Способ получения растений-регенерантов rauwolfia vomitoria atz.Патент на изобретение №: 2070787 Автор: Батыгина Т.Б., Николаева Л.А., Упадхайя Н., Маковейчук А.Ю. Патентообладатель: Батыгина Татьяна Борисовна, Николаева Любовь Алексеевна, Упадхайя Нитьянанда, Маковейчук Александр Юрьевич Дата публикации: 27 Декабря, 1996 Адрес для переписки: подача заявки22.06.1993 публикация патента27.12.1996 Изображения  Использование: сельское хозяйство и биотехнология. Сущность изобретения: растения - регенеранты получают путем посадки стерильных эксплантов на питательную среду для каллусообразования, субкультивирования и индукции растений регенератов. При этом в качестве питательной среды используют среду Мурасиге-Скуга, содержащую макро- и микроэлементы, сахарозу, инозит, а также агар-агар в количестве 5500-6000 мг/л, тиамин 1-2 мг/л, пиридоксин 0,8-1,2 мг/л и никотиновую кислоту 0,8-1,2 мг/л. На этапе каллусообразования в среду дополнительно вводят 2,4-дихлорфеноксиуксусную кислоту 1,5-2,0 мг/л и 6-бензиламинопурин 1,0-2,0 мг/л, а на этапе субкультивирования каллуса в среду вводят 0,5-1,5 мг/л 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты. 2 пр. 2 табл. , ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУИзобретение относится к биотехнологии выращивания растений и сельскому хозяйству и может быть использовано для ускоренного массового размножения и получения лекарственного сырья ценных тропических видов, их оздоровления, а также в селекции и в исследованиях по генетике и морфогенезу. Известен способ почвенной культуры раувольфии рвотной, который включает посев семенами и выращивание растений до полной зрелости [1,2] Однако только около 30% семян является всхожими, поэтому чаще используется способ получения растений раувольфии рвотной с помощью рассады вегетативного размножения стебле-корневых черенков [2] Прототипом предполагаемого изобретения является биотехнологический способ ускоренного размножения раувольфии седоватой (близкого к раувольфии рвотной вида) in vitro [3] из каллусов листового происхождения на агаризованных питательных средах. Способ заключается в том, что молодые листья растений раувольфии седоватой стерилизуют и помещают на питательную среду для образования каллуса следующего состава, в мг/л: калия нитрат 3600-4000; аммония нитрат 1200-1800; кальция хлорид 80-120; магния сульфат 100-120; калия дигидрофосфат 160-200; агар 5500-6500; сахароза 24000-30000; инозит 80-120; тиамин 6-10; пиридоксин 0,8-1,2; никотиновая кислота - 0,8-1,2; аскорбиновая кислота 1-3; глутамин 15-25; микроэлементы по прописи Мурасиге и Скуга; -нафтилуксусная кислота 1,8-3; 6-бензиламинопурин 1,8-2,0. После образования каллуса отбирают плотные участки ярко-зеленого цвета и пересаживают их на питательную среду для индукции побегов, содержащую, в мг/л: минеральные соли, микроэлементы, сахароза, инозит по прописи Мурасиге и Скуга, агар 5500-6000; глутамин 15-25; тиамин 5-10; пиридоксин 1-1,5; аскорбиновая кислота 2-3; никотиновая кислота 1-1,5; 6-бензиламинопурин 1,5-2,5, и развившиеся побеги размножают микрочеренками. Однако этот способ не обеспечивает высокого выхода растений-регенерантов. Кроме того этот способ оказался неприемлемым для раувольфии рвотной, что связано со специфическими для каждого вида растений условиями, способствующими получению растений-регенерантов из тканей и клеток, культивируемых in vitro. Целью предполагаемого изобретения является увеличение выхода растений-регенерантов и ускоренное размножение и оздоровление растений раувольфии рвотной в культуре ткани. Поставленная цель в способе получения растений-регенерантов раувольфии рвотной в культуре ткани, включающем посадку стерильных эксплантов на питательную среду для каллусообразования, получение каллуса с переносом его на среды для индукции растений достигается тем, что получение каллуса растений осуществляют на модифицированной питательное среде Мурасиге и Скуга, содержащей в мг/л: минеральные соли, микроэлементы, сахароза и инозит по прописи Мурасиге и Скуга; агар 5500-6000; тиамин 1-2; пиридоксин - 0,8-1,2; никотиновая кислота 0,8-1,2; 2,4-дихлорфеноксиуксусная кислота - 1,5-2,0; 6-бензиламинопурин 1-2, с последующим субкультивированием каллуса на модифицированной питательной среде Мурасиге и Скуга, содержащей, в мг/л: минеральные соли, микроэлементы, сахарозу и инозит по прописи Мурасиге и Скуга, агар 5500-6000; тиамин 1-2; пиридоксин 0,8-1,2; никотиновая кислота 0,8-1,2; 2,4-дихлорфеноксиуксусная кислота 0,5-1,5, а индукцию растений проводят на модифицированной среде Мурасиге, содержащей в мг/л: минеральные соли, микроэлементы, сахароза и инозит по прописи Мурасиге и Скуга; агар 5500-6500; тиамин 1-2; пиридоксин 0,8-1,2; никотиновая кислота 0,8-1,2. Пример 1. Молодые листья растений Rauwolfia vomitoria Afz. моют мылом, промывают водой и стерилизуют активным хлором (раствор пантоцида, либо 5-10% раствор хлорной извести). Затем листья разрезают на фрагменты 0,5х0,5 см, делают насечки по всей поверхности листовой пластинки и помещают на основную питательную среду Мурасиге и Скуга для каллусообразования, в которую дополнительно вводят, в мг/л: агар 5500; тиамин 1; пиридоксин 0,8; никотиновая кислота 0,8; 2,4-дихлорфеноксиуксусная кислота 1,8; 6-бензиламинопурин 1,5. При использовании питательных сред другого состава [4] и прототипа также наблюдали образование каллуса, однако интенсивность его образования была ниже, либо образующийся каллус не был в дальнейшем способен к регенерации растений (табл. 1). Экспланты инкубировали в течение 35-45 дней при температуре 26-28oC. Из развившихся каллусов отбирают рыхлые каллусы и пересаживают их на модифицированную среду Мурасиге и Скуга для субкультивирования следующего состава, в мг/л: калия нитрат 1800; аммония нитрат 1650; магния сульфат 350; калия дифосфат 150; кальция хлорид - 410; микpоэлементы, железа хелат, инозит, сахароза по прописи Мурасиге и Скуга; тиамин 1; пиридоксин 0,8; никотиновая кислота 0,8; агар 5500; 2,4-дихлорфеноксиуксусная кислота 0,5. Через 30-40 дней полученный каллус переносят для субкультивирования на основную среду Мурасиге и Скуга, дополненную в мг/л: агаром 5500; тиамином 1; пиридоксином 0,8; никотиновой кислотой 0,8; 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислотой 0,5. Субкультивирование осуществляют при температуре 26-28oC при 16-часовом фотопериоде. Выбор среды обосновывается данными табл.2. Через 20-30 дней полученный эмбриоидогенный каллус переносят на среду Мурасиге и Скуга для развития растений, дополненную, в мг/л: агаром 5500; тиамином 1; пиридоксином 0,8; никотиновой кислотой 0,8. Пример 2. Подготовленные к культивированию in vitro, как указано в примере 1, молодые листья разрезают на фрагменты и помещают на основную питательную среду Мурасиге и Скуга для каллусообразования, в которую дополнительно вводят, в мг/л: агар 6500; пиридоксин 1,2; тиамин 2; никотиновая кислота 1,2; 2,4-дихлорфеноксиуксусная кислота 2,2; 6-бензиламинопурин 2,2. Экспланты инкубировали при температуре 26-28oC. Из развившихся каллусов отбирают рыхлые ткани и пересаживают их на модифицированную питательную среду Мурасиге и Скуга для субкультивирования следующего состава, в мг/л: калия нитрат 2000; аммония нитрат 1700; магния сульфат 380; калия дифосфат 180; кальция хлорид 460; микроэлементы, железа хелат, инозит, сахароза по прописи Мурасиге и Скуга; тиамин 2; пиридоксин 1,2; никотиновая кислота 1,2; агар 6000; 2,4-дихлорфеноксиуксусная кислота 1,5. Обоснование отсутствия эффекта за пределами оптимальных концентраций представлено в табл.2. Через 30-40 дней полученный каллус переносят для дальнейшего субкультивирования на основную среду Мурасиге и Скуга, дополненную, в мг/л: агаром 6000; тиамином 2; пиридоксином 1,2; никотиновой кислотой 1,2; 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислотой 1,5. Субкультивирование осуществляют при температуре 26-28oC при 16-часовом фотопериоде. Через 20-30 дней полученный эмбриогенный каллус переносят для развития растений на среду Мурасиге и Скуга, дополненную, в мг/л: агаром 6000; тиамином 2; пиридоксином 1,2; никотиновой кислотой 1,2 (табл.2). Таким образом, выход растений-регенерантов увеличивается в 1,5-2,0 раза, при этом полученные растения-регенеранты были оздоровленными и морфологически не отличались от исходных растений. Использование предлагаемого изобретения позволяет ускоренно размножать ценное лекарственное растение-продуцент противоаритмических и гипотензивных препаратов, наиболее высокоалкалоидный из всех видов раувольфии раувольфию рвотную. Весь процесс от получения каллуса до развития растений занимает в среднем 4 мес. Выход растений на 1 исходный каллус составляет более 6000 растений за 6 мес. культивирования. Одновременно растения освобождаются от бактериальной, грибной и вирусной инфекции. В селекционно-семеноводческой работе с раувольфией этот способ позволяет значительно сократить выведение новых сортов.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯСпособ получения растений-регенерантов Rauvolfia vomitoria Atz. в культуре ткани, включающий посадку стерильных эксплантантов на питательную среду для каллусообразования, получение каллуса и перенос его на среду для индукции растений-регенерантов, отличающийся тем, что каллус дополнительно субкультивируют, причем этапы получения каллуса, субкультивирования его и индукции растений-регенерантов осуществляют на среде Мурасиге-Скуга, содержащей макро- и микроэлементы, сахарозу, инозит, а также агар-агар в количестве 5500 6000 мг/л, тиамин 1 2 мг/л, пиридоксин 0,8 1,2 мг/л, никотиновую кислоту 0,8 1,2 мг/л и на этапе каллусообразования в среду дополнительно вводят 2,4-дихлорфеноксиуксусную кислоту в количестве 1,5 2,0 мг/л и 6-бензиламинопурин 1,0 2,0 мг/л, а на этапе субкультивирования каллуса в среду вводят дополнительно 0,5 1,5 мг/л 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты.Популярные патенты: 2231250 Устройство для промышленного выращивания земляники и других растений ... быть патент РФ 2105468 “Устройство для промышленного выращивания земляники” по М. кл. А 01 G 31/06.Прототипное устройство содержит каркас, на который крепится вертикально расположенная растильня в виде двустороннего многослойного растительного поля (с несущей сеткой, светопоглощающей и светоотражающей пленками), внутренний слой которого выполнен гигроскопическим. Устройство также имеет систему подачи питательного раствора рециркуляторного типа с биофильтром, двумя резервуарами, поддоном, систему освещения, санпропускник, систему кондиционирования с использованием биофильтров и созданием небольшого избыточного давления в помещении. Выращивание растений производится в почти ... 2279799 Балансир рыболовный ... его свойства как приманки для рыбы.Технический результат достигается тем, что балансир имеет корпус в виде призмы, два крыла, причем корпус и крылья монолитны, и каждое крыло имеет форму равнобедренной трапеции с скругленными углами при ее основаниях, а корпус дополнительно снабжен металлической штангой с петлей-застежкой для крепления крючка-тройника; трейлер укреплен на корпусе с возможностью перемещения по горизонтали максимально на угол 180° и возможностью перемещения по вертикали максимально на угол 30°.Исследованием уровня техники установлено, что балансиров, имеющих монолитные корпус и крылья в виде равнобедренной трапеции, трейлер, укрепленный на корпусе с ... 2055465 Система приготовления и подачи питательного раствора в теплице ... системы, а также снизить потребление энергии при эксплуатации системы. 3 з. п. ф-лы, 2 ил. , ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ Изобретение относится к устройствам для выращивания растений методом гидропоники и может быть использовано в сельском хозяйстве. Известна система орошения многоярусной узкостеллажной гидропонной установки, включающая емкость для питательного раствора, связанную с емкостью систему трубопроводов для подачи и слива раствора, датчики концентрации и температуры питательного раствора, емкости для ингредиентов питательного раствора, насосы-дозаторы [1] Однако, такая система не обеспечивает достаточно высокой точности приготовления питательного ... 2463776 Система и способ для массовой валки деревьев ... для наилучшей возможной выполняемой оценки. С другой стороны, в таком случае к измерению предъявляются также более умеренные требования.Прочие преимущества, обеспечиваемые изобретением, раскрыты далее по тексту в подробном описании изобретения.Краткое описание чертежей Далее приведено более подробное описание предпочтительного варианта изобретения, по ходу которого сделаны ссылки на сопровождающие чертежи, на которых:- на фиг.1 показана схематическая аксонометрическая фронтальная проекция предложенной системы, со средствами захвата и сучкорезными средствами харвестерной головки в раскрытом положении;- на фиг.2 показана харвестерная головка, проиллюстрированная на фиг.1, с ... 2442301 Устройство почвообрабатывающего орудия ... 6 установятся с углом атаки. Разница в длине длинных 2 и коротких 3 кронштейнов выбирается из условия заданного угла атаки, определяемого требованиями технологии обработки почвы и конструкции батареи кольцевых катков 6.При таком расположении батареи кольцевых катков на почвообрабатывающих орудиях у соединенных сцепкой машин в составе агрегата повышается качество обработки почвы путем исключения образования гребней на стыках батарей кольцевых катков. Расположенные параллельно друг другу по обеим сторонам от осевой линии агрегата батареи кольцевых катков почвообрабатывающих орудий не образуют гребней, а выравнивающая грунт планка засыпает почвой борозды, оставленные задним рядом ... |
Еще из этого раздела: 2027346 Лесозаготовительная машина 2092004 Композиционный состав для обработки растений и их органов 2388213 Способ измерения урожайности травяного покрова 2490869 Способ направленного изменения циркуляции воздушных масс и связанных с ней погодных условий 2239968 Способ предпосевной обработки семян овощных культур 2102853 Питательное устройство для растений 2106081 Животноводческая ферма с применением помещений круглой формы и способ содержания в ней, например, крупного рогатого скота 2233582 Устройство для охлаждения молока 2140137 Универсальный способ получения проросших семян сельскохозяйственных культур 2275804 Способ повышения продуктивности птицы |
Изобретения в сельском хозяйстве
Обработка почвы в сельском и лесном хозяйствах
Посадка, посев, удобрение
Уборка урожая, жатва
Обработка и хранение продуктов полеводства и садоводства
Садоводство, разведение овощей, цветов, риса, фруктов, винограда, лесное хозяйство
Новые виды растений или способы их выращивания
Производство молочных продуктов
Животноводство, разведение и содержание птицы, рыбы, насекомых, рыбоводство, рыболовство
Поимка, отлов или отпугивание животных
Консервирование туш животных, или растений или их частей
Биоцидная, репеллентная, аттрактантная или регулирующая рост растений активность химических соединений или препаратов
Хлебопекарные печи, машины и прочее оборудование для хлебопечения
Машины или оборудование для приготовления или обработки теста
Обработка муки или теста для выпечки, способы выпечки, мучные изделия
|
|
||