Способ образования одно- и двунитевых разрывов в днк и индуцирования хромосомных аберраций у кукурузыПатент на изобретение №: 2037291 Автор: Бурилков Виктор Константинович[MD], Чесноков Юрий Валентинович[MD], Пащенко Василий Михайлович[MD] Патентообладатель: Институт генетики АН РМ (MD) Дата публикации: 19 Июня, 1995 Адрес для переписки: подача заявки07.09.1992 публикация патента19.06.1995 Изображения Использование: биотехнология, селекционно-генетические исследования, мутагенез растений. Сущность изобретения: различные хромосомные аберрации у кукурузы получают путем воздействия на клетки лазерным излучением длиной волны 337,1 нм в присутствии 6-меркаптопурина. 2 табл. ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУИзобретение относится к биологии, а именно к генетике, и может быть использовано в селекции сельскохозяйственных растений для получения разнообразного исходного материала, например кукурузы. Образование разрывов в молекуле ДНК и индуцирование хромосомных аберраций может быть осуществлено за счет двухквантовой афинной модификации (ДАМ). Селективность при осуществлении этого метода обеспечивается за счет применения красителей, избирательно образующих комплексы с биологическими микромолекулами определенного класса. Такие красители, как псоралены, акридины, бромистый этидий с молекулой ДНК, в основном образуют комплексные связи по типу интеркалирования. Активация таких комплексов лазерным излучением (ЛИ) приводит к образованию разрывов в молекуле ДНК за счет переноса энергии с прижизненного красителя на ДНК. Эти разрывы в процессе индивидуального развития организма реализуются в разнообразные мутации. Известен способ образования разрывов в ДНК и индуцирования хромосомных аббераций, заключающийся в том, что для образования разрывов в ДНК и получения хромосомных аберраций используют лазерное излучение (длина волны 337,1 нм) и прижизненные красители бромистый этидий (Et. Br.) и акридин оранжевый (АО) [1] Однако этот способ недостаточно эффективен, т.к. облучение клеток лазером ( 337,1 нм) в присутствии данных хромофоров-фотосенсибилизаторов повышает частоту хромосомных аберраций примерно в два-три раза. Задача изобретения увеличить выход одно- и двунитевых разрывов в ДНК и хромосомных аберраций у сельскохозяйственных растений, в частности у кукурузы. Задача решается предлагаемым способом образования разрывов в ДНК и индуцирования хромосомных аберраций у кукурузы, в котором в качестве прижизненного красителя фотосенсибилизатора используют 6-меркаптопурин (6 МП). Использование данного красителя в сочетании с лазерным излучением ( 337,1 нм) в 2,5 и 5 раз увеличивает эффективность образования разрывов в ДНК кукурузы и 3,8 и 8,5 раз частоту хромосомных аберраций в митотических клетках кукурузы по сравнению с бромистым этидием и акридином оранжевым соответственно. Способ осуществляют следующим образом. Выделяют ДНК из молодых листьев кукурузы известным способом (Клонирование ДНК. Методы. М. Мир, 1988, с. 362-363), готовят комплекс ДНК 6 МП в 0,1 х SSC буфере в соотношении 1:5. Концентрации: ДНК 100 мкг/мл и 6 МП 1 10-5 М. Затем комплекс активируют лазерным излучением ( 337,1 нм) в течение 1 мин. Плотность мощности 0,7108 Вт/м2. Оценку эффективности проводят по количеству разрывов в ДНК, выявляемых методом электрофореза в 0,8%-ном агарозном геле при напряженности 1 В/см, в течение 16-18 ч. Данные представлены в табл. 1. Из данных, представленных в табл. 1 видно, что при использовании в качестве красителя 6 МП удается увеличить эффективность образования разрывов в ДНК в 2,5 раза по сравнению с применением бромистого этидия и в 5 раз по сравнению с акридином оранжевым. Оценку мутагенной активности по хромосомным аберрациям проводят следующим образом. Проросшие корешки кукурузы длиной 3-4 мм замачивают на 24 ч в красителе 6 МП при концентрации 110-5, а затем тщательно отмывают в дистиллированной проточной воде. Непосредственно после промывки подвергают обработке лазерным излучением ( 337,1 нм) в течение 1 мин при плотности мощности 0,7108 Вт/м2. По завершению облучения корешки фиксируют и готовят препараты известным способом. (Паушева З. П. Практикум по цитологии растений. М. Колос, 1974). Частоту хромосомных аберраций подсчитывают в ана- и телофазах митоза по традиционной методике (Гостимский С.А. и др. Практикум по цитогенетике. М. 1974). Данные представлены в табл. 2. Анализ данных табл. 2 показывает, что предлагаемый способ позволяет увеличить частоту хромосомных аберраций в 3,8 и 8,5 раз по сравнению с известным способом, где используют в качестве красителей бромистый этидий и акридин оранжевый соответственно. Следовательно, предлагаемый способ позволяет значительно увеличить эффективность образования разрывов в ДНК кукурузы и частоту хромосомных аберраций в митотических клетках кукурузы, что в конечном итоге даст возможность расширить спектр исходного материала при селекции кукурузы.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯСПОСОБ ОБРАЗОВАНИЯ ОДНО- И ДВУНИТЕВЫХ РАЗРЫВОВ В ДНК И ИНДУЦИРОВАНИЯ ХРОМОСОМНЫХ АБЕРРАЦИЙ У КУКУРУЗЫ, включающий облучение клеток лазерным излучением длиной волны 337,1 нм в присутствии красителя-сенсибилизатора, отличающийся тем, что в качестве красителя-сенсибилизатора, используют 6-меркаптопурин.Популярные патенты: 2166252 Способ удаления костного мозга из губчатых костных трансплантатов ... структуру и состав кости и не улучшало ее биопластических свойств (Савельев В. И., Родюкова Е.Н. Реакции организма на трансплантацию костной ткани. - Новосибирск, "Наука", Сибирское отделение, 1985, С.74). Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату является способ обработки ксенокости перекисью водорода, эфиром, ацетоном и этилендиамином (Савельев В. И., Родюкова Е.Н. Реакции организма на трансплантацию костной ткани. - Новосибирск, "Наука", Сибирское отделение, 1985, C. 74). Однако, этот способ не обеспечивает получение так называемой "чистой кости". Техническим результатом, на достижение которого направлено создание данного изобретения, является повышение ... 2403703 Способ интенсификации роста растений ... активной воды, исходная вода обрабатывается при 100°С, затем в ходе ее охлаждения, не быстрее 1°С/мин, подвергается герметизации, начиная с температуры от 100 до 70°С, преимущественно 84-80°С, до температуры окружающей среды, и затем направляется на обработку биологических объектов путем погружения в активированную воду на 15 мин до 8 ч, преимущественно 0,5-1 ч при модуле ванны от 1 до 20, преимущественно от 3 до 5, распыления активированной воды и полива активированной водой. MM4A Досрочное прекращение действия патента из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе Дата прекращения действия патента: 20.03.2011 Дата публикации: ... 2234219 Композиция для отпугивания паразитов ... паразитов, кроме того, часто у клещей развивается устойчивость к химическим действующим веществам.Заражение блохами домашних животных и комнатных животных также все еще представляет для владельца проблему, которую не удается удовлетворительно решить или которая может быть решена только с помощью значительных затрат. Так же, как и клещи, блохи не только причиняют беспокойство, но и являются переносчиками болезней, они передают различные грибные болезни от животного-хозяина другому животному-хозяину и владельцу животного, в особенности во влажных местностях с теплым климатом, например, в Средиземноморье, в южной части США и т.д. К группе риска относятся прежде всего люди с ослабленной ... 2060618 Пневматический высевающий аппарат ... границы зоны, находящейся под разряжением. В дальнейшем семена отрываются от диска и, двигаясь по инерции и под действием силы тяжести, попадают в выбросное окно и далее в сошник. Разгрузившись от семян, присасывающие отверстия вновь входят в заборную камеру, и процесс повторяется многократно. Если же величина разряжения избыточна, то ее можно уменьшить путем открытия заслонки в распределительном коллекторе пневматической системы сеялки. Для переналадки сеялки для высева, например, кормовых бобов, снимают крышку высевающего аппарата. Водилом дугообразную пластину 28 приводят в крайнее положение, при котором вырез 25 полностью открыт. Размещают в вырезе вкладыш средний по длине ... 2496298 Узел крепления пальцев подборщика ... совокупность существенных признаков, а именно наличие в кронштейнах пазов, ширина и глубина которых соответствуют ширине и вылету средней части пальца, а их высота - толщине пальца, а также наличие фиксатора для фиксации средней части пальца, выполненного в виде подпружиненного замка, позволяет обеспечить надежную фиксацию пальцев, снизить трудоемкость процесса монтажа-демонтажа пальцев и упростить конструкцию узла крепления за счет отсутствия резьбового соединения в узле крепления, не известна и не следует явным образом из уровня техники, что подтверждает доказательство соответствия технического решения как критерию «новизна», так и критерию «изобретательский ... |
Еще из этого раздела: 2271095 Многофункциональное устройство 2060659 Установка для переработки органического субстрата в биогумус 2453090 Способ минимальной обработки почвы 2500104 Способ приготовления препарата костной ткани и набор для его осуществления 2397634 Жалюзийное решето 2201663 Устройство для ориентированной посадки лука 2053664 Медогонка 2056755 Способ регулирования роста овощных культур 2394414 Соединительное устройство для сельскохозяйственной машины 2384065 Инсектоакарицидное средство |
Изобретения в сельском хозяйстве
Обработка почвы в сельском и лесном хозяйствах
Посадка, посев, удобрение
Уборка урожая, жатва
Обработка и хранение продуктов полеводства и садоводства
Садоводство, разведение овощей, цветов, риса, фруктов, винограда, лесное хозяйство
Новые виды растений или способы их выращивания
Производство молочных продуктов
Животноводство, разведение и содержание птицы, рыбы, насекомых, рыбоводство, рыболовство
Поимка, отлов или отпугивание животных
Консервирование туш животных, или растений или их частей
Биоцидная, репеллентная, аттрактантная или регулирующая рост растений активность химических соединений или препаратов
Хлебопекарные печи, машины и прочее оборудование для хлебопечения
Машины или оборудование для приготовления или обработки теста
Обработка муки или теста для выпечки, способы выпечки, мучные изделия
|
|
||