Способ профилактики заболевания икры и молоди рыб сапролегниейПатент на изобретение №: 2081575 Автор: Елякова Л.А., Киселева М.И., Звягинцева Т.Н. Патентообладатель: Тихоокеанский институт биоорганической химии Дальневосточного отделения РАН Дата публикации: 20 Июня, 1997 Адрес для переписки: подача заявки20.07.1995 публикация патента20.06.1997 ИзображенияИспользование: в рыбоводстве при искусственном разведении рыб для профилактики заболевания икры и молоди рыб сапролегнией и получения тем самым здорового и жизнестойкого потомства. Сущность изобретения: икру рыб во время оплодотворения выдерживают в растворе 1_3;1_6--D - глюканов, таких как ламинаран и транслан в концентрации 100-1000 мкг/мл. Обработка икры этими препаратами приводит к увеличению жизнеспособности икры и молоди рыб и уменьшению повреждаемости сапролегниевыми грибами за счет активации иммунной системы. 1 табл. ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУИзобретение относится к области искусственного разведения рыб и касается способа профилактики заболевания икры и молоди рыб сапролегнией с целью получения здорового и жизнестойкого потомства. В практике рыбоводства, в частности лососеводства, для предупреждения заражения сапролегниевыми грибами икру перед закладкой на инкубацию и после образования пигментации глаз обрабатывают 0,5%-ным раствором формалина в течение трех минут или малахитовым зеленым в разведении 1 г на 15 л в течение 10-60 с [1] К недостатком известного способа можно отнести то, что в указанных концентрациях формалин и малахитовый зеленый практически не ингибируют развитие сапролегниевых грибов. С увеличением концентрации препаратов увеличивается токсичность, особенно в отношении личинок рыб. Кроме того, формалин является сильным ядом для персонала, работающего с ним, так как вызывает аллергию и кожные заболевания, а при вдыхании способен накапливаться в организме. В качестве прототипа выбран способ обработки икры форели для предупреждения заражения сапролегниевыми грибами углеводами рамнозой и арабинозой [2] Икру выдерживали в 0,1 и 0,01 М растворах углеводов с последующей инкубацией в условиях рыбозавода. Через 10 дней после начала инкубации в экстрактах зародышей определяли титр рамнозоспецифичного анти-B лектина, который заметно повышался при обработке икры 0,01 М растворами моносахаридов. Обработка же икры растворами большей концентрации (0,1 М) приводила к резкому падению титра анти-B лектина. В этом случае икра поражается сапролегниевыми грибами и почти полностью погибает. Однако в этой работе нет конкретных цифр по выживаемости и поражаемости сопролегниевыми грибами икры и зародышей. Задача изобретения разработка высокоэффективного способа профилактики (способа профилактики) заболевания икры и молоди рыб сапролегнией, увеличивающего жизнеспособность зародышей и мальков, что в дальнейшем должно сказаться на увеличении количества промысловых рыб. Поставленная задача решена тем, что в способе профилактики заболевания икры и молоди рыб сапролегнией, включающем обработку икры иммуномодулятором путем выдерживания в растворе препарата, в качестве последнего используют раствор 1_3;1_6--D глюканов в концентрации 100-1000 мкг/мл, а обработку осуществляют непосредственно во время оплодотворения. В качестве 1_3;1_6--D глюканов используют ламинаран и Транслам. Ламинаран получают из морских водорослей известным способом [3] Транслам получают путем ферментативной трансформации ламинарана [4] Способность к стимуляции иммунитета рыб, выявленная у ламинарана и Транслама, позволила использовать их в предлагаемом способе профилактики заболевания икры и молоди рыб сапролегнией. Способ позволяет значительно увеличить жизнеспособность икры и молоди рыб (кеты), уменьшить поражаемость сапролегниевыми грибами за счет активации иммунной системы по сравнению с применяемым в рыбоводной практике способом обработки икры формалином. Сущность способа поясняется следующими примерами. Пример 1. Икру и молоди для эксперимента взяли от зрелых текучих рыб на забойной станции, расположенной в 15 км от рыбоводного завода "Рязановский" вниз по руслу реки. К полученной от нескольких самок икре добавляют сперму нескольких самцов, делят на 5 партий. В контрольную партию 1 добавляют воду. В оставшиеся партии вместо воды добавляют водный раствор ламинарана (в концентрации 1000; 500; 100 и 50 мкг/мл). Икру выдерживают в растворах в течение трех минут, после оплодотворения промывают от избытка спермы и оставляют набухать в проточной воде на 2 ч. После набухания перевозят для дальнейшей инкубации на рыбоводный завод. За инкубационный период несколько раз определяют процент погибшей икры, размер и вес молоди. Об иммунном статусе рыб судят как визуально, учитывая количество поражений сапролегниевыми грибами икры, так и по определению титра анти-В лектина (реакцией гемагглютинации) в экстрактах зародышей кеты, который определяют дважды: через 10 и 45 дней после обработки. Формалином (контроль 2) икру обрабатывают через сутки после оплодотворения, пользуясь инструкцией, которую применяют на рыбоводном заводе [1] В представленной таблице показаны результаты проделанной работы, откуда видно, что после обработки ламинараном (концентрация 10000; 500 и 100 мкг/мл) отход икры уменьшается в 2-3,5 раза по сравнению с контролями 1 и 2. Как видно из таблицы, ламинаран в тех же концентрациях оказывает особенно существенное влияние на сохранность икры при транспортировке на завод. Так, по сравнению с контролем 1, отход икры после перевозки уменьшается в 2-4 раза. Ламинаран в меньшей концентрации (50 мкг/мл) уже не оказывает существенного влияния на изменение количества отхода. После обработки ламинараном (концентрация 10000; 500 и 100 мкг/мл) количество сапролегниевых грибов, поражающих икру, уменьшается в 2-5 раза по сравнению с контролями 1 и 2. Обработка ламинараном в концентрации 50 мкг/мл не дает существенных результатов и рост сапролегниевых грибов мало отличается от необработанной партии. Иммуностимулирующее действие ламинарана подтверждается количеством анти-В лектина в экстрактах зародышей. Через 10 дней после обработки реакция с тест-эритроцитами наблюдается до разведения 1/64 (в концентрации 1000; 500 мкг/мл), тогда как в контролях 1 и 2 лишь до разведения 1/4. Через 45 дней в контроле 1 титр лектина уменьшился до разведения 1/2, а после обработки ламинараном в концентрации 500 мкг/мл почти сохранился (1/32). В партии икры, обработанной формалином, уровень лектина остался на прежнем уровне (1/4). Это указывает на то, что в икре, обработанной ламинараном, иммунитет повышается и это состояние сохраняется достаточно длительной время. После выклева личинок дважды измеряли прирост после поднятия личинок на плав и перед выпуском в бассейны. В первом случае молодь была крупнее после обработки ламинараном в концентрации 100 мкг/мл, а перед выпуском более крупная молодь отмечалась в партиях, обработанных большей концентрацией ламинарана. Так, после обработки ламинараном в концентрации 500 мкг/мл молодь была на 20% крупнее, чем в контроле 1. Обработка формалином почти не оказывает влияние на размер молоди (см. таблицу). Пример 2. Икру обрабатывают так же, как в примере 1, но в этом варианте применяют Транслам. После обработки трансламом в концентрациях 1000 и 500 мкг/мл отход икры по сравнению с контролями 1 и 2 уменьшился в 2 и 3 раза соответственно (см. табл. ). При транспортировке оплодотворения икра лучше всего сохраняется после обработки трансламом в концентрациях 100 и 500 мкг/мл (отход икры в 3,5 раза меньше, чем в контроле 1). Уменьшение концентрата действующего вещества до 50 мкг/мл не оказывает существенного влияния на отход икры и рост сапролегниевых грибов. Поражаемость сапролегниевыми грибами меньше всего после обработки трансламом в концентрациях 1000 и 500 мкг/мл. Это подтверждается данными по определению титра анти-В лектина. После обработки икры трансламом в этих концентрациях титр анти-В лектина в экстрактах зародышей кеты через 10 дней после обработки наблюдался до разведения 1/64, а через 45 дней 1/16, тогда как в первом контроле он был 1/4 и 1/2 соответственно. После обработки меньшей концентрацией транслама титр анти-В лектина изменялся с разведением 1/32 до 1/8 при 100 мкг/мл; 1/8 до 1/4 при 50 мкг/мл. Обработка формалином, как и в первом примере, с течением времени (45 дней) уровень лектина не изменяли и этот уровень мало отличался от уровня контроля 1. Отсюда видно, что транслам, как и ламинаран, вызывает и длительное время поддерживает повышенную устойчивость иммунитета. В то же время самая крупная молодь была после обработки икры трансламом в концентрации 500 мкг/мл (после поднятия на плав 10% перед выпуском на 45% крупнее, чем в контролях 1 и 2). Таким образом показано, что ламинаран и транслам обладают значительно большей эффективностью для предупреждения заражения икры и молоди рыб сапролегниевыми грибами, чем используемый в настоящее время для этой цели формалин. В оптимальном случае (обработка 1_3;1_6--D глюканами в концентрации 500 мкг/мл) отмечено в 5 раз меньше количество сапролегниевых грибов, чем в контроле 1; тогда как после обработки формалином разница с контролем 1 была совсем незначительна (на 0,5% см. таблицу). Сравнивая действие ламинарана и транслама, видим, что несмотря на то, что в отличие от теплокровных, где транслам является лучшим иммуностимулятором [5,6] чем ламинаран, для хладнокровных (рыбы) иммуностимулирующие эффекты этих двух веществ довольно близки. Поэтому возможно использование как транслама, так и более доступного и дешевого ламинарана для профилактики против заражения сапролегниевыми грибами. Оптимальной концентрацией для обработки икры является концентрация 500 мкг/мл. Уменьшение концентрации препаратов (ниже 100 мкг/мл) почти снимает эффект иммунизации зародышей кеты. Обработка икры 1_3;1_6--D глюканами в концентрациях от 100 до 1000 мкг/мл значительно увеличивает сохранность икры при перевозке (отход в 2-4 раза меньше, чем в контроле 1). Увеличение сохранности икры при перевозке, возможно, еще одно проявление иммуностимуляции икры, обработанной 1_3;1_6--D глюканами. Литература. 1. Инструкция по искусственному разведению тихоокеанских лососей. Гос. комитет по рыбному хозяйству при СНХ СССР. Главрыбвод, 1963 г. 2. Балахнин И. А. и Лукьяненко В.И. Активация неспецифических факторов защиты рыб углеводами. Доклады Академии наук СССР, 1991, т. 318. N 5, с. 1254-1256. 3. Звягинцева Т.Н. Сундукова Е.В. и Елякова Л.А. Патент РФ N 1642725, С О8 В 37/18 "Способ получения ламинарана". 1990 г. 4. Звягинцева Т.Н. Исакова В.В. и Елякова Л.А. Ферментативное превращение ламинаранов в 1,3; 1,6--D-глюкан, обладающий иммуностимулирующей активностью. "Биоорганическая химия". 1995, т. 21. N 3, с.218-225. 5. Кузнецова Т. А. и др. Влияние транслама на некоторые показатели естественной резистентности облученного организма. Радиобиология. 1994, N 2, с. 236-238. 6. Игнатенко Л.А. и др. Стимуляция регенерации гемопоэза мышей под действием транслама. 1990. т. 30. с. 555-556.ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯСпособ профилактики заболевания икры и молоди рыб сапролегнией, включающий обработку икры иммуномодулятором путем выдерживания в растворе препарата, отличающийся тем, что в качестве последнего используют 1 _ 3; 1 _ 6--Д- глюканы в концентрации 100 1000 мкг/мл, а обработку осуществляют непосредственно во время оплодотворения.Популярные патенты: 2307495 Пневматический высевающий аппарат ... воздуха через дозирующие элементы 4, что облегчает забор семян из дозирующих элементов 4 потоком воздуха в вертикальные трубки заборного устройства 6. Каждая трубка заборного устройства 6 может подавать семена или в отдельные сошники, или в один общий.Источники информации 1. АС СССР №1066477, 3 A01C 7/04, 1984.2. RU №2263434, 6 A01C 7/04, 2004 - прототип. Формула изобретения Пневматический высевающий аппарат, содержащий бункер, корпус, семенную камеру, вертикальный высевающий диск с дозирующими элементами, канал избыточного давления, установленный в верхней части корпуса, заборное устройство, расположенное вертикально и прижимаемое пружинами к диску, а так же крышку и прокладку ... 2234219 Композиция для отпугивания паразитов ... кожей, то пригодными эксципиентами для композиции являются эксципиенты и препаративные формы, применяемые в косметике. Они могут наноситься в форме растворов, эмульсий, мазей, кремов, паст, порошков, спреев и т.д.Для обработки сельскохозяйственных животных или комнатных животных, таких как коровы, лошади, ослы, верблюды, собаки, кошки, домашняя птица, овцы, козы и т.д., особенно пригодны так называемые композиции для полива или для точечной обработки; такие жидкие или полутвердые композиции обладают тем преимуществом, что их следует наносить только на небольшие участки шкуры или оперения и, благодаря присутствию в качестве компонента улучшающих распространение по поверхности масел ... 2028749 Капустоуборочная машина ... 52. Боковая поверхность 50 внутреннего барабана 44 имеет форму усеченного цилиндра (см. фиг. 6-8). Внутренний барабан 44 является бункером. Захватывающий элемент выполнен в виде основания 55, на котором перпендикулярно ему закреплено несколько кронштейнов 56, на которых размещены гребенка 57 и установленный на ползуне 58 нож с зубьями 59 (см. фиг. 10-11) для обеспечения возвратно-поступательного перемещения в имеющемся пазу гребенки 57. Гребенка 57 состоит из основания 60 гребенки с пазом 61, по которому передвигается возвратно-поступательно ползун 58 ножа, и из зубьев 62 гребенки 57. В нижней части каждого зуба 62 гребенки 57 имеется клин 63 (см. фиг. 12-13). Зубья 62 гребенки 57 и ... 2185045 Способ посева, устройство для его осуществления и семявысевающий аппарат конструкции ибрагимова ... 13 заглубляется в почву на заданную опорным колесом 12 глубину и перемещает почву в сторону, образуя борозду и гребень до секции катков 16, катки которых перекрывают междисковое пространство, выполняя роль ограничителей движения почвы и активных чистиков. В образовавшуюся борозду из тукового отсека 2 зернотукового ящика с помощью туковысевающего аппарата 8 подается удобрение по тукопроводу 9. Семена штучно отбираются и подаются в следующем порядке. В нижней части зернового 1 отсека зернотукового ящика в семявысевающем аппарате штучного отбора семян зубчатый диск 4, вращаясь по часовой стрелке, отбирает семена и опускает их в семяпровод, а наклон зубьев тем временем позволяет ... 2281645 Устройство для размещения цветов и растений с подсветкой (варианты) ... и установлена в направляющих ребрах с возможностью перемещения и фиксации, причем источник света размещен между опорной пластиной и емкостью, а его отражающая поверхность выполнена на опорной пластине. Также по второму варианту устройство может иметь несколько емкостей с оболочками, установленными с интервалами, а источники света выполнены в виде ламп, расположенных вдоль пластины.Предложенное устройство позволяет создавать для растений тепличные условия, обеспечивает освещение и подогрев, а также создает новые возможности, например, решая задачу вертикального настенного многоярусного озеленения, как на открытых пространствах, так и внутри помещений, что является достаточно новым ... |
Еще из этого раздела: 2277321 Колосоподъемник для косилочных систем уборочных машин 2494593 Способ повышения селена в чесноке горной зоны 2016512 Средство для борьбы против стресса у рыб и способ борьбы со стрессом у рыб 2275006 Устройство для крепления стеблей малины в вертикальном и горизонтальном положениях 2216908 Комбайн для уборки урожая с кустарников 2267261 Молочно-доильный комплекс 2053661 Устройство для сколачивания ульевых рамок 2165141 Тепличный гидропонный комплекс 2254705 Способ уплотнения и герметизации консервируемых кормов в рулонах 2469534 Перезаряжаемая электронная ловушка для животных с перегородкой, механическим переключателем в конфигурации с множеством поражающих пластин |