Консервант для хранения перевиваемых клетокПатент на изобретение №: 2036234 Автор: Лавин П.И., Слободенюк А.В., Гоголева О.Ю. Патентообладатель: Товарищество с ограниченной ответственностью - Научно- внедренческое предприятие "АПТ-Экология" Дата публикации: 27 Мая, 1995 Использование: биотехнология, микробиология. Сущность: консервант для хранения культуры перевиваемых клеток содержит питательную среду 199, нативную бычью сыворотку, а также в качестве стабилизатора клеток - экстракт люцерны конденсированный в концентрации 4,5 - 5,0%. Изобретение относится к биотехнологии и касается составов сред-консервантов для хранения (или транспортирования) перевиваемых клеток и может быть использовано для вирусологических исследований с вирусами, имеющими большой цикл размножения (например, вирусы парагриппа). Известен способ сохранения культур клеток животных (авт. св. СССР N 1339127, 1985), позволяющий длительное время поддерживать жизнеспособность культуры клеток. Суспензии клеток животных СПЭВ, ПТ-80 и ТР хранят в предварительно обработанных силиконом емкостях в среде роста с 10% сыворотки крупного рогатого скота (КРС). Все три перевиваемые культуры клеток при хранении способны к длительному пассированию в течение 2 лет (срок наблюдения). Известна среда для консервации клеточных культур (авт. св. СССР N 1192762, 1984), содержащая питательную среду и криопротектор, в качестве которого использован оксиэтилированный глицерин, среду 199 или 0,5%-ный гидролизат лактольбумина на растворе Хэнкса. Известная среда может быть использована при низкотемпературной консервации культур клеток. Известен также способ хранения культуры микроорганизмов путем подращивания культуры и выдерживания ее при пониженной температуре (авт. св. N 1157054, 1981). Подращивание проводят в течение 3-4 ч и хранят культуру в 2% -ном сывороточном агаре при 4-10оС. Известен способ консервации клеток Fesarlum Moniliforme Pg-7 путем замораживания в среде криопротектора, в качестве которого используют 1-3%-ный раствор сахарозы или 1-5%-ный раствор глицерина. Известный способ обеспечивает 100%-ную жизнеспособность клеток. Известен способ хранения культур бактерий (авт. св. СССР N 1074900, 1982), в котором предусмотрен посев суспензий бактерий в пробирку с питательной средой, содержащей тиосульфат натрия в качестве источника энергии, источник азота, минеральные соли, дрожжевой экстракт и выщелочный агар. Известный способ позволяет сохранять в течение длительного периода времени высокую активность и сохранность культур. Известен способ сохранения иммунокомпетентных клеток путем культивирования их в питательной среде (авт. св. СССР N 1073281, 1983), при котором питательную среду предварительно охлаждают до 5-15оС и вводят в нее 10%-ный раствор желатина. Затем питательную среду постепенно охлаждают и хранят при температуре от 0 до 4оС. Известен способ хранения культур клеток в среде поддержания (авт. св. СССР N 905281, 1980), в качестве которой используют ультрафильтрат сывороточной ростовой среды, содержащей компоненты с молекулярным весом до 14 тыс. Да. Использована ростовая питательная среда Игла, содержащая 10% сыворотки, в которую помещают перевиваемые культуры клеток ВНК-21. Через 2 дня ростовую среду меняют на поддерживающую, в качестве которой используют ультрафильтрат ростовой среды, и инкубируют при 37оС. При ежедневной смене среды роста жизнедеятельность клеток сохраняется в течение 40 сут. Известен консервант для микрофлоры (авт. св. СССР N 514018, 1974), содержащий кислый фосфатный натрий, хлористый натрий и вазелиновое масло. Консервант может быть использован в эпидемиологических и микробиологических исследованиях. Хлористый натрий вводят для поддержания жизнеспособности микроорганизмов, а вазелиновое масло для уменьшения испарения консерванта. Известен способ стабилизации клеточных мембран (заявка Франции N 2617185 кл. С 12 N 5/09, 1988) путем обработки их бифункциональным стабилизатором, который способствует их отверждению и консервации клеток. Известен способ сохранения и поддержания активности микроорганизмов (международная заявка (РСТ) N 87/06257, кл. С 12 М 1/12, 1987) и способ замораживания и хранения биологических клеток или тканей (заявка Японии N 1-60441, кл. А 01 N 1/02, 1989), в которых используют холод, подаваемый в камеру с суспензией биологических клеток или тканей. Известна транспортная среда для микроорганизмов (заявка ФРГ N 3812194, кл. С 12 N 1/20, 1989), состоящая из 2-10 г агара, 1-3 г мясного экстракта, 0,1-1,0 г хлорида натрия, 0,1-0,5 г хлорида кальция, 0,1-0,5 г хлорида магния, 0,5-2,0 г триоглюколята натрия, 2,0-10,0 г глицеринфосфата натрия, воды до 1000 г. Среда имеет рН 7,3  0,1, при 25оС (ПРОТОТИП). Анализируя известные консерванты для сохранения клеток или тканей, можно сделать вывод о том, что в них либо необходимо применение криопротекторов при замораживании объектов хранения, либо известные консерванты сложны в изготовлении. Целью изобретения является упрощение изготовления консерванта. Для этого в известном консерванте для хранения (или транспортирования) культуры первичных и перевиваемых клеток, содержащем основу, стабилизатор состояния клеток и воду, в качестве стабилизатора состоянии клеток используют экстракт растительный конденсированный; среду роста +5% НБС в качестве основы. Экстракт растительный конденсированный (Эраконд) представляет собой препарат, полученный из люцерны (сена люцерны) при обработке экстрагентом, содержащим в своем составе растворимые соли металлов в мг на 1 кг растительной массы, например, в следующем соотношении: Мо 8,0, Ва 10,0, Рв 20,0, Со 1,05, V 1,0, Сz 0,5, Zn 200,0, Fe 300,0, Sn 40,0. Смоловидную форму Эраконда растворяли в бидистиллированной воде в течение 1 сут при 20-22оС для получения 10%-ного раствора. Флаконы с раствором центрифугировали в течение 15 мин при 3000 об/мин. Недостаточную жидкость фильтровали через систему фильтрующих (0,45 мк) и стерилизующих (0,22 мк) фильтров фирмы "Миклипор" и ампулировали. В качестве объекта исследования использовали культуру перевиваемых клеток Л-41, в среду культивирования которой (среда 199) вносили стерильный раствор Эраконда до получения конечной концентрации 0,5; 1,0; 3,0; 5,0. Среда роста содержала до 5% нативной бычьей сыворотки. При определении оптимальной концентрации Эраконда в среде культивирования Л-41 установлено. В контрольной культуре клеток (без Эраконда) через 24 ч обнаруживались крупные клетки полигональной формы со светлой цитоплазмой и четкими границами. Плотность монослоя была неполной. Через 72 ч инкубации клетки формировали плотный монослой с мелкой зернистостью в цитоплазме. На 4 сут роста контрольная культура содержала около 10% дегенерирвоанных клеток в монослое. При дальнейшем инкубировании деструктивные процессы усиливались и на 7сут основная часть монослоя представляла собой дегенерированные клеточные элементы. Культура Л-415 (среда роста с 5%-ным содержанием Эраконда) на 2 сут инкубирования формировала монослой, представленный мелкими клетками округлой формы со светлой прозрачной цитоплазмой и выраженными границами. Ровный и плотный монослой сохранялся до 23 дн. В контрольной культуре в процессе старения в монослое появлялись участки наслоения в виде трехмерных клеточных структур. Культура Л-413 (среда роста с 3%-ным содержанием Эраконда) через 24 ч инкубирования представляла собой неплотный монослой. Клетки имели мелкие размеры с отчетливо конструированными ядром и 3-5 ядрышками. Имелись дегенерированные клетки. Через 96 ч монослой был разряженным, отслоившиеся клетки находились в среде роста. Отмечалась выраженная цитоархитектоника клеток монослоя. На 7 сут наблюдалось усиление деструктивных процессов и на стекле сохранялись лишь отдельные клеточные элементы. Культура клеток Л-411 (среда роста с 1%-ным содержанием Эраконда) через 24 ч инкубирования формировала такой же монослой, как в контроле, но клетки имели более мелкие размеры, много клеток находилось в среде роста. На 4 сут роста в монослое образовывались окна из-за массового отслоения клеток от стекла. Клетки имели мелкие размеры, округлую форму. Часть клеток дегенерировали. На 7 сут роста образовывались симпласты, на 9 сут наблюдалась полная дегенерация клеток культуры. Культура клеток Л-410,5 (среда роста с 0,5%-ным содержанием Эраконда) не формировала монослоя. Таким образом, культивирование клеток Л-41 в среде роста, содержащей 5% -ный раствор Эраконда, может быть использована в качестве консерванта в условиях длительного хранения и транспортирования клеточной культуры.
Формула изобретенияКОНСЕРВАНТ ДЛЯ ХРАНЕНИЯ ПЕРЕВИВАЕМЫХ КЛЕТОК, содержащий питательную среду, нативную бычью сыворотку, стабилизатор клеток, отличающийся тем, что в качестве стабилизатора он содержит экстракт люцерны конденсированный, а в качестве питательной среды среду роста 199 при следующем соотношении компонентов, мас. Нативная бычья сыворотка 4,5 5,0 Экстракт люцерны конденсированный 4,5 5,0 Среда роста 199 ОстальноеMM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе Номер и год публикации бюллетеня: 24-2000 Извещение опубликовано: 27.08.2000 Популярные патенты: 2473735 Электрический рыбозаградитель направляющего действия (варианты) ... состоит из двух полусекций, по одной полусекции из каждого ряда электродов. Технический результат предложенного устройства проявляется в улучшении характеристик отхода рыб из зоны действия рыбозаградителя за счет снижения воздействия подходного потока на рыб в процессе их выхода из электрического поля, создаваемого устройством, и повышении эффективности функционирования устройства. На чертеже схематически показан частный случай выполнения заявленного устройства.Устройство содержит электронный блок управления 1, к которому подключены расположенные под углом к подходному потоку два ряда объединенных в полусекции электродов. При этом устройство имеет V-образную конфигурацию. ... 2496309 Зубчатое устройство для вычесывания домашних животных с механизмом выброса шерсти ... выбрасывающей шерсть части с граничными сегментами зубчатой части.12. Способ по п.7, согласно которому внешнее усилие, приложенное к ручке для перемещения зубцов зубчатой части относительно меха домашнего животного, прикладывают рукой человека, и внешнее усилие, приложенное к устройству для вычесывания домашних животных способом, перемещающим кромку выталкивающей шерсть части из первого положения во второе положение, прикладывают большим пальцем руки человека, когда он держит ручку в руке.13. Способ по п.7, согласно которому устройство для вычесывания домашних животных содержит по меньшей мере один винт с резьбой, и при этом дополнительно отделяют выбрасывающую шерсть часть от ... 2468582 Инсектицидно-фунгицидный состав и способ борьбы с вредителями и болезнями крестоцветных культур ... компонентов.Цель изобретения - повышение эффективности защиты всходов крестоцветных культур от вредителей - крестоцветных блошек и болезней фузариоза, увеличение надежности и длительности действия состава.Технический результат достигается тем, что заявляемый инсектицидно-фунгицидный состав для предпосевной обработки семян, включающий инсектицид, фунгицид, микроэлементный биологически активный состав (МиБАС), стимулятор роста и развития растений и воду, согласно изобретению содержит в качестве инсектицида имидоклоприд (КОМАНДОР), в качестве фунгицида трифлоксистробин (ЗАТО), а в качестве стимулятора роста и развития растений - РАДИФАРМ, при следующих соотношениях компонентов, мас.%: ... 2437262 Культиватор-плоскорез ... уровня, параллельного плоскости центральной секции рамы, при этом концы поперечных балок боковых секций рамы, сопрягаемые с центральной секцией, размещены с зазором над рамой центральной секции, кроме того, с рамами боковых секций посредством шарниров с вертикальной осью сопряжены рамки с плоскорезными лапами, поворотные в горизонтальной плоскости.3. Культиватор-плоскорез по п.1, отличающийся тем, что на центральной секции расстояние между передним и задним рядами лап s1 составляет 1,8 2,2 ширины междуследия лап, а на боковых рамках - s 2=0,6 0,85 их междуследия.4. Культиватор-плоскорез по п.1, отличающийся тем, что на центральной секции сзади плоскорезных лап, размещенных ... 2210910 Способ обработки растений и используемая в нём композиция для защиты растений ... и этофумезата в соотношении 1:1:1 в количестве 0,9 кг/га, препарата из биомассы микромицета Mortierella nigrescens в пересчете на суммарное содержание хитозана, арахидоновой и эйкозапен-таеновой кислот в количестве 20 мг/га и воды в количестве 300 л/га. Полученной композицией обрабатывают свеклу в фазе 2 пар настоящих листьев. По сравнению с эталоном, обработанным той же композицией без препарата из биомассы, урожайность повышена на 30%, скорость разложения токсичных веществ в растениях увеличилась в 2,4 раза, на почве в 1,9 раза. Пример 4 Инсектицидную композицию готовят путем смешивания токсичного вещества хлорофоса в количестве 0,5 кг/га, препарата из биомассы микромицета ... |
Еще из этого раздела: 2235450 Малогабаритная машина для обескрыливания, очистки и сортирования лесных семян 2192734 Устройство для производства прессованных кип из корней лекарственных растений 2132610 Устройство обогрева сельскохозяйственных животных и птицы 2016512 Средство для борьбы против стресса у рыб и способ борьбы со стрессом у рыб 2007901 Устройство для хранения овощей и фруктов 2475020 Способ подбора лучших сортов опылителей для насаждений яблони 2055465 Система приготовления и подачи питательного раствора в теплице 2409937 Растение с высоким содержанием ребаудиозида а 2048752 Дождевальная машина 2437864 Способ микробиологической переработки птичьего помета |
Изобретения в сельском хозяйстве
Обработка почвы в сельском и лесном хозяйствах
Посадка, посев, удобрение
Уборка урожая, жатва
Обработка и хранение продуктов полеводства и садоводства
Садоводство, разведение овощей, цветов, риса, фруктов, винограда, лесное хозяйство
Новые виды растений или способы их выращивания
Производство молочных продуктов
Животноводство, разведение и содержание птицы, рыбы, насекомых, рыбоводство, рыболовство
Поимка, отлов или отпугивание животных
Консервирование туш животных, или растений или их частей
Биоцидная, репеллентная, аттрактантная или регулирующая рост растений активность химических соединений или препаратов
Хлебопекарные печи, машины и прочее оборудование для хлебопечения
Машины или оборудование для приготовления или обработки теста
Обработка муки или теста для выпечки, способы выпечки, мучные изделия
|
|
||