Способ определения стрессовой чувствительности кур мясного направления продуктивности

Изобретение относится к животноводству, в частности к птицеводству. Для снижения общего стрессового воздействия выпаивают через автоматические поилки за 2 суток до пробы, в день пробы и 2 суток после пробы раствор лития цитрата в дозе 33-37 мг на 1 кг живой массы. Проводят тестирование кур путем внутрикожного введения 60-70% раствора скипидара в область бородки. Результаты тестирования оценивают через 21-36 часов, по наличию или отсутствию признаков воспаления - утолщение бородки, более высокая местная температура, выраженная краснота, болезненность при пальпации. При отсутствии перечисленных признаков реакцию оценивают отрицательно и птицу признают стресс-устойчивой. При наличии всех признаков воспаления - утолщение бородки 0,4 см и более, повышение местной температуры на 2°С и более по сравнению с интактной бородкой, выраженная краснота и болезненность - реакцию считают положительной и птицу признают стресс-чувствительной. При утолщение бородки менее 0,4 см, слабое покраснение, незначительная болезненность при пальпации и повышения местной температуры менее 2°С по сравнению с интактной бородкой - реакцию оценивают как сомнительную и птицу считают стресс-сомнительной. Раздражающее вещество в минимальных концентрациях вызывает проявление локального адаптационного синдрома, за счет чего использование данного способа не вызывает общую стрессовую реакцию организма и позволяет достичь стабильных результатов. 4 табл., 1 пр.

Изобретение относится к животноводству, в частности к птицеводству, а именно к определению у кур мясного направления продуктивности чувствительности к стрессам и формированию стресс-устойчивых родительских стад. Известно, родительское стадо для производства бройлеров комплектуют из ремонтного молодняка. Существуют различные способы отбора ремонтного молодняка для комплектования родительского стада. Одним из важных направлений селекции является отбор по степени чувствительности к стрессам.

Известен способ определения стрессовой чувствительности цыплят и кур ремонтного молодняка по определению биологического потенциала (БИП) [1]. Тестирование проводят любым мультиметром при наличии плюс и минус электродов соответственно в контакте с правой и левой конечностью в сосудах из диэлектрика, заполненных водой или любым дезосредством комнатной температуры. К стресс-устойчивым относят ремонтный молодняк с показателями БИП (мкА или мкВ) выше (+1 сигма), к стресс-чувствительным относят особей с БИП ниже (-1 сигма) от средних значений конкретной популяции.

Метод имеет преимущество вследствие того, что можно тестировать цыплят раннего возраста.

Недостатком данного метода является то, что светимость и фазы Луны оказывают влияние на биоэлектрические показатели [2]. Эти факторы необходимо учитывать при постановке пробы, а это в условиях птицефабрик не всегда осуществимо, вследствие планового характера обработок птицы и может прямым образом сказаться на результатах тестирования.

В качестве прототипа выбран способ определения стрессовой чувствительности птицы, заключающийся во введении сока каланхоэ в область бородки с помощью ветеринарного безигольного инъектора для внутрикожных введений и оценке реакции, проявляющейся в виде локального адаптационного синдрома, через 24 часа после введения тестирующего вещества [3].

Недостатками данного способа являются:

во-первых, способ был разработан на курах яичного направления продуктивности и не прошел апробацию на курах мясного направления продуктивности;

во-вторых, сок каланхоэ не является истинным раздражающим веществом, а относится к группе препаратов «Биогенные стимуляторы», обладающим местным противовоспалительным действием, стимулирующим регенерацию тканей организма. Раздражение тканей для него является действием побочным, которое проявляется в редких случаях и не у всех особей [4]. Это связано с тем, что отбор кур для комплектования родительского стада по степени стрессовой чувствительности предполагает введение раздражающего вещества с помощью безигольного инъектора большому поголовью кур. Форма, размер и толщина бородок у кур в стаде имеет существенные вариации, что, в свою очередь, обусловливает проникновение разных количеств раздражающего вещества в бородку при введении одинаковой дозы. Учитывая этот факт, используемое вещество должно обладать высокой раздражающей способностью для того, чтобы в случае введения курам с относительно тонкими бородками, толщиной менее 0,2 см оно проявило свое действие и вызывало развитие локального адаптационного синдрома;

в-третьих, при использовании сока каланхоэ необходимо соблюдать правила асептики и антисептики, дополнительно обрабатывая место инъекции антисептическим раствором, что приводит к увеличению затрат времени, требуемого для постановки пробы;

в-четвертых, данный способ не прошел широкомасштабные производственные испытания. В связи с этим отсутствуют сведения о воспроизводимости и стабильности результатов тестирования. На основании вышеизложенных недостатков данный способ не имеет практического применения и в большей степени используется в научных целях.

Технической задачей нового способа является использование для тестирования кур мясного направления продуктивности, раздражающего вещества, которое даже в минимальных концентрациях вызывало бы проявление локального адаптационного синдрома, новый способ не должен вызывать общей стрессовой реакции организма и иметь высокую стабильность результатов.

Целью изобретения является повышение эффективности способа определения стрессовой чувствительности кур мясного направления продуктивности.

Сущность изобретения заключается в том, что перед определением стрессовой чувствительности кур в течение двух суток до тестирования, в день определения стрессовой чувствительности и двух суток после этого, им выпаивают с водой через автоматические поилки раствор лития цитрата в дозе 33-37 мг/кг живой массы для снижения общего раздражающего действия и стресса. В качестве раздражающего вещества используют 60-70% раствор скипидара на вазелиновом масле в дозе 0,10-0,15 мл на голову. Введение препаратов осуществляют с помощью безигольного внутрикожного инъектора для ветеринарии с плавной регулировкой доз от 0,05 до 0,2 мл. Скипидар обладает выраженным антисептическим действием, поэтому при постановке пробы не требуется дополнительной дезинфицирующей обработки места инъекции.

Для оценки результатов тестирования проводят "читку" местной реакции через 21 час, которая сохраняется до 36 часов с момента введения препарата, по наличию или отсутствию признаков воспаления (утолщение бородки, более высокая местная температура, выраженная краснота, болезненность при пальпации): при отсутствии перечисленных признаков реакция оценивается отрицательной и птица признается стресс-устойчивой; при наличии всех признаков воспаления (утолщение бородки 0,4 см и более, повышение местной температуры на 2°С и более по сравнению с интактной бородкой, выраженная краснота и болезненность) реакция считается положительной, и птица признается стресс-чувствительной в случаях, когда утолщение бородки менее 0,4 см, слабое покраснение, незначительная болезненность при пальпации и повышения местной температуры менее 2°С по сравнению с интактной бородкой реакция оценивается сомнительной и птица считается стресс-сомнительной.

Сопоставительный анализ с прототипом позволяет сделать вывод, что заявленный способ отличается тем, что перед определением стрессовой чувствительности кур в течение двух суток до тестирования в день определения стрессовой чувствительности и двух суток после этого птице выпаивают с водой через автоматические поилки раствор лития цитрата в дозе 33-37 мг на 1 кг. В птицеводстве соли лития применяют для профилактики стрессовых состояний кур. В заявляемом способе успокоительный эффект лития цитрата используется для ослабления проявлений общего адаптационного синдрома и способствует более легкому проведению отлова птицы, в то же время препарат в указанных дозах не влияет на проявление локального адаптационного синдрома в месте введения раздражающего вещества.

В отличие от прототипа в качестве раздражающего вещества предложен специфический раздражитель - скипидар (60-70% раствор на вазелиновом масле) в дозе 0,10-0,15 мл на голову, который вводится внутрикожно в область бородки птицы. Таким образом, заявляемое техническое решение соответствует условию патентоспособности «новизна».

Анализ известных технических решений (аналогов) по определению стрессовой чувствительности кур (птицы) позволяет сделать вывод об отсутствии в них признаков, сходных с существенными отличительными признаками в заявляемом способе. Анализ известных технических решений в животноводстве, используемых для определения стрессовой чувствительности животных, показал, что известен способ определения стрессовой чувствительности свиней (А.с. СССР 1653680 и А.с. РФ 2181000) при помощи скипидарной [5] и формалиновой пробы [6]. Однако свиньи относятся к классу млекопитающие, а куры - к классу птиц, у них разное анатомическое строение, есть существенные отличия в протекании физиологических и биохимических процессов, поэтому использование известных способов у кур затруднительно. Формалин является сильным канцерогеном, мутагеном для животных, обладает эмбриотоксическим и тератогенным действием и входит в группу веществ «вероятно канцерогенные для человека» [7], поэтому его парентеральное введение курам родительского направления продуктивности не рекомендуется. Это позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого способа условию патентоспособности «изобретательский уровень», так как для специалиста он явным образом не следует из уровня техники и науки.

Апробация заявленного способа в условиях птицефабрики показала, что он соответствует условию патентоспособности - «промышленная применимость».

Изобретение предназначено для птицеводческих предприятий, племенных репродукторов и селекционно-генетических центров, занимающихся селекцией кур мясного направления продуктивности.

Пример выполнения. Для разработки способа были проведены двукратные тестирования кур мясного направления продуктивности кросса ISA F15 с интервалом 14 суток. В качестве раздражающего средства использовали скипидар. Скипидар (масло терпентинное очищенное), по классификации Машковского М.Д., 2002 относится к группе средств растительного происхождения, стимулирующих рецепторы слизистых оболочек, кожи и подкожных тканей. Оказывает раздражающее, отвлекающее (обезболивающее) и антисептическое действие [8]. При подкожном или внутримышечном введении скипидар вызывает сильное раздражение и воспаление окружающих тканей с образованием асептического воспаления, через кровь, скипидар умеренно возбуждает центральную нервную систему. Заживление ран и язв от скипидара происходит быстрее, чем без него, так как он активизирует гранулирующие ткани и улучшает местное кровообращение. Этому же способствует противогнилостное и антисептическое действие скипидара [9].

Введение препаратов осуществляли с помощью безигольного внутрикожного инъектора для ветеринарии с плавной регулировкой доз от 0,05 до 0,2 мл. Использование безигольного инъектора обосновано тем, что по сравнению с введением раздражающего вещества с помощью шприца с иглой экономится время введения в среднем в 3,8 раза, при введении с помощью безигольного инъектора 4,1 сек против 15,6 сек при введении с помощью шприца с иглой. При этом введение с помощью шприца с иглой осложняется тем, что необходимо проводить стерилизацию инструмента или пользоваться одноразовыми шприцами, что экономически нецелесообразно при работе с большим поголовьем.

За основу брали данные, представленные в прототипе, доза для введения в область бородки - 0,1 мл, учет реакции через 24 часа после постановки пробы.

В качестве оценочных показателей течения местного адаптационного синдрома использовали утолщение бородки, которые измеряли кутиметром, с ценой деления 0,05 см, температуру кожи в месте введения исследовали пальпацией и с помощью электронного контактного термометра марки ТК-5.04 и сравнивали с интактной бородкой, болезненность при надавливании оценивали по реакции птицы на пальпацию и покраснение места введения визуально в сравнении с интактной бородкой. Учет реакции осуществляли каждые 3 часа первые 2 суток наблюдения, затем каждые 12 часов.

Скипидар обладает выраженным антисептическим действием, поэтому при постановке пробы не требуется дополнительной обработки места инъекции, в отличие от способа, представленного в качестве прототипа, где авторы указывают на необходимость использования асептики и антисептики.

Для оценки воздействия разных концентраций скипидара в условиях родительской площадки ЗАО «Уралбройлер» провели 2 серии опытов. В первой серии для тестирования использовали раствор скипидара на вазелиновом масле в разных концентрациях от 10 до 100%, с шагом 10%. Всего 10 групп по 10 голов в каждой. В результате оценки степени воздействия скипидара можно отметить, что внутрикожное введение скипидара в высоких концентрациях 90-100% оказывает ярко выраженную реакцию с последующим некрозом бородки у отдельных особей, являясь сверхпороговым раздражителем, он вызывает помимо воспалительной реакции общее стрессирующее и болевое воздействие. Концентрации 30-60% оказывают реакцию, но ее характер в большинстве случаев слабо выражен и не может быть достоверно оценен, признаки воспаления развиваются в течение 3 часов после реакции в виде незначительного покраснения бородки, однако через 6-9 часов признаки воспаления полностью отсутствуют. Концентрации скипидара 10-20% не оказали выраженного воздействия на ткани бородки. Поэтому в качестве раздражителя для второй серии опытов авторы выбрали 60, 70 и 80% раствор скипидара на вазелиновом масле, который оказывает умеренное болевое воздействие, яркую картину асептического воспаления, достоверное утолщение зоны воспаления. В качестве прототипа использовали сок каланхоэ.

Из показателей, характеризующих течение локального адаптационного синдрома в виде острого воспаления, наибольшей информативностью обладает утолщение бородки, которая в пик развития реакции может утолщаться в 2-5 раз, а также повышение локальной температуры, эти признаки следует считать основными. Остальные показатели можно использовать в качестве дополнительных и уточняющих. При наличии всех признаков воспаления: утолщение бородки от 0,4 см и более или более 2-х раз по сравнению с интактной бородкой, наличие повышенной местной температуры на 2°С и более по сравнению с интактной, также в случае положительной реакции должны быть покраснение и болезненность при пальпации. В случае отсутствия этих признаков реакция считается отрицательной, при утолщении бородки менее 0,4 см, отсутствии красноты, болезненности или повышения локальной температуры менее 2°С реакция считается сомнительной.

В таблице 1 дан сравнительный анализ тестирования кур с помощью 60, 70 и 80% масляного раствора скипидара на фоне применения лития цитрата и внутрикожного введения сока каланхоэ (прототип).

Повторную пробу проводили через 14 суток на том же поголовье с целью определения стабильности реакции. В таблице 2 представлены данные повторного тестирования.

Анализируя данные таблицы 1 и таблицы 2, следует отметить, что набольшей точностью обладает тестирование с помощью 70 и 60% масляного раствора скипидара, отклонения по выявлению положительно реагирующих особей составляют 1 и 3 головы соответственно, использование 80% концентрации скипидара не может быть объективным тестом, отклонение составляет 14 голов. При использовании сока каланхоэ наблюдается наивысшее отклонение, составляющее 27 голов, характер реакции слабо выражен, что осложняет тестирование и замедляет скорость отбора.

Использование 70% концентрации скипидара требует уточнение дозы и времени читки реакции. Для этого на территории родительской площадки ЗАО «Уралбройлер» проведены испытания четырех доз 0,05 мл, 0,10 мл, 0,15 мл и 0,20 мл. В опыте использовали 200 кур, с известной стрессовой чувствительностью в возрасте 32 недели. Для оценки оптимального времени учета реакции проводили оценку основных признаков реакции каждые 3 часа в течение 24 часов, каждые 6 часов в период 24-48 часов после реакции и каждые 12 часов в период до 7 суток с момента введения препарата.

Для удобства анализа, оценки и описания, характер локального адаптационного синдрома оценивали в крестах:

0 полное отсутствие местной реакции;

+ небольшое утолщение бородки до 0,1-0,2 см по сравнению с интактной, без выраженного покраснения, болезненности и повышения температуры;

++ утолщение бородки до 0,3-0,4 см, наличие красноты, отсутствие выраженной болезненности и повышение температуры менее 2°С.

+++ реакция сильно выражена, утолщение бородки более 0,3-0,4 см, протекает с выраженной болезненностью, краснотой, температура выше на 2°С по сравнению с интактной бородкой.

Результаты исследований представлены в таблице 3.

Введение раствора скипидара в бородку в дозе 0,05 мл характеризовалось небольшим утолщением бородки в течение 3 часов, без выраженного покраснения, болезненности и повышения температуры, к 6 часам после пробы признаки реакции отсутствовали у кур как с положительным, так и отрицательным типом реакции. Отсутствие реакции связано с тем, что доза 0,05 мл не обеспечивает проникновение раздражающего вещества в бородку, вследствие невозможности формирования пробивающей струи, создаваемой безигольным инъектором.

Введение раствора скипидара в дозе 0,01 и 0,15 мл характеризуется развитием сходных признаков в одинаковые промежутки времени. В период 3-6 часов после постановки пробы на месте введения происходило постепенное развитие признаков воспаления, которое к 12 часам у всех кур характеризовалось утолщением бородки до 0,3-0,4 см, наличием красноты, отсутствием выраженной болезненности и повышением температуры бородки. Через 15 часов после пробы у отрицательно реагирующих кур утолщение бородки становилось ниже и через 21 час после пробы реакция на введения раздражителя отсутствовала, в отличие от положительно реагирующих кур, у которых признаки воспаления становились более выражены. Пик развития реакции наблюдался в период с 21 до 36 часов после постановки пробы и к 42 часам признаки воспаления стали менее заметны, исчезая у большинства кур к 4 суткам после проведения пробы, у отдельных особей (16-20%) признаки воспаления исчезали только на 6-7 сутки после проведения пробы.

При введении раствора скипидара в дозе 0,20 мл происходит значительное повреждение тканей бородки у 25-30% кур, признаки воспаления постепенно достигают пика к 18 часам после пробы и ярко выражены у кур как с отрицательным типом реакции, так и с положительной реакцией. Через 30 часов происходит постепенное снижение признаков воспаления у кур с отрицательным типом реакции и к 60 часам признаки воспаления у них исчезают. У кур с положительным типом реакции признаки воспаления исчезают только на 6-7 сутки после проведения пробы. К 30 часам после проведения пробы происходит подсыхание поврежденных тканей и образование струпа.

Таким образом для проведения пробы с использованием 70% раствора скипидара оптимальная доза для введения в бородку составляет 0,10-0,15 мл, время читки реакции 21-36 часов после проведения пробы.

Скипидар помимо местного воздействия оказывает общее возбуждающее воздействие, за счет рефлекторного раздражения тканей и проникновения в кровь. Куры, которым вводили скипидар в область бородки на период 3-7 суток, в зависимости от степени стрессовой чувствительности, снижали яичную продуктивность, стресс-устойчивые в среднем на 4%, стресс-чувствительные на 37%, значительно снижался показатель оплодотворяемости яиц и увеличивался процент яиц с деформацией, за счет общего стрессового воздействия.

Для снижения общего воздействия скипидара на организм кур и облегчения отлова птиц за 2 суток до проведения скипидарной пробы, в день пробы и в течение 2 суток после проведения пробы групповым методом через автоматические поилки выпаивали водный раствор лития цитрата в дозе 35 мг на 1 кг живой массы. Соли лития - это препараты из группы «стабилизаторы настроения» (нормотимические средства), действующие на центральную нервную систему и обладающие психотропным эффектом [8]. По результатам исследований научной школы Преображенского С.Н. соли лития обладают на кур успокоительным эффектным и способны корректировать течение технологических стрессов в птицеводстве [10].

Для оценки влияния лития цитрата на результаты скипидарной пробы сформировали 2 группы кур по 100 голов возрастом 48 недель. Первой группе кур через автоматические поилки выпаивали водный раствор лития цитрата в дозе 35 мг на 1 кг живой массы за 2 суток до проведения скипидарной пробы, в день пробы и в течение 2 суток после проведения пробы, куры второй группы служили контролем. Курам обеих групп провели скипидарную пробу, результаты оценивали через 24 часа с момента введения раздражающего вещества. В результате в первой группе стресс-чувствительных кур было 23, стресс-сомнительных 12 и стресс-устойчивых 65, во второй группе 24, 12 и 64. Количество положительно, отрицательно и сомнительно реагирующих кур в группах, где применяли лития цитрат и группах, где проводили скипидарную пробу в чистом виде, отличалось на 1 голову, точность метода составляет 99%, поэтому можно сделать вывод, что применение лития цитрата не влияет на результаты скипидарной пробы.

Для оценки основных показателей продуктивности кур родительского стада были отобраны по 330 голов положительно и отрицательно реагирующих особей в возрасте 48 недель 300 кур и 30 петухов. Отбор кур 1 группы осуществляли с помощью введения в бородку 70% масляного раствора скипидара и выпаивания раствора лития цитрата, кур 2 группы отбирали с помощью введения сока каланхоэ (прототип), 3 группа кур была интактна и использовалась в качестве контрольной. Наблюдение за курами осуществляли в течение 28 суток до достижения курами возраста 52 недели.

В таблице 4 представлены данные по продуктивности кур с разной стрессовой чувствительностью.

Анализируя представленные данные, можно отметить, что достоверные различия между положительно и отрицательно реагирующими курами получены только при тестировании скипидаром, показатели, отобранные способом прототипа и положительно и отрицательно реагирующих особей, соответствуют данным, полученным в контрольной группе, что указывает на отсутствии специфичности при отборе методом с применением сока каланхоэ. Отсутствие достоверных данных при использовании способа, описанного в качестве прототипа, можно объяснить тем, что он был разработан на курах яичного направления продуктивности, которые имеют существенные физиологические, этологические и биохимические отличия от кур мясного направления продуктивности. Указанные отличия обусловлены особенностями функционирования нервно-эндокринной системы, которая определяет чувствительность к стрессам и развитие локального адаптационного синдрома, используемого при тестировании с помощью раздражающих веществ. Экономическую эффективность за 28 суток эксперимента рассчитывали на 100 условных голов положительно реагирующих и 100 условных голов отрицательно реагирующих куриц, опираясь на результаты, представленные в таблице 4. Учитывая, что средняя интенсивность яйцекладки у положительно реагирующих куриц составила 61,66%, то за 28 суток эксперимента от 100 голов положительно реагирующих куриц получено 1726 яиц, от отрицательно реагирующих куриц при интенсивности яйцекладки 70,71% получено 1980 яиц, т.е. на 254 яйца больше. Учитывая показатель выхода инкубационных яиц на уровне 66,11% для положительно реагирующих куриц и 68,16% для отрицательно реагирующих, для инкубации будет использовано 1139 яиц от положительно реагирующих и 1346 от отрицательно реагирующих куриц. Учитывая показатель вывода цыплят от положительно реагирующих кур на уровне 71,08% и отрицательно реагирующих на уровне 84,22%, за период наблюдений от 100 голов получено 809 цыплят и 1134 цыплят соответственно, т.е. от группы отрицательно реагирующих кур на 325 цыплят больше. При себестоимости суточного цыпленка 9,5 руб. прибыль за 28 дней от 100 голов составила 3087,5 рубля, учитывая, что в одной группе было по 300 голов, дополнительная прибыль при использовании стресс-устойчивых кур за 28 дней наблюдений составила 9262,5 руб.

Формирование стресс-устойчивого родительского стада кур мясного направления продуктивности способствует формированию правильной в производственном отношении иерархической структуры в группе, снижению агрессивности в стаде и каннибализма, снижению выбраковки кур, повышению оплодотворенности яиц и вывода цыплят. Список литературы

1. Патент Российской Федерации на изобретение 2264095. Способ подбора родительских пар птицы на повышение естественной резистентности, стресс-устойчивости и продуктивных качеств потомства, опубл. 10.05.2005 г.

2. Бондаренко, Г.М., Михайлов, М.В. Влияние светимости и фазы Луны при выводе на стресс-реакцию по биоэлектрическим показателям кур. Труды ГНУ «Ставропольский научно-исследовательский институт животноводства и кормопроизводства», г.Ставрополь, Россия, 2009.

3. Патент на изобретение 2174752. Способ определения стресс-устойчивости кур в раннем возрасте, опубл. 20.10.2001 г.

4. Машковский, М.Д. Лекарственные средства: в 2 т. Т2. - 14 изд., пераб., испр. и доп., М.: ООО "Издательство Новая волна", - 2002. - 608 с.

5. Патент СССР на изобретение 1653680. Способ определения стрессовой чувствительности свиней. Опубл. 08.02.91 г.

6. Патент РФ 2181000. Способ определения стрессовой чувствительности свиней, опубл. 10.04.2002.

7. Гигиенические нормативы ГН 1.1.725-98 "Перечень веществ, продуктов, производственных процессов, бытовых и природных факторов, канцерогенных для человека" (утв. постановлением Главного государственного санитарного врача РФ от 23 декабря 1998 г. N 32)

8. Машковский, М.Д. Лекарственные средства: в 2 т. Т1. - 14 изд., пераб., испр. и доп. М.: ООО "Издательство Новая волна", - 2002. - 540 с.

9. Мозгов И.Е. Фармакология. Изд. 5-е. Учебник для с/х вузов. - М.: Колос, 1969. - 447 с.

10. Преображенский С.Н., Евтинов И.А. Коррекция технологическихстрессов в птицеводстве солями лития (Лития цитрат, сукцинат, карбонат). - Ветеринария, 2006; N 11. - С.46-49.

Формула изобретения

Способ определения стрессовой чувствительности кур мясного направления продуктивности, включающий внутрикожное введение в бородку раздражающего вещества, оценку реакции по степени выраженности локального адаптационного синдрома, отличающийся тем, что в течение двух суток до тестирования, в день введения раздражающего вещества и двух суток после этого курам через автоматические поилки выпаивают раствор лития цитрата в дозе 33-37 мг/кг живой массы, в качестве раздражающего вещества используют 60-70%-ный раствор скипидара на вазелиновом масле в дозе 0,10-0,15 мл, оценку результатов тестирования проводят через 21-36 ч по наличию или отсутствию признаков воспаления - утолщение бородки, более высокая местная температура, краснота, болезненность: при отсутствии признаков реакция считается отрицательной, и птица признается стресс-устойчивой; при наличии всех признаков - утолщение бородки на 0,4 см и более, повышение местной температуры более 2°С по сравнению с интактной бородкой, краснота и болезненность - реакция считается положительной, и птица признается стресс-чувствительной, в остальных случаях при наличии отдельных признаков воспаления - утолщении бородки до 0,4 см, но отсутствии красноты, болезненности и повышения местной температуры менее 2°С, реакция признается сомнительной, и птица считается стресс-сомнительной.