, и может быть использовано в рыбоводстве. В настоящее время для повышения выживаемости и жизнестойкости рыб на ранних стадиях развития широко известно использование биологически активных веществ, влияющих на физиологические процессы у рыб. Известен способ выращивания молоди рыб карпа и форели, который включает кормление рыб кормом, содержащим биологически активное вещество, в качестве которого использован порошок, полученный путем лиофилизации водно-спиртового экстракта тканей растения Serratula inermis, при этом его вводят в корм в количестве 0,002 - 0,003 мг/кг, кормление карпа осуществляют в течение 100 сут, а форели - 120 сут [1]. Для стимуляции жизненных процессов по данному способу используют препарат, содержащий в основном гормоны стероидной природы. Однако такие вещества накапливаются в организме и не выводятся, при длительном употреблении могут воздействовать на геном клетки и способствовать появлению мутаций. Кроме того, способ неудобен тем, что предполагает длительный срок кормления (100 - 120 сут). Известен способ повышения жизнестойкости рыб путем обработки икры биологически активным веществом в водной среде [2]. По данному способу с целью увеличения выживаемости икры и личинок рыб при токсикологической ситуации икру обрабатывают раствором витамина B12 в количестве 0,4 - 1,0 мг/л воды в течение 2-6 ч. Однако использование данного способа затруднено в промышленных условиях, так как витамин B12 относится к веществам, трудно растворимым в воде. Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому является способ стимуляции физиологических процессов у рыб на ранних стадиях развития, который выбран за прототип [3]. По данному способу икру и личинки рыб, преимущественно лососевых, выдерживают в водном растворе биологически активного вещества, в качестве которого используют синтетический аналог энкефалина - (Д-Ала)2-(Д-Арг)6-Лей-энкефалин ("даларгин"), при этом указанное вещество добавляют до концентрации его в воде 1-10 мг/л, выдерживание объектов осуществляют в течение 1-4 ч. Даларгин представляет собой низкомолекулярное соединение пептидной природы и относится к нейропептидам, которые обладают широким спектром эффектов, в том числе воздействуют на нервную систему организма. Обработка даларгином увеличивает жизнеспособность икры и личинок, стимулирует их рост. При этом даларгин не накапливается в организме рыб, не вызывает аллергических реакций. Однако указанный способ используется для стимуляции физиологических процессов у рыб на ранних стадиях онтогенеза (икры, предличинок, личинок) и не предполагает обработку молоди рыб. При этом способ предназначен для повышения выживаемости и стимуляции развития рыб, но не предусматривает повышение устойчивости рыб к кратковременным стрессорным воздействиям. Между тем для промышленного рыбоводства актуальной задачей является повышение резистентности как личинок, так и молоди рыб к воздействию стрессорных факторов, связанных с пересадкой, сортировкой, транспортировкой рыб, а также к воздействию химических стрессорных факторов (токсикантов), загрязняющих водную среду. Предлагаемый способ решает задачу повышения жизнеспособности рыб и рыбообразных за счет увеличения резистентности объектов (личинок и молоди рыб) к воздействию стрессорных факторов различной природы путем обработки их биологически активным веществом, выделенным из ткани пинеальной железы. Указанный биотехнологический результат достигается тем, что личинок или молодь рыб и рыбообразных выдерживают в водном растворе биологически активного вещества, представляющего собой комплекс пептидов, полученный путем лиофилизации кислотного экстракта ткани пинеальной железы крупного рогатого скота, при этом концентрацию раствора устанавливают 10-50 мг/л, а экспозицию объектов в растворе осуществляют в течение 1-1,5 ч. Используемое в предлагаемом способе биологически активное вещество получают следующим образом. Ткань пинеальной железы крупного рогатого скота гомогенизируют, проводят двукратную экстракцию 0,1-1,0 н. водным раствором перхлорной кислоты при температуре 2-6oC в течение 12-48 ч, после чего полученный экстракт нейтрализуют водным раствором гидроокиси калия, осуществляют очистку и выделение полученного препарата прогреванием и двойной лиофилизацией нейтрализованного экстракта. В результате выделяется вещество, представляющее собой комплекс пептидов, содержащий 5 - 22 фракции, основную массу (70-80%) комплекса составляют пептиды мол. м. 1000 - 4500 Дальтон. Полученный продукт является аморфным веществом белого или слегка желтоватого цвета, хорошо растворимым в воде, слабой щелочи и солевых растворах. Препарат эффективно применяли ранее для стимуляции роста и иммунной активности, подавления половых функций различных представителей позвоночных животных (грызуны, птицы). Выдерживание личинок и молоди рыб и рыбообразных в водном растворе комплекса пептидных фракций, полученного из пинеальной ткани, основано на том, что пептиды, проникая в организм рыб и рыбообразных, вызывают изменения метаболических процессов, способствующих оптимизации механизмов нейроэндокринной регуляции жизнедеятельности. В результате повышается адаптация организмов к воздействию стрессорных факторов различной природы и тем самым повышается жизнеспособность рыб и рыбообразных. В связи с тем, что используемый комплекс пептидов влияет на метаболические процессы и нейроэндокринную систему, обработке водным раствором комплекса пептидов подвергают рыб и рыбообразных как на самых ранних стадиях развития, так и в то время, когда в организме уже сформированы и функционируют основные элементы указанных систем, то есть обрабатывают и молодь. Использование в качестве биологически активного вещества не индивидуального пептида, а комплекса пептидных фракций, вызывает сбалансированную ответную реакцию различных систем организма, что обеспечивает эффективность увеличения жизнеспособности рыб и рыбообразных и повышает надежность способа. Выбор концентрации водного раствора препарата, используемого в данном способе, обусловлен тем, что максимальный эффект повышения жизнеспособности рыб и рыбообразных наблюдался при концентрации 10-50 мг/л. Повышение концентрации раствора более 50 мг/л не приводило к заметному повышению положительного эффекта способа. При концентрации раствора менее 10 мг/л способ оказывается малоэффективным. Время экспозиции рыб и рыбообразных в водном растворе препарата выбрано 1-1,5 ч, так как это время обеспечивает достаточно полное проявление биологического эффекта. Увеличение времени более 1,5 ч не приводит к заметному усилению эффекта обработки рыб и рыбообразных указанным раствором препарата. Способ осуществляют следующим образом. В емкость с водой добавляют аморфное вещество белого или желтоватого цвета, хорошо растворимое в воде, представляющее собой биологически активный препарат, полученный из пинеальной ткани по приведенной ранее методике. Концентрацию водного раствора препарата в емкости устанавливают 10-50 мг/л. Личинки или молодь рыб (рыбообразных) помещают в данную емкость и выдерживают их в указанном растворе в течение 1-1,5 ч. После этого рыб (рыбообразных) вынимают из емкости с раствором и переводят в чистую воду. Пример 1. Осуществляли обработку личинок стерляди предлагаемым способом с целью повышения их жизнеспособности к хендлингу, который является стрессорным фактором для рыб. Опытные группы личинок стерляди в возрасте 8, 12 и 20 сут помещали в емкость с водой, в которой предварительно растворили биологически активный препарат, содержащий комплекс пептидов, полученный из ткани пинеальной железы. Концентрацию препарата в растворе устанавливали 10 мг/л для одних опытных групп и 50 мг/л для других опытных групп. Время экспозиции личинок в указанных растворах составило 1 ч. По окончании экспозиции личинки подвергали стрессу, возникающему в связи с пересадкой личинок. Для этого многократно отлавливали личинок сачком и переносили из одной емкости в другую с чистой водой. После окончания стрессорного воздействия личинки помещают в обычную водную среду. Спустя 24 ч после указанной процедуры в каждой группе определяли выживаемость объектов, для чего подсчитывали количество выживших личинок и вычисляли процентное отношение выживших личинок к общему количеству личинок, участвовавших в опыте. Для сравнения брали контрольные группы личинок стерляди, содержащие такое же количество личинок в возрасте 8, 12 и 20 сут, что и опытные группы. Контрольных личинок выдерживали 1 ч в обычной водной среде, после чего их также подвергали стрессорному воздействию, возникающему при многократной пересадке личинок из емкости в емкость. После окончания воздействия контрольных личинок помещали в обычную водную среду. Спустя 24 ч после окончания стрессорного воздействия аналогичным образом (как для опытных групп личинок) определяли выживаемость контрольных личинок. Результаты исследований приведены в табл. 1. В табл. 1-4 имеются следующие сноски: х достоверность отличия результатов измерения, полученных для личинок в данной опытной группе, от результатов измерения, полученных для контрольных личинок, находится на уровне p < 0,05; хх достоверность отличия находится на уровне p < 0,01; ххх достоверность отличия находится на уровне p < 0,001. Как следует из табл.1, выживаемость личинок, обработанных предлагаемым способом в растворе препарата с концентрацией 10 мг/л, достоверно выше во всех группах опытных личинок, чем у контрольных личинок. Для личинок, обработанных в растворе препарата с концентрацией препарата 50 мг/л, выживаемость достоверно выше оказалась в группе, содержащей 50 личинок в возрасте 20 сут. В целом можно сделать вывод о положительном влиянии обработки личинок стерляди по предлагаемому способу на повышение их жизнеспособности в случае воздействия стрессорного фактора - хендлинга. Пример 2. Осуществляли обработку молоди гибрида осетра и белуги с целью повышения ее жизнеспособности после воздействия стрессорного фактора - асфиксии. Об устойчивости рыб к асфиксии судили по времени восстановления их двигательной активности. Группу рыб, содержащую 9 шт. молоди гибрида осетра и белуги в возрасте 9-10 мес, помещали в кюветы с водой, разделенные на ряд секторов. Регистрировали двигательную активность каждой рыбы, подсчитывая количество пересечений ею границ секторов за 1 мин. После регистрации исходной двигательной активности рыб подвергали асфиксии, для чего извлекали их из воды и выдерживали на воздухе в течение 2-2,5 мин (в зависимости от размера рыбы). После выдерживания на воздухе рыб вновь возвращали в кюветы. В течение 10-20 с рыбы совершали судорожные движения, а затем теряли подвижность на несколько минут. После этого рыбы вновь начинали плавать. Определяли время восстановления двигательной активности для каждой рыбы, регистрируя период времени (мин), в течение которого количество пересечений рыбой границ секторов в кювете за 1 мин составило 30-60% от исходного количества пересечений, совершаемых рыбой до асфиксии. Каждую рыбу обрабатывали предлагаемым способом, для чего рыб погружали в емкость, содержащую водный раствор препарата, полученного из пинеальной ткани. Концентрацию препарата в растворе устанавливали 50 мг/л, время экспозиции рыб в растворе препарата составило 1,5 ч. Вынимали рыб из емкости и вновь подвергали их асфиксии, для чего выдерживали рыб на воздухе в течение 2-2,5 мин. После окончания стрессорного воздействия рыб помещали в кюветы с секторами, заполненные обычной водной средой. Аналогичным образом, как указано выше, определяли время восстановления двигательной активности для каждой рыбы. Результаты испытаний представлены в табл.2. Как следует из табл.2, двигательная активность рыб после экспозиции их в растворе препарата, полученного из пинеальной железы, восстанавливалась значительно быстрее, чем без экспозиции. Таким образом, можно сделать вывод о положительном влиянии обработки рыб предлагаемым способом на повышение их устойчивости к асфиксии. Пример 3. Осуществляли обработку молоди гибрида белуги и осетра предлагаемым способом с целью повышения устойчивости их организма к наркотическому воздействию менокаина, используемого в рыбоводстве, в частности, при транспортировке рыбы, сортировке, мечении. Устойчивость к наркотическому воздействию определяли по времени восстановления двигательной активности рыб в чистой воде после полной анестезии их менокаином. Исследовали контрольную группу рыб, содержащую 7 шт. молоди гибрида белуги и осетра. Подвергали контрольных рыб полной анестезии водным раствором менокаина в концентрации 220 мг/л (I анестезия). После анестезии рыб опускали в аквариум с чистой водой и определяли время восстановления двигательной активности каждой рыбы, регистрируя период времени (мин), в течение которого рыбы впервые, после полной неподвижности, начинают поступательно перемещаться в толще воды. Через 1 сут после начала эксперимента проводили повторную анестезию рыб раствором менокаина (II анестезия) и вновь регистрировали время восстановления их двигательной активности. Через 6 сут после начала эксперимента вновь проводили анестезию рыб раствором менокаина (III анестезия) и определяли время восстановления их двигательной активности. Исследовали две опытные группы рыб, содержащие по 5 шт. молоди гибрида белуги и осетра. Опытные группы рыб обрабатывались предлагаемым способом, для чего рыб помещали в емкости, содержащие водный раствор препарата, полученного из пинеальной ткани. Концентрацию препарата в растворе для одной группы рыб устанавливали 10 мг/л, для другой группы - 50 мг/л. Время экспозиции рыб в растворе препарата составило 1 ч. После окончания экспозиции рыб в растворе препарата осуществляли их полную анестезию раствором менокаина концентрацией 220 мг/л (I анестезия). После анестезии рыб переводили в емкости с чистой водой и определяли время восстановления двигательной активности каждой рыбы аналогично определению для контрольных рыб. Через 1 сут осуществляли повторную анестезию опытных рыб раствором менокаина (II анестезия) и определяли время восстановления их двигательной активности. Через 6 сут для опытной группы рыб, обработанных препаратом концентрацией 50 мг/л, осуществляли анестезию рыб раствором менокаина (III анестезия) и определяли время восстановления их двигательной активности. Результаты исследования представлены в табл. 3. Как следует из табл.3, после I-й анестезии отмечалась явная тенденция к снижению времени восстановления двигательной активности в каждой опытной группе рыб, обработанных предлагаемым способом. Достоверное снижение времени восстановления двигательной активности (P < 0,01) выявлено для опытной группы рыб, обработанных препаратом концентрацией 50 мг/л после II-й и III-й анестезии. Таким образом, обработка молоди гибрида белуги и осетра предлагаемым способом повышает их устойчивость к наркотическому воздействию. Пример 4. Осуществляли обработку личинок и молоди различных видов рыб и рыбообразных с целью повышения их устойчивости к воздействию стрессорного фактора химической природы. Опытные группы личинок или молоди различных видов рыб или рыбообразных (минога) обрабатывали предлагаемым способом, выдерживая их в течение 1 ч в емкостях, содержащих водный раствор препарата, полученного из пинеальной ткани. Концентрацию препарата в растворе устанавливали в диапазоне 10-50 мг/л. Контрольные группы рыб, содержащие то же самое количество личинок или молоди того же вида и возраста, выдерживались такое же время в обычной воде без добавления препарата. После этого в емкости, содержащие группы контрольных и обработанных препаратом личинок или молоди, добавляли раствор токсиканта (медный купорос) до концентрации 2-10 мг CuSO4 5H2O/л воды (сублетальная или летальная доза). Продолжительность выдерживания личинок или молоди рыб в растворе медного купороса 1 - 6,5 ч. Определяли выживаемость объектов исследования, подсчитывая процентное отношение выживших объектов к исходному количеству объектов в каждой группе. Выживаемость объектов определяли в течение нескольких суток (1 - 14 сут) после окончания воздействия, а также во время воздействия CuSO4 (для некоторых групп объектов). Результаты исследования представлены в табл. 4. Как следует из табл. 4, для всех видов объектов отмечено достоверное увеличение выживаемости объектов, обработанных предлагаемым способом, по сравнению с контрольными группами. Следовательно, обработка рыб и рыбообразных предлагаемым способом положительно сказывается на повышении жизнеспособности к воздействию стресса химической природы - токсикации CuSO4. Как следует из приведенных примеров, предлагаемый способ оказывает положительное влияние на повышение жизнеспособности рыб и рыбообразных на ранних стадиях развития. При этом важным преимуществом данного способа является повышение резистентности организмов личинок и молоди рыб и рыбообразных к воздействию стрессорных факторов различной природы, которые испытывают рыбы и рыбообразные при пересадке, сортировке, транспортировке, асфиксии, а также к наркотическим воздействиям и некоторым химическим загрязнениям. Способ безопасен, так как используемый в нем комплекс пептидов, выделенный из пинеальной ткани, не накапливается в организме, не оказывает вредное влияние на ДНК, не вызывает аллергических реакций. Способ прост, удобен для использования в промышленных условиях, экономичен и экологически безопасен, так как в нем используется не синтетический, а натуральный препарат с высокой биоразлагаемостью. Способ имеет широкую область применения, так как в нем используется препарат, не обладающий видовой специфичностью. Источники информации. 1. Авторское свидетельство СССР N 1671210, кл. A 01 K 61/00. 2. Авторское свидетельство СССР N 1243667, кл. A 01 K 61/00. 3. Авторское свидетельство СССР И 1286138, кл. A 01 K 61/00.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯСпособ повышения жизнеспособности предличинок, личинок и молоди рыб и рыбообразных (на ранних стадиях их развития) путем добавления в водную среду биологически активного вещества и выдерживания объектов в полученном растворе в течение 1,0 - 1,5 ч, отличающийся тем, что в качестве биологически активного вещества используют комплекс пептидов, полученный путем лиофилизации кислотного экстракта ткани пинеальной железы, при этом добавление указанного вещества проводят до концентрации 10 - 50 мг/л.Популярные патенты: 2218755 Способ длительного клонирования пайзы (echinochloa frumentacea link) ... регенерация создают предпосылки для длительного, исчисляемого годами, получения клонов регенерантов пайзы. Пример. Простерилизованные в 96% этиловом спирте (1 мин) и 0,5% растворе хлоргексидиндиглюконата натрия (10 мин) зрелые семена пайзы помещали на среду 2КС. В этих условиях одна часть семян прорастала, а на других семенах наблюдалось образование каллусов (12,2%). Каллусы формировались за счет дедифференциации тканей проростков. Полученные каллусы, за редким исключением, не имели морфогенных свойств. После их пересадки на свежие среды формировались морфогенные каллусы (62,5%) с различными типами тканей. На поверхности недифференцированной каллусной массы образовывались участки с ... 2201069 Травяное покрытие на основе гибкого полотна ... известным способом с помощью известных технических средств, преимущественно иглопрокалыванием, или прошиванием, или при необходимости - двумя этими способами одновременно. Средний слой покрытия содержит семена преимущественно любых многолетних трав. Сущность изобретения заключается в том, что в предлагаемом покрытии между верхним и нижним полотнами, изготовленными, например, из льноволокна, предусмотрено размещение питательной смеси слоем 2-10 мм на основе произвесткованного торфа с добавлением сложного минерального удобрения, содержащего азот, фосфор, калий, или любого биоорганического удобрения - биокомпоста непосредственно с семенами растений, например многолетних трав. Норма ... 2121263 Способ лесоводственной оценки технологического комплекса машин ... в соответствии с предъявляемыми требованиями. Источники информации 1. Указания по освидетельствованию мест рубок, подсочки (осмолоподсочки) насаждений и заготовки второстепенных лесных материалов. - М.: ЦБНТИ Гослесхоза СССР, 1984, с. 39. 2. Правила рубок главного пользования в равнинных лесах европейской части Российской Федерации. - М.: 1994, 32 С. (Утверждены приказом ФС ЛХ России от 31 августа 1993 г. N 226). 3. Лесоводственные требования к технологическим процессам лесосечных работ. М. , 1993, 16 с. (прототип). (Утверждены приказом ФС ЛХ России от 29 ноября 1993 г. N 314). 4. РД 13-11-11-85 Система государственных испытаний продукции. Лесозаготовительные машины и ... 2426302 Всепогодная теплица ... Далее описан пример процедуры сборки всепогодной теплицы 1. Сначала, как показано на фиг.2, на месте сборки теплицы 1 укладывают опорные блоки 30. Затем упрочняющий элемент (например, Н-профильную стальную балку 50) устанавливают в положение, соответствующее передней стороне теплицы 1, и совмещают передний конец углубления 114 каждой из секционных частей 11a-11с с Н-профильной стальной балкой 50. В этом положении нижний конец Н-профильной стальной балки 50 и нижний конец секционных частей 11а, 11с прикрепляют врезными (сквозными) болтами 31 к опорному блоку 30. После этого любые две соседние секционные части из секционных частей 11а-11с соединяют друг с другом в периферийном ... 2459398 Способ рекультивации почв, загрязненных минерализованными водами ... брикеты удаляют из почвы путем просеивания последней на виброситах, в качестве химмелиорантов и биоудобрения используют рассыпчатый влажный избыточный ил; в качестве культур используют растения-галофиты, например амарант, полынь и др. Норма расхода воды на полив дождеванием составляет 450-500 м3/га (45-50 л/м2). При содержании солей в почве более 10 мас.% осуществляют предварительный вывоз и промывку засоленного грунта пресной водой. Начальным этапом реализации технологии является выделение зон с повышенным содержанием солей. Грунт с содержанием солей более 10 мас.% вывозится и многократно промывается пресной водой на специальных установках, до остаточного содержания солей не более ... |
Еще из этого раздела: 2272399 Зерноуборочный комбайн 2275804 Способ повышения продуктивности птицы 2477036 Агрегат для предпосевной обработки почвы и посева 2234219 Композиция для отпугивания паразитов 2384065 Инсектоакарицидное средство 2477044 Искусственная рыболовная приманка (варианты) 2271096 Способ прогнозирования урожайности озимых зерновых культур в условиях засушливого климата 2178965 Картофелекопатель ручной мотыжный 2452157 Рыхлитель-щелерез 2216903 Устройство для отделения плодов от ветвей |
Изобретения в сельском хозяйстве
Обработка почвы в сельском и лесном хозяйствах
Посадка, посев, удобрение
Уборка урожая, жатва
Обработка и хранение продуктов полеводства и садоводства
Садоводство, разведение овощей, цветов, риса, фруктов, винограда, лесное хозяйство
Новые виды растений или способы их выращивания
Производство молочных продуктов
Животноводство, разведение и содержание птицы, рыбы, насекомых, рыбоводство, рыболовство
Поимка, отлов или отпугивание животных
Консервирование туш животных, или растений или их частей
Биоцидная, репеллентная, аттрактантная или регулирующая рост растений активность химических соединений или препаратов
Хлебопекарные печи, машины и прочее оборудование для хлебопечения
Машины или оборудование для приготовления или обработки теста
Обработка муки или теста для выпечки, способы выпечки, мучные изделия
|
|
||