Штамм бактерий pseudomonas maltophilia для приготовления препарата против возбудителей заболеваний растенийПатент на изобретение №: 2081905 Автор: Андреева Н.Б., Хмель И.А., Сорокина Т.А., Липасова В.А. Патентообладатель: Институт молекулярной генетики РАН Дата публикации: 20 Июня, 1997 Адрес для переписки: подача заявки22.06.1992 публикация патента20.06.1997 Изображения Использование: в сельскохозяйственной микробиологии, в производстве средств защиты растений от фитопатогенных грибов. Сущность изобретения: штамм бактерий Pseudomonas maltophilia ВКМ СК-332Д выделен из дерново-подзолистой почвы под березняком. Депонирован во Всесоюзной коллекции промышленных микроорганизмов под номером CR-332D. Штамм выращивают на среде, содержащей в качестве источника углерода хитин, источника азота, фосфора в течение 7 суток при 28oC, затем клетки отделяют от среды и используют полученные клетки для защиты растений от фитопатогенов в виде суспензии с титром клеток 5  106 - 5109. 2 табл.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУИзобретение относится к области сельскохозяйственной микробиологии, биотехнологии и может найти применение в сельском хозяйстве при защите растений от возбудителей их заболеваний. Известен штамм бактерий Pseudomonas putida, применяемый для приготовления препарата против грибковых заболеваний растений, а также для их защиты от почвенных нематод (патент США N 4751081, кл. 424-33, 1987) прототип. Однако данный известный штамм не является природным бактериальным штаммом, он сконструирован в лабораторных условиях, что может привести к его перерождению в природных условиях. Известен штамм Pseudomonas putida, подавляющий рост фитопатогенного гриба Fusarium rkysporum (патент США N 4714614, кл. 424-93, 1987). Однако отсутствуют сведения о спектре действия данного известного штамма. Техническим результатом, достигаемым при реализации настоящего изобретения, является обеспечение возможности приготовления препарата против возбудителей заболеваний растений на основе природного штамма бактерий. Достигается это тем, что штамм бактерий P. mаltophilia BKMCR-332D используется для приготовления препарата против возбудителей заболеваний растений. Новый штамм выделен из дерново-подзолистой почвы под березняком (Московская область). Новый штамм характеризуется следующими признаками. Это неспорообразующие грамотрицательные, прямые или слабо изогнутые короткие палочки, подвижные, с пучком полярных жгутиков. Морфологию колоний на питательных средах определяли после 4-5 суток роста при 28oC. На мясо-пептонном агаре (МПА) колонии слизистые, выпуклые к центру, желтовато-серые, более желтые в центре. Пигмент -темно-желтый или коричневый, иногда слабый. На органических средах с тирозином штрих голубовато-черный с темно-бурым пигментом, диффундирующим в среду. На среде Кинга А пигментация отсутствует, на среде Кинга Б образует темно-коричневый, почти черный пигмент, диффундирующий в среду, относящийся к группе меланинов. Зеленый флуоресцирующий пигмент отсутствует. Физиолого-биохимические признаки штамма Не растет на минеральной среде без факторов роста (метионина). С некоторыми источниками углерода на среде Хьюг-Лайфсона в аэробных условиях дает сильно щелочную реакцию. Оксидазная реакция (по Ковачу) отрицательная. Обладает сильной протеолитической активностью: быстро и полно разжимает желатин (через сутки при 28oC). Пептонизирует и часто створаживает молоко. Не способен к истинной денитрификации. Не накапливает поли- -оксибутират. Не образует из сахарозы леван, не гидролизует крахмал. Продуцирует каталазу. На МПА с цистеином образует сероводород. Активно образует лизин-декарбоксилазу и слабее аргинин-дегидролазу. Уреазной активностью не обладает. Не растет при +4oC и +41oC. Оптимальная температура для роста - 28-30oC. Не растет при pH 4,5. Растет на МПА с 3% NaCl. Характерной особенностью является относительно ограниченный спектр источников углеводов, пригодных для роста. Утилизирует цитрат и малонат натрия. Хорошо растет на минеральной среде с аммонийными солями. Нитратные соли не использует в качестве единственного источника азота. Новый штамм устойчив к ампициллину (200 мкг/мл), тетрациклину (10 мкг/мл), чувствителен к хлорамфениколу (20-50 мкг/мл), стрептомицину (100 мкг/мл). Новый штамм не фитотоксичен, о чем свидетельствует отсутствие мацерации на ломтиках картофеля и некротических пятен на листьях табака при нанесении на них уколом суспензии живых клеток штамма. Штамм не вирулентен для лабораторных животных. Хранится штамм на косяках картофельного агара в холодильнике с пересевом на свежие косяки через 2-4 месяца и в лиофильно высушенном состоянии (в ампулах) не менее одного года. Для получения лиофильно высушенного препарата клети штамма выращивали в течение суток на агаризованном бульоне Хоттингера и смывали следующим составом: 1 часть физиологического раствора + 1 часть смеси, приготовленной из 10 частей сыворотки крови крупного рогатого скота без консерванта и 1 части раствора сахарозы 1 г/мл. Штамм идентифицирован: 1) по первоисточнику Hugh R. //Int. J. Syst. Bact. 1981, V. 31, N 2, p. 195; 2) по первоисточнику Komagata K et all. //Int. J. Syst. Bact. 1974, V. 24, p. 242; 3) по определителю Krieg N. R. et all. //Bergey"s manual of Systematic Bacteriology, 1981, V. 1. Пример 1. Штамм Pseudomonas maltophilia ВКМ CR-332D выращивали на среде следующего состава (г/л): Дрожжевой экстракт 0,5 (NH4)2SO4 1 MgSO4 x 7H2O 0,3 KH2PO4 1,36 Перед стерилизацией pH среды доводили до 7,0 4%-ным раствором NaOH. В качестве единственного источника углерода в среду вводили коллоидный хитин, полученный обработкой хитина из экзосколета краба концентрированной HCl (Enthomophage, 1975, V. 20, N 1, p. 43-48). Готовили водную суспензию коллоидного хитина (1: 1) и добавляли в среду в конечной концентрации 2% (по объему). Субстрат и соли стерилизовали отдельно. Штамм выращивали в течение 7 суток при +28oC, после чего клетки отделяли фильтрованием. Фильтрат использовали для получения препарата хитинолитических ферментов ферхита, а клетки штамма в виде суспензии либо в лиофилизированном виде (с наполнителем либо без него) использовали как препарат для защиты растений от фитопатогенов. Рабочая суспензия клеток содержит 5106 5 109 клеток/мл. Пример 2. Методом агаровых блоков изучили антагонистическое действие нового штамма на фитопатогенные грибы. Культуру клеток штамма высевали "сплошным газоном" на поверхность питательного агара (МПА с 2% глицерина или серы Кинга Б) и выращивали при 28oC в течение 2-3 суток. Затем пробочным сверлом (диаметр 8-10 мм) вырезали "блочки" и переносили их на поверхность другой питательной среды (среда Чапека или картофельный агар), предварительно засеянной глубинным способом тест-культурой фитопатогенного гриба (около 100 спор на 1 мл среды). Чашки помещали в термостат при 28-30oC. Учет проводили по зонам отсутствия или подавления роста гриба вокруг диска с культурой нового штамма через 3-6 суток (в зависимости от скорости роста тест-культуры). Результаты представлены в таблице 1 и показывают высокую антагонистическую активность нового штамма против фитопатогенных грибов. Пример 3. Выращивание маточных посадок гвоздики ремонтантной в совхозе "Оранжерейный комплекс" Московской области с целью получения посадочного элитного материала укорененных черенков гвоздики генерации M2 ранее приводило к массовому заражению выращиваемых маточных растений M1 возбудителем увядания гвоздики Fusarium oxysporum к концу третьего месяца и к выпаду к этому времени до 35-40% растений. При этом в оставшихся растениях скрытая фузареозная инфекция достигала 70% что делало полностью невозможным использование таких маточных растений для производства элитного посадочного материала. При внесении в субстрат для выращивания растений гвоздики генерации M1 клеток штамма Pseudomonas maltophilia ВКМ CR-332D позволило выращивать растения в течение 8-10 месяцев. В таблице 2 приведены данные по выпаду растений и по их зараженности скрытой нефтяной инфекцией, свидетельствующие об эффективности применения нового штамма. Таким образом, препарат, приготовленный на основе бактериального штамма согласно изобретению, является эффективным средством защиты растений от возбудителей их заболеваний.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯШтамм бактерий Pseudomonas maltоphilia ВКМ CR-332D для приготовления препарата против возбудителей заболеваний растений.Популярные патенты: 2075933 Композиция для иммунизации растений от различных фитопатогенов ... Композиция стабильна, ее состав не изменяется при хранении при комнатной температуре в течение нескольких месяцев. 9 табл. , , , , , , ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно: к средствам защиты растений от болезней. Известна композиция, индуцирующая устойчивость картофеля, сахарной свеклы и томатов к патогенным грибам липогликопротеидный комплекс (ЛГП комплекс), содержащий в качестве активного начала арахидоновую и эйкозапентаеновую кислоты [1] Недостатком данной композиции является недостаточно высокая биологическая эффективность и наличие аллергенного эффекта. Целью изобретения является повышение ... 2403708 Устройство для полива сельхозрастений ... верхнюю часть резервуара 45.После завершения полива закрывают кран 52 и 3. Из рессивера 46 подают в эластичные пневмобаллоны 4 сжатый воздух (не показано). Увеличивается расстояние 53 и синхронно уменьшается глубина погружения 5. Водяное колесо 1 не вращает вал 7. С помощью гибких нитей 54 можно перемещать устройство на другое место.Все вращающиеся детали устройства размещены в корпусах 56 и 57 и находятся на расстоянии 53 от воды 6 в реке 31. Формула изобретения Устройство для полива сельхозрастений, состоящее из корпусов, валов, эластичных пневмобаллонов, отличающееся тем, что водяное колесо кинематически соединено с компрессором, теплогенератором, гидронасосом, состоящим из ... 2160981 Способ создания плантаций солодки голой на обесструктуренных почвах в орошаемом земледелии ... см длиной. Семена солодки голой округлые, неправильно многоугольной формы, иногда слабо сплющенные. Очертания семян у семенного рубчика образуют прямую линию, семенной рубчик округлый, окаймленный. Поверхность гладкая, матовая. Окраска семян коричневая, зеленовато-серая. Размер семян 3 - 3,5 мм в длину, 2 мм в ширину и 1,0 - 0,2 мм в толщину. На генеративных побегах солодки голой в пазухах листьев в период вегетации закладываются почки. Из верхних, по положению на стебле, почек образуется пазушные кистевидные соцветия. Остальные пазушные почки частично развиваются в боковые веточки (вегетативные или генеративные), другие остаются спящими и трогаются в рост только в случае ... 2479996 Экологический комплекс для аквакультуры и рекультивации морских вод ... платформе устанавливается культиватор 2 корма для моллюсков, в котором при солнечном или искусственном освещении выращивается моно- или поликультура микроводорослей.К выходному отверстию культиватора 2 монтируется электрокран 25, подсоединяется магистральный шланг 26, к которому монтируются помпа 5 и аэратор 6. Магистральный шланг 26 имеет наибольший диаметр (20-30 мм) и тянется к системе 1 носителей моллюсков, где подключается к входному патрубку магистральной трубы 27 диаметром 15-20 мм. В месте расположения системы 1 носителей моллюсков вдоль горизонтальных тросов 9 устанавливается разветвленная система разводящих труб 29 меньшего диаметра (10-15 мм), которые подсоединяются к ... 2434381 Технологическая линия для приготовления и раздачи влажных кормов ... за счет установки ворошилок, а также увеличение равномерности смешивания сухого комбикорма с водой за счет установки спиральной трубы.Сущность изобретения заключается в том, что для реализации указанной задачи предлагаемый увлажнитель кормов выполнен из загрузочного бункера, спирального транспортера, бункера-питателя, тросово-шайбового конвейера с выгрузными окнами, электродвигателя с редуктором, бокса для животных, дозатора, подводящего трубопровода, ворошилок, мотора-редуктора, спирального трубопровода, таймера, крана, телескопического рычага с шаром, вилки, пружины, электромагнитного клапана с заслонкой, спирального трубопровода, усеченного конуса, кольцевого трубопровода с ... |
Еще из этого раздела: 2020793 Способ выращивания растений и стаканчик для его осуществления 2175833 Охладитель молока с аккумулятором холода 2261588 Способ электростимуляции жизнедеятельности растений 2016512 Средство для борьбы против стресса у рыб и способ борьбы со стрессом у рыб 2125366 Доильный аппарат 2019938 Рабочий орган почвообрабатывающей машины 2477036 Агрегат для предпосевной обработки почвы и посева 2278488 Способ создания пастбищных экосистем весенне-летнего срока использования 2192721 Орудие для обработки засоленных почв 2161400 Способ определения активности агентов |
Изобретения в сельском хозяйстве
Обработка почвы в сельском и лесном хозяйствах
Посадка, посев, удобрение
Уборка урожая, жатва
Обработка и хранение продуктов полеводства и садоводства
Садоводство, разведение овощей, цветов, риса, фруктов, винограда, лесное хозяйство
Новые виды растений или способы их выращивания
Производство молочных продуктов
Животноводство, разведение и содержание птицы, рыбы, насекомых, рыбоводство, рыболовство
Поимка, отлов или отпугивание животных
Консервирование туш животных, или растений или их частей
Биоцидная, репеллентная, аттрактантная или регулирующая рост растений активность химических соединений или препаратов
Хлебопекарные печи, машины и прочее оборудование для хлебопечения
Машины или оборудование для приготовления или обработки теста
Обработка муки или теста для выпечки, способы выпечки, мучные изделия
|
|
||