Способ выращивания растений in vitroПатент на изобретение №: 2102870 Автор: Бабоша А.В., Шнейдер А.Ю., Фирсукова С.И. Патентообладатель: Всероссийский научно-исследовательский институт картофельного хозяйства Дата публикации: 27 Января, 1998 Адрес для переписки: подача заявки08.12.1994 публикация патента27.01.1998 ИзображенияИспользование: сельское хозяйство и биотехнология. Сущность изобретения: питательная среда содержит минеральные соли и регуляторы роста, при этом в агаризованную питательную среду вводят дополнительно тетраметилтиурамсульфид (ТМТД) в количестве 25-100 мг/л или 25-100 мг/л ТМТД и 1-20 мг/л фундазола, или 25-100 мг/л ТМТД и 1-20 мг/л фундазола в сочетании с 2,5-50 мг/л метиленового синего и 1-10 мг/л бриллиантового зеленого, а в питательную среду с твердым носителем вводят дополнительно 20-100 мг/л ТМТД или 25-100 мг/л нистатина. 2 табл. ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУИзобретение относится к области сельского хозяйства и биотехнологии, в частности к способам микроклонального размножения растений и безвирусному семеноводству. Известен способ микроклонального размножения и выращивания растений in vitro путем посадки микрочеренков на питательную среду, содержащую элементы минерального питания по Мурасиге-Скугу и регуляторы роста. Недостатком указанного способа является частое "зарастание" питательной среды микроорганизмами-контаминантами при нарушении условий стерильности. Размножение микроорганизмов приводит к накоплению токсических веществ и вследствие этого гибели части растений и, следовательно, возрастанию затрат для получения необходимого их количества, и(или) для поддержания более высокого уровня стерильности. Цель изобретения - подавление роста микроорганизмов-контаминантов, упрощение способа и снижение затрат при выращивании растений in vitro. Предлагаемый способ выращивания растений in vitro заключается в следующем. Посадка микрочеренков в стерильных условиях производится на питательную среду, содержащую минеральные соли, сахарозу, агар-агар и регуляторы роста, в состав которой дополнительно вводят 25-100 мг/л тетраметилтиурамдисульфида (ТМТД) или ТМТД (25-100 мг/л) и фундазол в количестве 1-20 мг/л или ТМТД(25-100 мг/л) и фундазол (1-20 мг/л) в сочетании с метиленовым синим 2,5-50 мг/л и бриллиантовым зеленым - 1- 10 мг/л. Предлагаемый способ отличается от известного способа выращивания in vitro тем, что в состав питательной среды дополнительно вводят соединения, обладающие биоцидной активностью против наиболее часто встречающихся в практике микроразмножения растений видов микроорганизмов грибной и бактериальной природы: ТМТД или ТМТД в сочетании с фундазолом или ТМТД в сочетании с фундазолом, метиленовым синим и бриллиантовым зеленым. В результате применения данного способа гибель растений вследствие "зарастания" питательной среды микроорганизмами-контаминантами снижается в 2 и более раз. Соответственно снижаются затраты, необходимые для выращивания дополнительного числа растений. При поддержании коллекций сортов и форм in vitro иногда возникает ситуация "зарастания" всех пробирок данного сорта с угрозой его потери. В случае контаминации чувствительными микроорганизмами черенкование инфицированных растений на предложенную среду позволяет сохранить коллекционный образец. Посадка микрочеренков в стерильных или нестерильных условиях производится на стерилизованный прокаливанием перлитовый песок, пропитанный жидкой минеральной питательной средой без органических добавок, в состав которой дополнительно вводят 20-100 мг/л тетраметилтиурамдисульфида (ТМТД) или 25-100 мг/л нистатина. Применение компонентов с альгицидной активностью - ТМТД или нистатина - устраняет зарастание микроводорослями, выделяющими токсичные для растений соединения, при выращивании в нестерильных условиях или при случайном нарушении стерильности. Это позволяет также последнее микрочеренкование перед высадкой в теплицу проводить в нестерильных условиях, что позволяет упростить способ выращивания за счет более удобных манипуляций с черенками в нестерильных условиях и уменьшить необходимые площади по сравнению с пробирочной культурой. Пример 1. Биоцидные компоненты в указанных табл. 1 и 2 концентрациях были добавлены к питательной среде для микрочеренкования, содержащей минеральные соли по Мурасиге-Скугу и регуляторы роста, а также 7 г/л агар-агара и 20 г/л сахарозы, перед ее стерилизацией автоклавированием (120oC, 20 мин). Черенки растений картофеля, поддерживавшихся in vitro в стерильной культуре, с одним-двумя междоузлиями высаживали в пробирки с питательной средой и выращивали 3-4 нед при температуре 20oC и освещенности 5000 лк. Учитывали число случайных зарастаний грибной и бактериальной инфекцией. Как видно из табл. 1, суммарное зарастание контаминантами грибной природы снижается в два и более раз при введении в состав среды ТМТД и фундазола. При этом зарастание Penicillium sp. подавляется полностью (в контроле 1.3%), а рост бактерий изменяется незначительно (табл. 2). Введение в состав среды метиленового синего и бриллиантового зеленого является эффективным в качестве антибактериального средства (табл. 2). Пример 2. Черенки растений картофеля, поддерживавшихся in vitro в стерильной культуре, с одним-двумя междоузлиями нестерильно высаживали на перлитовый субстрат, стерилизованный прокаливанием 2 ч при 170oC и помещенный в чашки Петри, пропитанный питательной средой, содержащей раствор Кноппа или минеральные соли по Мурасиге-Скугу с добавлением регуляторов роста, а также биоцидных компонентов: 25 мг/л ТМТД или 25 мг/л нистатина. По мере подсыхания субстрата проводили полив дистиллированной водой (примерно, 1 раз в неделю). Через две недели в контрольном варианте (без добавления ТМТД или нистатина) отмечено зарастание микроводорослями, в вариантах с добавлением ТМТД и нистатина зарастание отсутствует, вес надземной части растения составляет 100-180% от контроля. Через 1 мес после посадки в контрольном варианте отмечено бурное развитие микроводорослей на поверхности перлита, растения угнетены, отдельные растения погибли, в опытных вариантах небольшой рост водорослей в местах полива, развитие растений нормальное.ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯСпособ выращивания растений in vitro, включающий микрочеренкование и посадку микрочеренков на питательную среду, содержащую минеральные соли и регуляторы роста, отличающийся тем, что посадку микрочеренков осуществляют на агаризованную питательную среду с сахарозой или на питательную среду с твердым носителем, в качестве которого используют перлит, при этом в агаризованную питательную среду вводят дополнительно ТМТД в количестве 25 100 мг/л, или 25 100 мг/л ТМТД и 1 20 мг/л фундазола, или 25 100 мг/л ТМТД и 1 20 мг/л фундазола в сочетании с 2,5 50,0 мг/л метиленового синего и 1 10 мг/л бриллиантового зеленого, а в питательную среду с твердым носителем вводят дополнительно 20 100 мг/л ТМТД или 25 100 мг/л нистатина.Популярные патенты: 2165134 Корнеподрезающий рабочий орган машины для добычи лакричного сырья ... (в том числе и выполнения фасок 22 и 23 и удаления заусениц) горизонтальное лезвие 4 подвергают термоупрочнению. Режущая кромка 3 со стороны поднутрения 17 должна иметь твердость не ниже 45 - 55 HRC. Материалы боковин 10 и 11 и горизонтального лезвия 4 в неразъемный узел электрической дуговой сваркой взаимно не свариваются. Сварные швы неустойчивы и не воспринимают ударного характера нагрузок при выполнении технологического процесса. Горизонтальное лезвие 4 (см. фиг. 1-3, 9 и 10) снабжено долотами 24 и 25. Долота 24 и 25 установлены в стыках криволинейных участков 15 боковин 10 и 11 на концевых участках 19 и 20 горизонтального лезвия 4. Режущие кромки 2 и 1 боковин 10 и 11 к ... 2250583 Агрегат дернинный комбинированный ... комбинированный АДК - 2,8 (Кормановский Л.П., Сысуев В.А., Кормщиков А.Д., Кислицин А.В. Разработка семейства машин для посева семян трав в дернину к различным энергосредствам // Машинные технологии и новая с.-х. Техника для условий Евро-Северо-Востока: Материалы 2-ой Международной научно-практической конференции: в 3 т. - Киров, 2001. - Т.3. с.3...7.), состоящий из трактора, туковой сеялки, расположенной на передней навеске, и навесной дернинной сеялки, размещенной на задней навеске трактора.Агрегат АДК-2,8 работает следующим образом. Удобрения из ящика для удобрений туковой сеялки подаются туковысевающими аппаратами в тукопроводы и укладываются на дернину полосами тукоразделителем. ... 2242875 Энергосберегающий способ зимовки и содержания пчел на воле в однокорпусном улье усова ... в нижней части улья у задней стенки имеются донные отверстия для удаления из гнездового пространства отработанного воздуха с содержанием метаболической воды и углекислого газа, которые закрыты сверху конусообразными сеточными колпаками для предотвращения перекрытия отверстий от осыпающего подмора в зимнее время, причем наружный токопроводящий слой краски гальванически соединен с полированной теплоотражающей металлопленкой и заземляющим штырем, образуя двойной электростатический экран гнездового пространства от внешних электромагнитных полей и грозовых разрядов в атмосфере, причем на каждую пчелосемью установлена корпусная индивидуальная поилка.Корпус сверху и по вертикальным ... 2280351 Установка для скашивания сорной растительной массы с берм и откосов канала ... чертежами. На фиг.1 изображена установка для скашивания сорной растительной массы с берм и откосов канала, вид в плане.На фиг.2 представлен нож, вид с торца.На фиг.3 - то же, вид в плане, фрагмент ножа.На фиг.4 - показано сечение А-А на фиг.3, поперечно-вертикальный разрез ножа, его клыков, опор в виде шаровых сегментов, дисковых ножей, средств их крепления (вариант конструктивного выполнения: концы клыков на оси вращения размещен по двухзаходным винтовым линиям).Сведения, подтверждающие возможность реализации заявленного изобретения, заключаются в следующем.Рассмотрим пример конструктивного исполнения установки для скашивания сорной растительной массы с берм и откосов ... 2254705 Способ уплотнения и герметизации консервируемых кормов в рулонах ... подбор из валков провяленных трав с одновременным их уплотнением и формированием рулонов с обвязкой их шпагатом, герметичную упаковку пленочным материалом в стационарных условиях и укладку на хранение в штабель, отличающийся тем, что каждый рулон дополнительно уплотняют с одновременным выравниванием его поверхности путем отсоса воздуха из-под надеваемого на него герметичного колпака, который затем снимают, а рулон герметично упаковывают пленочным материалом в виде чехла и повторно отсасывают воздух, обвязывают стягивающим поясом и укладывают на хранение в штабель. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что из герметизируемых рулонов обеспечивают выпуск в атмосферу газов, образующихся ... |
Еще из этого раздела: 2267261 Молочно-доильный комплекс 2253964 Способ отделения семенной части урожая льна от стеблей и устройство для его осуществления 2106081 Животноводческая ферма с применением помещений круглой формы и способ содержания в ней, например, крупного рогатого скота 2257713 Способ производства пестицида (варианты) 2053661 Устройство для сколачивания ульевых рамок 2201065 Приемная часть осевого сепаратора 2015633 Способ переработки отходов животноводческих комплексов и устройство для его осуществления 2477044 Искусственная рыболовная приманка (варианты) 2265300 Способ борьбы с нежелательной порослью топинамбура 2248687 Способ весеннего боронования озимых культур и зубовая борона для его осуществления |